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植物组织培养实验(6).ppt植物组织培养实验(6).ppt植物组织培养实验(6).ppt
实验六菊花不定芽的增殖和生根实验六菊花不定芽的增殖和生根(一)实验目的(一)实验目的掌握菊花不定芽的增殖和生根技术,进一步熟悉掌握菊花不定芽的增殖和生根技术,进一步熟悉植物组织继代培养操作过程。植物组织继代培养操作过程。(二)实验原理(二)实验原理在不同的条件下(主要是植物生长调节剂在不同的条件下(主要是植物生长调节剂配比的不同),不定芽可以增殖产生更多配比的不同),不定芽可以增殖产生更多的不定芽,也可以诱导生根。生根培养基的不定芽,也可以诱导生根。生根培养基要减少或除去细胞分裂素,增加生长素。要减少或除去细胞分裂素,增加生长素。(三)实验材料和用具(三)实验材料和用具实验材料:实验材料:菊花不定芽菊花不定芽实验药品实验药品::MSMS、、1mg/mlNAA1mg/mlNAA、、1mg/ml6-BA1mg/ml6-BA、、1mol/LHCl1mol/LHCl、、1mol/LNaOH1mol/LNaOH、蒸馏水、、蒸馏水、灯用酒精、灯用酒精、7070%酒精。%酒精。灭菌培养基:灭菌培养基:MS4MS4、、MS7MS7和和MS8MS8实验用具:实验用具:天平、烧杯、玻璃棒、量筒、移液枪、三天平、烧杯、玻璃棒、量筒、移液枪、三角瓶、角瓶、pHpH试纸、电炉、高压灭菌锅。试纸、电炉、高压灭菌锅。无菌室、无菌滤纸、无菌培养皿、镊子、无菌室、无菌滤纸、无菌培养皿、镊子、剪刀、酒精灯、酒精棉花、滴管、记号笔、剪刀、酒精灯、酒精棉花、滴管、记号笔、废液罐、火柴、光照培养箱。废液罐、火柴、光照培养箱。(四)实验步骤(四)实验步骤1.1.配制以下培养基各配制以下培养基各100ml100ml::MS8MS8::MS+2.0mg/LNAAMS+2.0mg/LNAAMS9MS9::MS+3.0mg/L2,4-D+3.0mg/LKTMS+3.0mg/L2,4-D+3.0mg/LKT①①取取200ml200ml烧杯烧杯22只,标记,各加入只,标记,各加入4gMS4gMS培养基和培养基和1100ml00ml蒸馏水,加热直至完全溶解。蒸馏水,加热直至完全溶解。②②MS8MS8加入加入1mg/mlNAA200µl1mg/mlNAA200µl,并不断搅拌。,并不断搅拌。③③MS9MS9分别加入分别加入1mg/ml2,4-D1mg/ml2,4-D和和KTKT各各300µl300µl,并,并不断搅拌。不断搅拌。④④用用1mol/LHCl1mol/LHCl或或NaOHNaOH调节调节pHpH至至5.85.8~~6.06.0。。2.2.分装。将分装。将22种培养基分别分装到种培养基分别分装到44个三角瓶中,个三角瓶中,做好标记。做好标记。3.3.灭菌。用高压蒸汽灭菌锅在灭菌。用高压蒸汽灭菌锅在121℃121℃、、0.1MPa0.1MPa条条件下灭菌件下灭菌1515~~20m...

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