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临床医学检验技师考试辅导　　　　　 临床免疫学和免疫检验 　　　　　　　　　 第九章 酶免疫技术 一、A1 1、在双位点ELISA实验中，造成抗原检测值低于实际含量的常见原因是 A、固相抗体过多 B、反应时间不够 C、标记抗体过多 D、待测物过浓 E、酶活性过高 2、ELISA中最常用的固相载体是 A、聚氯乙烯 B、聚苯乙烯 C、三聚氰胺 D、琼脂糖 E、尼龙膜 3、ELISA板包被后，最常用的封闭物质是 A、人白蛋白 B、人球蛋白 C、牛血清白蛋白 D、牛血清球蛋白 E、鼠白蛋白 4、下列哪项不是血药浓度免疫学测定的技术 A、化学发光免疫测定 B、免疫电泳法 C、放射免疫法 D、荧光免疫法 E、酶免疫法 5、用ELISA双抗体夹心法检测抗原A时，固相载体的包被物是 A、酶标记A抗体 B、未标记的抗A抗体 C、未标记抗原A D、酶标抗球蛋白抗体 E、酶标记抗原A 6、下列对血清中酶活力的测定的描述哪一项是错误的 A、可测定产物生成量 B、可测定底物消耗量 C、需最适pH D、需最适温度 E、与底物浓度无关 7、酶免疫技术用于样品中物质的定量测定是基于 A、酶标记物参与免疫应答 B、酶催化免疫反应，复合物中酶活性与样品测值呈正比 C、含酶标记物的免疫复合物中的酶可催化底物成色，其色泽与待测物量相关 D、固相化技术的应用，使结合和游离的酶标记物能有效的分离 E、酶与抗原或抗体的特异结合 8、辣根过氧化物酶的酶活性基团为 A、糖蛋白 B、亚铁血红素 C、活跃糖基 D、醛基 E、羟基 9、具备化学发光免疫分析的最重要的条件是 A、反应过程中必须保证信号接收的灵敏度 B、反应过程中必须保证产生足够的先量子 C、反应过程中必须保证有发光物质对光的吸收 D、反应过程中必须保证产生足够的激发能 E、反应过程中必须保证有发光物质对光的发射 10、下列说法错误的是 A、TMB是ELISA中应用最广泛的底物。 B、一般采用四甲基联苯胺作为AP的底物 C、AP系统的敏感性一般高于应用HRP系统 D、AP较难得到高纯度制剂，稳定性较HRP低，价格较HRP高，制备酶结合物时得率也较HRP低 E、β－半乳糖苷酸的底物常用4-甲基酮基-β-D半乳糖苷 11、下列不属于酶标记技术的是 A、单向免疫扩散试验 B、蛋白质印迹法 C、免疫渗滤试验 D、免疫层析试验 E、斑点－ELISA 12、酶联免疫吸附试验（ELISA）中应用最多的底物是 A、邻苯二胺（OPD） B、四甲基联苯胺（TMB） C、ABTS D、对硝基苯磷酸酯 E、以上都不是 13、检测IgM抗体最常用的酶联免疫吸附试验类型是 A、间接法 B、捕获法 C、竞争法 D、双抗原夹心法 E、直接法 二、B 1、 A.间接法 B.双抗体夹心法测抗原 C.竞争法测抗体 D.捕获法 E.竞争法测抗原 <1> 、以下示意图是哪一种ELISA检测模式 A、 B、 C、 D、 E、 <2> 、以下示意图是哪一种ELISA检测模式 A、 B、 C、 D、 E、 <3> 、以下示意图是哪一种ELISA检测模式 A、 B、 C、 D、 E、 答案部分 一、A1 1、 【正确答案】 D 【答案解析】 测定时将含待测抗原标本和酶标抗体同时加入进行反应，两种抗体互不干扰，经过一次温育和洗涤后，即可加入底物进行显色测定。但当待测抗原浓度过高时，过量的抗原可分别同固相抗体和酶标抗体结合而抑制夹心复合物的形成，出现钩状效应 【答疑编号100419086】 2、 【正确答案】 B 【答案解析】 将抗原或抗体结合在固相载体上的过程称为包被。由于载体的不同，包被的方法也不同。目前普遍使用的聚苯乙烯载体，通常将抗原或抗体溶于缓冲液（常用为pH9.6的碳酸盐缓冲液）中，加于ELISA板孔中4℃过夜。包被好的固相载体在低温可放置一段时间而不失去免疫活性。 【答疑编号100419085】 3、 【正确答案】 C 【答案解析】 ELISA板包被后最常用的封闭物质是牛血清白蛋白。 【答疑编号100419084】 4、 【正确答案】 B 【答案解析】 药物多数分子量很小，为半抗原。免疫电泳的方法不够灵敏，不适于测定半抗原。 【答疑编号100419083】 5、 【正确答案】 B 【答案解析】 ELISA法中双抗体夹心法的固相载体包被物是未标记的抗待测抗原的抗体。 【答疑编号100419082】 6、 【正确答案】 E 【答案解析】 酶促反应中需要最适pH、温度及过量的底物，反应速度可用一定时间内产物生成量或底物消耗量来反映。 【答疑编号100419081】 7、 【正确答案】 C 【答案解析】 酶免疫技术是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。 【答疑编号100419080】 8、 【正确答案】 B 【答案解析】 辣根过氧化物酶由糖蛋白和亚铁血红素组成，其酶活性基团为亚铁血红素。 【答疑编号100419091】 9、 【正确答案】 D 【答案解析】 化学发光的首要条件是吸收了化学能而处于激发态的分子或原子必须释放出光子或将能量转移到另一个物质的分子上并使这种分子发光，故必须产生足够的激发能是重要条件。 【答疑编号100419090】 10、 【正确答案】 B 【答案解析】 邻苯二胺为在ELISA中应用最多的底物。一般采用对硝基苯磷酸酯作为碱性磷酸酶（AP）的底物。在ELISA中应用AP系统，其敏感性一般高于应用HRP系统，空白值也较低。但AP较难得到高纯度制剂，稳定性较HRP低，价格较HRP高，制备酶结合物时得率也较HRP低。在ELISA中，β-半乳糖苷酸的底物常用4-甲基酮基-β-D半乳糖苷。 【答疑编号100419089】 11、 【正确答案】 A 【答案解析】 酶标记技术主要包括：斑点-ELISA、蛋白质印迹法、斑点免疫渗滤试验和斑点免疫层析试验等。 【答疑编号100419088】 12、 【正确答案】 B 【答案解析】 邻苯二胺灵敏度高，比色方便，是ELISA中应用最早的底物，也稳定性差，反应过裎需要避光，还具有致癌性；四甲基联苯胺稳定性好，反应无需避光，没有致突变作用，是目前应用最广泛的底物，但是水溶性差。 【答疑编号100419087】 13、 【正确答案】 B 【答案解析】 捕获法：又称反向间接法。主要用于血清中某种抗体亚型成分（如IgM）的测定，目前最常用的是病原体急性感染诊断中的IgM型抗体。 【答疑编号100419092】 二、B 1、 <1>、 【正确答案】 B 【答案解析】 【答疑编号100419100】 <2>、 【正确答案】 C 【答案解析】 【答疑编号100419101】 <3>、 【正确答案】 A 【答案解析】 【答疑编号100419102】 　　　　　　 第6页