血清CCL20、MMP-2水平变化与类风湿性关节炎患者DAS28评分的相关性及临床意义.pdf

52Medical Laboratory Science and Clinics,2023,Vol.34,No.8医学检验与临床2 0 2 3年第34卷第8 期doi:10.3969/j.issn.1673-5013.2023.08.012血清 CCL20、M M P-2 水平变化与类风湿性关节炎患者DAS28 评分的相关性及临床意义李雪莹刘倩(南阳市医学高等专科学校第一附属医院检验科，河南南阳47 30 0 0)摘要 目的：探讨类风湿性关节炎（RA）患者血清炎性趋化因子配体2 0（CCL20)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2）水平变化，分析其与2 8 个关节疾病活动度评分(DAS28)、影像学分级相关性，及其对疾病活动度的预测价值。方法：选取2 0 2 0 年3月-2 0 2 1年2 月本院收治的10 8 例RA患者为研究组，选取同期于本院体检的健康志愿者36 例为对照组。分析两组、不同疾病活动度（DAS28评估）、不同Steinbrocker分级患者血清CCL20、MMP-2水平，分析其与DAS28评分、Steinbrocker分级相关性。ROC分析血清指标对疾病活动度的诊断价值。结果：与对照组比较，研究组患者血清CCL20、M M P-2 水平升高（P0.05)；与缓解期比较，活动期患者血清CCL20、M M P-2 水平、DAS28评分升高（P0.05)，且随着疾病活动度、Steinbrocker分级增加而明显升高（P0.05)；C C L 2 0、M M P-2 与DAS28评分、Steinbrocker分级、疾病严重程度呈正相关(P0.05)；轻度活动向中度活动进展，联合预测时AUC大于单项预测（P0.05)；中度活动向重度活动进展，联合预测时AUC大于单项预测(P0.05），具有可比性。研究经本院伦理委员会批准，所有患者及其家属知情且签署知情同意书。医学检验与临床2 0 2 3年第34卷第8 期1.2纳人与排除标准纳人标准：符合RA诊断标准4；具有典型症状：关节肿胀、畸形等；X线检查确诊。排除标准：合并感染性疾病者；凝血功能、心功能障碍者；长期服用糖皮质激素、免疫抑制剂者。1.3方法D A S2 8 评估RA患者疾病活动度：以双手掌指关节、近端指间关节、双腕关节、双肘关节、双肩关节、双膝关节计分，分为疾病缓解期（分值 2.6分）、疾病活动期（分值2.6 分），疾病活动期又分为轻度活动（2.6 分 分值3.2 分）、中度活动(3.2分 5.1分)。Steinbrocker评估RA病情进展0 ：包括1级、2 级、3级、4级，1级：正常或可能为骨质疏松；2 级：骨质疏松、骨质破坏、关节间隙狭窄；3级：关节面下骨质破坏、关节变形、未出现纤维性强直；4级：存在2 级、3级表现，同时伴有纤维性强直。研究组患者于入组后次日清晨采集空腹静脉血5mL，对照组于体检当日清晨采集空腹静脉血5mL，分离血清（350 0 r/min，10 m in）。检测血清CCL20、M M P-2 水平：采用ELISA法检测血清CCL20、M M P-2 水平，美国R&D公司提供CCL20检测试剂盒，上海酶联生物提供MMP-2检测试剂盒，使用仪器为瑞士Hamilton公司生产的FAME全自动酶联免疫分析仪。1.4观察指标比较分析两组患者、不同疾病活动度、不同Steinbrocker分级患者血清CCL20、M M P-2 水平，并分析其与DAS28评分、Steinbrocker分级、疾病活动度相关性。分析CCL20、M M P-2 水平对不同疾病活动度的预测价值。1.5统计学分析采用SPSS24.0软件，计量资料以（xs）表示，两组间比较采用独立样本t检验；多组间比较采用单表2 不同疾病活动度患者血清CCL20、M M P-2 水平、DAS28评分比较（xs)组别n缓解期29活动期79重度活动31中度活动26轻度活动22FP注：与缓解期比较，*P0.05；与轻度活动比较，*P0.05；与中度活动比较，“P0.05。Medical Laboratory Science and Clinics,2023,Vol.34,No.8MMP-2水平升高(P0.05)，见表1。表1两组血清CCL20、M M P-2 水平比较（xs）组别n研究组108对照组36tP2.2不同疾病活动度患者血清CCL20、M M P-2 水平、DAS28评分比较与缓解期比较，活动期患者血清CCL20、M M P-2水平、DAS28评分升高（P0.05），且随着疾病活动度增加而明显升高（P0.05），见表2。