植物组织培养实验(2)(1).pptVIP免费

实验二黄瓜无菌苗愈伤组织的诱导实验二黄瓜无菌苗愈伤组织的诱导（一）实验目的（一）实验目的掌握黄瓜无菌苗愈伤组织的诱导技术，熟悉植物掌握黄瓜无菌苗愈伤组织的诱导技术，熟悉植物组织继代培养操作过程。组织继代培养操作过程。（二）实验原理（二）实验原理在一定的条件下，不同器官（根、茎、叶在一定的条件下，不同器官（根、茎、叶等）来源的外植体均可以脱分化形成愈伤等）来源的外植体均可以脱分化形成愈伤组织。组织。（三）实验材料和用具（三）实验材料和用具实验材料：实验材料：黄瓜无菌苗黄瓜无菌苗实验药品实验药品：：MSMS、、1mg/mlNAA1mg/mlNAA、、1mg/ml6-BA1mg/ml6-BA、、1mol/LHCl1mol/LHCl、、1mol/LNaOH1mol/LNaOH、蒸馏水、、蒸馏水、灯用酒精、灯用酒精、7070％酒精、无菌水。％酒精、无菌水。灭菌培养基：灭菌培养基：MS1MS1（（MS+1.0mg/LBA+0.5mgMS+1.0mg/LBA+0.5mg/LNAA/LNAA））实验用具：实验用具：天平、烧杯、玻璃棒、量筒、移液枪、三天平、烧杯、玻璃棒、量筒、移液枪、三角瓶、角瓶、pHpH试纸、电炉、高压灭菌锅。试纸、电炉、高压灭菌锅。无菌室、无菌滤纸、无菌培养皿、烧杯、无菌室、无菌滤纸、无菌培养皿、烧杯、解剖刀、镊子、剪刀、酒精灯、酒精棉花、解剖刀、镊子、剪刀、酒精灯、酒精棉花、滴管、记号笔、废液罐、火柴、光照培养滴管、记号笔、废液罐、火柴、光照培养箱。箱。（四）实验步骤（四）实验步骤1.1.配制以下培养基各配制以下培养基各100ml100ml：：MS2MS2：：MS+2.0mg/LBA+0.1mg/LNAAMS+2.0mg/LBA+0.1mg/LNAAMS3MS3：：MS+2.0mg/LBA+0.5mg/LNAAMS+2.0mg/LBA+0.5mg/LNAAMS4MS4：：MS+2.0mg/LBA+2.0mg/LNAAMS+2.0mg/LBA+2.0mg/LNAA①①取取200ml200ml烧杯烧杯33只，标记，各加入只，标记，各加入4gMS4gMS培养培养基和基和100ml100ml蒸馏水，加热直至完全溶解。蒸馏水，加热直至完全溶解。②②各加入各加入1mg/ml6-BA200µl1mg/ml6-BA200µl，并不断搅拌。，并不断搅拌。③③分别加入分别加入1mg/mlNAA101mg/mlNAA10、、5050、、200µl200µl，并，并不断搅拌。不断搅拌。④④用用1mol/LHCl1mol/LHCl或或NaOHNaOH调节调节pHpH至至5.85.8～～6.06.0。。2.2.分装。将分装。将33种培养基分别分装到种培养基分别分装到44个三角瓶中，个三角瓶中，做好标记。做好标记。3.3.灭菌。用高压蒸汽灭菌锅在灭菌。用高压蒸汽灭菌锅在121℃121℃、、0.1MPa0.1MPa条条件下灭菌件下灭菌151...