浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号:实验时间:月日8:30-20:30请勿透露学校、教师和个人信息大鼠心组织MDA含量测定过程【实验目的】熟悉并掌握MDA试剂盒的使用方法;测定大鼠心组织MDA含量【实验材料】大鼠心组织匀浆液、MDA试剂盒、分光光度计、水浴锅等【实验步骤】1.组织研磨:将解冻的心组织于玻璃匀浆器中,加入裂解液(1mL/0.06g组织),冰上研磨2.将匀浆液加入到EP管中,4℃放置30min,4℃下2000r/min离心10min,取上清液4.混合试剂的配制:a)测定管混合试剂:取2mL1号试剂、60mL2号试剂、20mL3号试剂共82mL分装于2只50mL离心管中;b)对照管混合试剂:取2mL1号试剂、60mL2号试剂、20mL50%冰醋酸共82mL分装于2只50mL离心管中5.对22只试管进行分组编号6.加样:7.将所有试管旋涡混合器混匀,试管口用保鲜膜扎紧,用针头刺一小孔,95℃水浴40min8.水浴40min后取出试管,流水冷却,53nm处,1cm光径,蒸馏水调零,测各管吸光度9.数据记录及处理标准管标准空白管测定管测定空白管样本数22181810nmol/mL标准品(mL)0.1无水乙醇(mL)0.1测试样品(mL)0.10.1测定管混合试剂(mL)444对照管混合试剂(mL)4