植物组织培养实验(6).ppt

实验六菊花不定芽的增殖和生根,（一）实验目的掌握菊花不定芽的增殖和生根技术，进一步熟悉植物组织继代培养操作过程。,（二）实验原理在不同的条件下（主要是植物生长调节剂配比的不同），不定芽可以增殖产生更多的不定芽，也可以诱导生根。生根培养基要减少或除去细胞分裂素，增加生长素。,（三）实验材料和用具 实验材料：菊花不定芽实验药品：MS、1mg/ml NAA、1mg/ml 6-BA、1mol/L HCl、1mol/L NaOH、蒸馏水、灯用酒精、70酒精。,灭菌培养基：MS4、MS7和MS8实验用具：天平、烧杯、玻璃棒、量筒、移液枪、三角瓶、pH试纸、电炉、高压灭菌锅。无菌室、无菌滤纸、无菌培养皿、镊子、剪刀、酒精灯、酒精棉花、滴管、记号笔、废液罐、火柴、光照培养箱。,（四）实验步骤 配制以下培养基各100ml：MS8：MS+2.0mg/L NAAMS9：MS+3.0mg/L 2,4-D+3.0mg/L KT取200ml烧杯2只，标记，各加入4g MS培养基和100ml蒸馏水，加热直至完全溶解。MS8加入 1mg/ml NAA 200l，并不断搅拌。MS9分别加入 1mg/ml 2,4-D 和KT 各300l，并不断搅拌。用1mol/L HCl或NaOH调节pH至5.86.0。,分装。将2种培养基分别分装到4个三角瓶中，做好标记。灭菌。用高压蒸汽灭菌锅在121、0.1MPa条件下灭菌1520min。操作按仪器操作步骤进行。灭菌后待压力下降到0Pa时取出，凝固后待用。,4.接种 进入无菌室，用70乙醇擦洗双手和工作台面，点燃酒精灯。解开三角瓶的绳子，将三角瓶按使用顺序排好。在火焰边打开三角瓶的封口纸，烧灼瓶口和镊子，待镊子冷却后夹取不定芽，在无菌滤纸（平皿）上剪成单芽，转移至新鲜培养基上，每瓶接5芽。每组每种培养基接种4瓶。光照培养箱25、60光照16h/d培养。,作业,1周后观察培养体系有无污染，计算每一个平皿内染菌芽数和芽外的菌落数，分析染菌原因。1周后观察每种培养基上不定芽的变化情况，是芽增殖还是生根？计算其芽（根）的诱导率（形成芽（根）的芽数/总芽数100）。,实验报告内容,实验名称实验目的实验原理实验材料和用具实验步骤实验结果与分析,