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,【例证】某同学在学完菊花的组织培养内容之后,决定利用课余时间去实践这项技术培养出美丽的菊花来美化教室的环境。(1)制备MS固体培养基时,一般使用4保存的配制好的培养母液来制备。配制时应先根据_和_计算各种母液的用量以及_和_的用量。整个过程的操作顺序是:_。,(2)MS培养基含有_多种营养成分。其中_6种属于大量元素;_9种属于微量元素,能源物质是_。由于菊花的茎段组织培养比较容易,所以不必加_。(3)将分装好的培养基连同培养器械一起进行_灭菌。(4)选取菊花的外植体,用_的乙醇和_的次氯酸钠溶液来消毒,消毒时间不宜过长。(5)接种时要特别注意,每瓶接种_个外植体。盖上封口膜,温度控制在_,并且每日用日光灯照_。,(6)若干天后发现有的锥形瓶长出可爱的菊花幼苗,有的锥形瓶培养失败,还长出许多杂菌菌落。试分析其可能的原因。【精讲精析】在配制MS固体培养基时,先确定培养基的体积,根据母液的浓缩倍数计算用量,并加蒸馏水稀释。培养基的成分应包括:琼脂(作为凝固剂)、蔗糖(作为碳源)、大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母液,并用蒸馏水定容到1 000毫升,调节适宜的pH,分装灭菌后备用。在菊花组织培养中,可以不添加植物激素,原因是菊花茎段组织培养比较容易。灭菌采取的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。组成,生物体的元素大约有20多种,其中属于大量元素的有N、P、K、Ca、Mg、S等,属于微量元素的有Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co、Cl等。选取了材料以后要进行消毒,先在70%的乙醇中浸泡10min,再放入5%的次氯酸钠溶液中浸泡5min,然后用另一5%的次氯酸钠溶液浸泡5min,最后在超净台中用无菌水清洗。利用无菌技术将外植体接种到锥形瓶中,盖上封口膜,放在1825的环境中培养,保持每天光照不少于14.5h。若外植体消毒不彻底或是培养基灭菌不彻底,或操作过程中混入杂菌,都会使实验失败,得不到植株幼苗。,答案:(1)要配制的培养基的体积 各种母液的浓缩倍数 琼脂 蔗糖 计算称量融化加母液定容调pH分装灭菌(2)20 N、P、K、Ca、Mg、S Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co、Cl 蔗糖 植物激素(3)高压蒸汽(4)体积分数为70%5%(5)23 18 25 不少于14.5h(6)外植体消毒或培养基灭菌不彻底,接种时无菌操作不规范。,【互动探究】(1)菊花组织培养的初期需要给予光照吗?提示:在菊花组织培养的脱分化阶段不需要光照,再分化阶段需要光照。(2)植物组织培养基与微生物培养基成分上有何区别?提示:大多数的微生物都是异养型,所以其培养基成分以碳源、氮源等有机养料为主,而植物培养基中以水、无机盐和一些矿质元素为主,另外还具有相关的植物激素。,1.(温州模拟)如图是利用基因型为AaBb的某二倍体植物作为实验材料所做的一些实验示意图,请分析回答:,(1)途径1、2、3中过程所采用的生物技术是_。(2)由途径1形成的植株B的基因型为_,植株B成熟时不可育的原因是_。使植株B可育的方法是_。(3)从 到 的培育过程,需要调控的植物激素至少有_。(4)一般情况下,相同发育程度的植株C与植株E的性状_(填“相同”、“不相同”或“不一定相同”)。(5)从植株A到植株C的过程属于_,从植株A到植株B的过程属于_。(均填生殖方式)(6)在相同条件和相同发育程度的情况下,植株E表现型同于植株A的可能性为_。,【解析】(1)实验中选用花药或叶片离体培养后获得新植株,该项技术称为植物组织培养。(2)植株A的基因型为AaBb,经减数分裂形成的花粉粒有AB、Ab、aB、ab四种,花粉粒经植物组织培养形成的植株B也有AB、Ab、aB、ab四种基因型,均为单倍体植株,由于不能形成正常的生殖细胞而不可育,若使植株B可育常采用染色体加倍法。(3)植物组织培养中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。,(4)植株A、E、C具有相同的基因组成,相同条件和相同发育程度的情况下,它们的性状表现相同。(5)植株C由植株A的体细胞培育而成,属于无性生殖,植株B由植株A的花粉粒发育而来,属于有性生殖。(6)植株A的花药壁是其体细胞,经组织培养发育成为植株E,为无性生殖,不发生基因重组,在相同条件和相同发育程度的情况下,二者表现型应完全相同。,答案:(1)植物组织培养(2)AB、Ab、aB、ab 减数分裂时染色体联会紊乱,不能形成正常的生殖细胞 染色体加倍法(3)细胞分裂素与生长素(4)相同(5)营养生殖(无性生殖)有性生殖(6)100%,2.如图是胡萝卜根进行组织培养的某些过程示意图。请据图回答:(1)把组织培养的过程按正常顺序排列(以字母表示)_。,(2)实验前试管和培养基应做_处理。(3)要促进外植体细胞分裂和生长,培养基中除了必需的营养物质外,还有_和_。(4)图D上的细胞团是_,它的特点是_。该细胞团的形成应该在_(黑暗或光照)条件下进行,细胞团分化形成芽和根,再由芽发育成叶和茎,这一过程应在_(黑暗或光照)条件下进行,原因是_能利用光能制造有机物供试管苗生长发育。(5)从原理上讲,植物细胞有形成再生植株的可能性,这是_的表现。,【解析】植物组织培养的原理是细胞的全能性。离体的细胞、组织或器官给予充足的营养、适宜的条件能脱分化形成愈伤组织,再分化出根和芽,发育成幼苗。在植物组织培养过程中生长素和细胞分裂素的使用对外植体的脱分化和再分化起关键作用。外植体脱分化形成的细胞团(愈伤组织)呈无定形、排列疏松、液泡化的状态,这一过程不需要光照,而再分化的过程中需要适宜的光照,在分化形成幼苗的过程中,叶绿体要进行光合作用,制造有机物供幼苗生长发育所需。,答案:(1)B、D、C、A(2)灭菌(3)生长素 细胞分裂素(4)愈伤组织 排列疏松、无定形、液泡化 黑暗 光照叶绿体(5)细胞全能性,Thank you!,