2.3不同Steinbrocker分级患者血清CCL20、MMP-2水平比较Steinbrocker分级为2 级患者血清CCL20、M M P-2水平 3级患者 4级患者（P0.05），见表3。表3不同Steinbrocker分级患者血清CCL20、M M P-2水平比较(s)组别n4级333级392级36FP注：与2 级比较，*P0.05；与3级比较，#P0.05。CCL20(ng/L)MMP-2(ng/mL)20.323.7720.18 3.7256.22 8.74*59.51 9.03*86.75 12.92*#&90.39 20.13*#&48.49 7.57*53.48 7.13*22.34 2.34*23.12 3.06*307.576217.8550.0000.00053因素方差分析（两两间比较采用LSD-t检验）；Pear-son、Sp e a r m a n 法分别分析相关性；采用受试者工作特征曲线（ROC）分析CCL20、M M P-2 水平对疾病活动度的预测价值，检验水准P0.05。2结果2.1两组血清CCL20、M M P-2 水平比较与对照组比较，研究组患者血清CCL20、CCL20(ng/L)MMP-2(ng/mL)46.58 5.5648.95 6.3118.96 4.1815.47 3.1127.31830.5690.0000.000CCL20(ng/L)MMP-2(ng/mL)75.06 15.02*#78.96 16.32*#42.18 6.06*46.41 5.49*25.24 3.4124.19 3.19255.560272.5520.0000.000DAS28 评分(分)2.11 0.134.39 0.46*5.60 0.16*#&4.19 0.13*#2.92 0.09*549.1190.000542.4研究组患者血清指标与DAS28评分、Stein-brocker分级、疾病活动度相关性分析研究组患者DAS28评分为（3.7 8 0.8 6）分。研究组血清CCL20、M M P-2 与DAS28评分、Stein-brocker分级、疾病严重程度呈正相关（P0.05），见表4。表4研究组患者血清指标与DAS28评分、Steinbrocker分级、疾病活动度相关性分析CCL20MMP-2指标PDAS28评分0.684Steinbrocker分级0.623疾病严重程度0.611注：赋值：Steinbrocker分级：2 级=1、3级=2、4级=3；疾病活动度：轻度活动=1、中度活动=2、重度活动=3。2.5ROC分析血清指标对疾病活动度的预测价值以中度活动患者2 6 例为阳性样本，以轻度活动患者2 2 例为阴性样本绘制ROC曲线，轻度活动向中度活动进展，联合预测时AUC大于单项预测(P0.05)；以重度活动患者31例为阳性样本，以中度活动患者2 6 例为阴性样本绘制ROC曲线，中度活动向重度活动进展，联合预测时AUC大于单项预测(P42.57 ng/L0.7340.7030.8740.9240.8360.9570.7540.6690.8150.8220.7800.8870.9440.8480.971医学检验与临床2 0 2 3年第34卷第8 期CCL20可促进中性粒细胞、单核细胞、获得性免疫细胞等转移至关节，炎性介质、细胞因子释放可相互促进募集，促进滑膜炎发生发展8。研究表明CCL20可增加血管内皮表面积，促进炎性细胞渗出滑膜组织，并可促进基质金属蛋白酶（MMPs）释放，促使破骨细胞前体成为成熟破骨细胞，进而形成骨侵蚀9。本研究显示RA患者血清CCL20水平升高，活动期患者血清CCL20水平高于缓解期，且随着Steinbrocker分级增加而明显升高，提示CCL20水平P升高可能参与RA发生发展过程。CCL20可促进新生0.050.7150.050.5960.050.573表5ROC分析血清指标对疾病活动度的预测价值AUC95%CI0.704.0.6580.8020.050.0536.49 ng/mL90.53 ng/L96.27 ng/mL血管生成，增加血管内皮表面积，加重滑膜组织炎性反应，并可促进细胞融合，进而参与RA发病过程10。本研究中CCL20与DAS28评分、Steinbrocker分级、疾病活性分期呈正相关，表明CCL20可能作为RA病情活动性参考指标，且与疾病活动度、关节破坏程度有关，可能通过评估RA活动性进展，进而全面评估疾病严重程度。