不同来源细菌对氟苯尼考的耐药性分析及其floR基因传播机制的研究摘要：目的本实验主要研究不同来源(包括鸡源、鸭源、牛源、水源、土壤以及虾源）细菌的floR基因传播情况，了解氟苯尼考耐药性在不同动物源细菌的变迁趋势、生物学特性和耐药谱，对氟苯尼考耐药性进行危险性评估，并从基因水平对细菌氟苯尼考耐药机制进行探讨，从而为耐药性的有效防治和新兽药开发提供参考。方法本研究通过伯杰细菌鉴定手册第八版并结合16srRNA对细菌进行初步的分离鉴定；按琼脂稀释法对所有细菌进行氟苯尼考等5种抗生素的药物敏感性试验以获得药敏谱；通过脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行分子分型确认不同来源的耐药菌的播散情况；通过菌落及基因组和质粒进行PCR扩增筛查floR基因阳性菌株；质粒结合试验检测携带floR基因的耐药质粒的转移性，并获得含有携带floR基因质粒的接合菌，以进一步用酶切和PCR分析携带floR基因的耐药质粒结构；通过PCR反应研究耐药性基因与插入序列、转座子、整合子等可移动元件的关系；对扩增的不同源细菌耐氟苯尼考基因floR进行测序和分析。结果在206株分离株中，以大肠杆菌最为常见；琼脂稀释法药敏检测氟苯尼考耐药性同PCR方法检测floR基因阳性呈现高度一致性；对整合子Ⅰ的基因研究发现在通过接合实验获得12株含携带floR基因质粒的接合菌。结论耐氟苯尼考抗菌药物的细菌检出率较高，常见于耐氟苯尼考的大肠杆菌；且floR耐药基因多以质粒结合和可移动DNA元件进行传播；整合子Ⅰ在介导细菌多重耐药方面有重要作用。关键词：：细菌；氟苯尼考；耐药性；floR基因传播机制近年来兽药抗生素在畜禽养殖中大量使用，大部分抗生素未经代谢以母体化合物形式随粪便排出体外，导致抗生素在环境中积累，由此诱导抗性微生物和抗生素抗性基因的产生，对人畜健康构成极大的潜在威胁[?]。其中，因广谱、高效的特性而广泛使用于兽医临床的氟苯尼考（Florfenicol）引起了人们的关注。氟苯尼考已在亚洲、欧洲、美洲等20多个国家上市，主要用于猪、牛、鱼及禽类疾病的治疗[1]。但由于临床使用不当，其耐药菌株的发生率逐年上升，继巴氏杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌等耐氟苯尼考菌株的分离，??检测出了氟苯尼考耐药基因floR[2-4]，甚至在临床上也发现了对氟苯尼考耐药的人源大肠杆菌[5]。耐药性可通过食物链或环境在人与食品、人与人或人畜之间传递，故对人、动物共患病原菌中floR基因的传播途径和机制的研究就显得十分重要。本课题旨在研究氟苯尼考耐药现状和氟苯尼...
