实验一实验一11、培养基配制及其灭菌、培养基配制及其灭菌(一)实验目的(一)实验目的巩固培养基相关理论知识,掌握培养基配制方法巩固培养基相关理论知识,掌握培养基配制方法及灭菌技术。及灭菌技术。(二)实验原理(二)实验原理培养基一般包括无机盐、有机化合物和植培养基一般包括无机盐、有机化合物和植物生长调节剂三大基本组成成分。物生长调节剂三大基本组成成分。MSMS培培养基是最常用的培养基。商品养基是最常用的培养基。商品MSMS培养基培养基已经包含无机盐、有机化合物、蔗糖和琼已经包含无机盐、有机化合物、蔗糖和琼脂,只需按比例加水溶解,再加入所需的脂,只需按比例加水溶解,再加入所需的植物生长调节剂即可。各种植物生长调节植物生长调节剂即可。各种植物生长调节剂一般配制成母液(剂一般配制成母液(0.1mg/ml0.1mg/ml或或1mg/m1mg/mll),冰箱贮存,使用时按浓度定量吸取加),冰箱贮存,使用时按浓度定量吸取加入。入。培养基的培养基的pHpH值一般值一般5.05.0~~6.06.0,最常用的是,最常用的是5.5.66~~5.85.8。大于。大于6.06.0,培养基变硬;低于,培养基变硬;低于5.05.0,琼,琼脂凝固不好。高压灭菌后稍有下降,所以灭菌前脂凝固不好。高压灭菌后稍有下降,所以灭菌前要略调高。一般用要略调高。一般用1mol/L1mol/L的盐酸或氢氧化钠调节。的盐酸或氢氧化钠调节。配制好的培养基要及时灭菌,一般采用高压蒸汽配制好的培养基要及时灭菌,一般采用高压蒸汽灭菌,如含有高温不稳定的成分,如某些植物生灭菌,如含有高温不稳定的成分,如某些植物生长调节物质,则要采用过滤除菌。长调节物质,则要采用过滤除菌。(三)实验材料和用具(三)实验材料和用具实验药品实验药品::MSMS培养基、培养基、1mg/mlNAA1mg/mlNAA、、1mg/ml6-BA1mg/ml6-BA、、1mol/LHCl1mol/LHCl、、1mol/LNa1mol/LNaOHOH、蒸馏水。、蒸馏水。实验用具:实验用具:天平、烧杯、玻璃棒、量筒、天平、烧杯、玻璃棒、量筒、移液枪、三角瓶、移液枪、三角瓶、pHpH试纸、电炉、高压灭试纸、电炉、高压灭菌锅。菌锅。(四)实验步骤(四)实验步骤1.1.配制以下培养基配制以下培养基200ml200ml::MS1MS1::MS+1.0mg/LBA+0.5mg/LNAAMS+1.0mg/LBA+0.5mg/LNAA①①称取称取8gMS8gMS培养基,加入培养基,加入200ml200ml蒸馏水,加蒸馏水,加热直至完全溶解。热直至完全溶解。②②依次加入依次加入1mg/mlNAA100µl1mg/mlNAA100µl和和1mg...