38-0816-大鼠心组织MDA含量测定过程(1).doc

浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛　实验记录　　序号：　　 实验时间：　　月　 日　　8:30　－　20:30　　　　　　　请勿透露学校、教师和个人信息 大鼠心组织MDA含量测定过程 【实验目的】 熟悉并掌握MDA试剂盒的使用方法；测定大鼠心组织MDA含量 【实验材料】 大鼠心组织匀浆液、MDA试剂盒、分光光度计、水浴锅等 【实验步骤】 1. 组织研磨：将解冻的心组织于玻璃匀浆器中，加入裂解液（1mL/0.06g组织），冰上研磨 2. 将匀浆液加入到EP管中，4℃放置30 min，4℃下2000 r/min离心10 min，取上清液 4.混合试剂的配制： a） 测定管混合试剂：取 2mL 1号试剂、60 mL 2号试剂、20 mL 3号试剂共82 mL 分装于2只50 mL离心管中； b)对照管混合试剂：取2 mL 1号试剂、60 mL 2号试剂、20 mL 50%冰醋酸共82 mL 分装于2只50 mL离心管中 5.对22只试管进行分组编号 6.加样： 标准管 标准空白管 测定管 测定空白管 样本数 2 2 18 18 10nmol/mL 标准品（mL） 0.1 无水乙醇（mL） 0.1 测试样品（mL） 0.1 0.1 测定管混合试剂（mL） 4 4 4 对照管混合试剂（mL） 4 7.将所有试管旋涡混合器混匀，试管口用保鲜膜扎紧，用针头刺一小孔，95℃水浴40 min 8.水浴40 min后取出试管，流水冷却，53 nm处，1cm光径，蒸馏水调零，测各管吸光度 9.数据记录及处理