同时本研究采用ROC分析显示，轻度活动向中度活动进展、中度活动向重度活动进展时CCL20单项诊断的AUC0.7，进一步证实CCL20的诊断价值。提示CCL20与RA病情进展有关，可监测疾病活动度，有助于综合性判断病情。MMP-2属于MMPs家族，炎性细胞、内皮细胞等多种细胞可产生或分泌MMP-2，其过度活化与细胞凋亡、巨噬细胞吞噬作用有关，其水平升高与炎性反应呈正相关。研究表明稳定期RA患者滑膜组织炎性反应缓解，软骨组织、骨基质降解程度减低。MMPs分泌量减少，MMPs分泌量与炎性细胞因子释放量密切相关，低水平的MMPs可能预示RA患者病情处于稳定状态，但肾功能、慢性炎性疾病等均可影响MMPs水平，可能造成一定偏差3。本研究结果显示，研究组患者血清MMP-2水平高于对照组，活动期患者血清MMP-2水平、DAS28评分高于缓解期，且随着疾病活动度、Steinbrocker分级增加而明cut-off值敏感度(%)61.5473.0888.4667.7477.4290.32特异度(%)69.2363.6486.3673.0876.9288.46P0.0000.0000.0000.0000.0000.000医学检验与临床2 0 2 3年第34卷第8 期显升高，提示MMP-2水平升高可能促进RA发生发展，这可能是由于CCL20等炎性细胞因子浸润滑膜组织可提升MMP-2水平，降解软骨组织、骨基质，随着RA活动度增加其水平升高，进一步破坏软骨组织，加重滑膜组织损伤。同时本研究发现轻度活动向中度活动进展时CCL20、M M P-2 联合预测AUC大于单项预测，中度活动向重度活动进展时联合预测AUC大于单项预测，表明CCL20、M M P-2 水平高低可反映RA疾病活动度，可能作为监测病情进展的潜在指标，提示联合检测CCL20、M M P-2 水平有助于判断RA病情严重程度，有助于临床制定治疗方案，具有高度应用价值。综上所述，RA患者血清CCL20、M M P-2 水平升高，且与疾病活动度、DAS28评分、影像学分级密切相关，检测血清CCL20、M M P-2 水平可提高对RA疾病活动度的预测价值，可能作为观察/评估RA病情进展的潜在指标。参考文献1杜凌燕,张明娇,刘鹏飞,等.类风湿关节炎患者血清趋化因子配体2 0 与疾病严重程度的相关性研究中华预防医学杂志,2 0 2 1,55(2):2 2 6-2 32.2王海峰.血清CCL20、A D A 水平与类风湿性关节炎患者DAS28评分的相关性及临床意义研究.医学检验与临床,2 0 2 2,33(5):6 0-6 3.3杨平,张孝山,陶月,等.基质金属蛋白酶3在类风湿关节炎疗效观察中的临床价值.临床检验杂志,2 0 2 2,40(3):209-212.4中华医学会风湿病学分会.2 0 18 中国类风湿关节炎Medical Laboratory Science and Clinics,2023,Vol.34,No.855诊疗指南.中华内科杂志,2 0 18,57(4):2 42-2 51.5崔路萍,周芸,房丽华,等.类风湿关节炎患者血清学相关指标与2 8 个关节疾病活动评分相关性分析.中国药物与临床,2 0 18,18(10):17 33-17 34.6 Takanashi S,Kaneko Y,Takeuchi T.CDAI and DAS28in the management of rheumatoid arthritis in clinicalpracticeJ.Ann Rheum Dis,2020,79(5):671-674.7杨仲岳,陈晓梅,石亚妹,等.中性粒细胞/淋巴细胞、血小板/淋巴细胞比值在类风湿关节炎中的研究进展.中华医学杂志，2 0 2 0,10 0(47):38 18-38 2 0.8杨媛媛,王利平,周敬彩,等.CCL20/CCR6在类风湿关节炎中作用的研究进展.中国免疫学杂志,2 0 2 0,36(14):1788-1790.9 杨媛媛,王利平,周敬彩,等.CCL20/CCR6 在类风湿关节炎中作用的研究进展.中国免疫学杂志,2 0 2 0,36(14):1788-1790.10杜凌燕,张明娇,刘鹏飞,等.类风湿关节炎患者血清趋化因子配体2 0 与疾病严重程度的相关性研究.中华预防医学杂志,2 0 2 1,55(2):2 2 6-2 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