1、2015国自然申请书.pdf

申请代码H2708受理部门收件日期受理编号8157151210国家自然科学基金国家自然科学基金申请书申请书（2015版）（2015版）资助类别：面上项目亚类说明：附注说明：常规面上项目项目名称：基于siRNA沉默JAKs/STATs相关基因的六味补气胶囊对COPD肺气虚证大鼠呼吸系统影响的研究申 请 人：王成阳电 话：055162923908依托单位：安徽医科大学通讯地址：安徽省合肥市绩溪路218号邮政编码：230022单位电话：0551-65161053电子邮箱：申报日期：2015年02月03日国家自然科学基金委员会NSFC 2015基本信息申请人信息姓名 王成阳性别男出生年月1973年10月民族回族学位 博士职称医师每年工作时间（月）9电话 055162923908电子邮箱传真国别或地区中国个人通讯地址安徽省合肥市绩溪路218号工作单位安徽医科大学/第一附属医院主要研究领域中医药防治呼吸系统疾病依托单位信息名称 安徽医科大学联系人 柯道平电子邮箱电话 0551-65161053网站地址合作研究单位信息单位名称安徽中医药大学项目基本信息项目名称基于siRNA沉默JAKs/STATs相关基因的六味补气胶囊对COPD肺气虚证大鼠呼吸系统影响的研究英文名称Study on the effect of Liuwei Buqi capsules on respiratory syndromein rats with lung Qi deficiency in COPD based on siRNA silencingJAKs/STATs-related genes资助类别面上项目亚类说明附注说明常规面上项目申请代码H2708基地类别研究期限2016年01月-2019年12月申请经费86.0000万元中文关键词中文关键词慢性阻塞性肺病；肺气虚证；六味补气胶囊；siRNA；JAKs/STATs相关基因英文关键词英文关键词Chronic obstructive pulmonary disease;Deficiency of lung Qi;LiuweiBuqi Capsules;siRNA;JAKs/STATs-related genesNSFC 2015第 1 页国家自然科学基金申请书2015版版本：15010000002212265中文摘要肺气虚证是慢性阻塞性肺病（COPD）始动证型，其进一步发展可累及多系统、多脏器功能障碍成为老人死亡的始动因素。本课题组经过多年研究提出COPD肺气虚证“肺失宣降、治节障碍”的基本病机，并发现其发病重要机理就是Janus激酶/信号转导转录激活因子(JAK/STAT)及其抑制因子（SOCS）信号通路表达失衡，导致细胞因子网络改变，引起细胞炎症反应和免疫应答不断发生和发展，气虚程度日深，最终出现肺脾肾等脏器全面功能障碍。因此我们提出siRNA沉默STAT-SOCS相关基因，可调控COPD肺气虚证的发展，调节STAT-SOCS通路可以改善COPD肺气虚证，并采用中药复方六味补气胶囊干预JAK/STAT-SOCS通路，阻断或抑制JAK/STAT通路活化、调节机体炎症反应，调控siRNA表达和细胞因子网络，使肺的治节功能重建，改善COPD肺气虚证，为整体提升COPD患者远期生存质量提供实验依据。英文摘要Deficiency of lung Qi is the initial syndrome in chronic obstructive pulmonarydisease(COPD),which,further development,may develop multiple system and organdysfunction,and become the initiatial cause of death in the elderly.The researchgroup proposed the hypothesis of impairment of dispersing and descendingfunction of lung and losting management and regulation according to the clinicaland experimental research on the lung Qi deficiency syndrome in COPD for manyyears and found that the important pathogenesis was that there were imbalancebetween the Janus kinase/signal transducer,activator of transcription(JAK/STAT)and its suppressor of cytokine signaling(SOCS)pathway expre ssion,leading to thechange of cytokine network,thus triggering the cellular inflammation reaction andimmune response,which made the degree of lung Qi deficiency deeper and,eventuallycausing the total dysfunction in the lung,spleen and kidney.Based on the abovemechanism,we propose the hypothesis that starting with small interferingRNA(siRNA)silencing the related genes of STAT-SOCS pathway,the occurrence anddevelopment of lung Qi deficiency syndrome of COPD can be controlled.Andfurther,regulating the STAT-SOCS pathway can improve the COPD lung Qi deficiencysyndrome.Therefore,by using the Chinese medicine compound Liuwei Buqi capsules tointervene JAK/STAT-SOCS pathway and hence to block or inhibit the activation ofJAK/STAT pathway and regulate siRNA and cytokine network expression,the bodysinflamm atory response can be regulated and controlled and then the function oflung governing management and regulation get reconstructed,finally the COPD lungQi difeciency syndrome will be improved.The assumption will provide theexperimental basis for totally improve the quality of long-term survival inpatients with COPD.NSFC 2015第 2 页国家自然科学基金申请书2015版版本：15010000002212265项目组主要参与者（注:项目组主要参与者不包括项目申请人）编号姓名出生年月性别职 称学 位单位名称电话电子邮箱每年工作时间（月）1Zheng Li1971-07-28男副教授博士美国洛杉矶希望城国家医学中心贝克曼研究所800-826-(4673)LZhengcoh.org62童佳兵1975-12-22男主治医师硕士安徽中医药大学63干磊1962-03-08男主任医师学士安徽医科大学0551-44高庆华1971-02-03男副教授硕士安徽医科大学55王传博1977-07-16男主治医师硕士安徽医科大学66陈杨1987-12-05男主治医师硕士安徽医科大学0551-67万磊1982-04-14男医师博士安徽中医药大学0551-68季乔雪1985-12-03女医师硕士安徽医科大学0551-69王心恒1992-02-07女硕士生学士安徽中医药大学9总人数高级中级初级博士后博士生硕士生10333001NSFC 2015第 3 页国家自然科学基金申请书2015版版本：15010000002212265国家自然科学基金项目资金预算表（定额补助）项目名称：基于siRNA沉默JAKs/STATs相关基因的六味补气胶囊对COPD肺气虚证大鼠呼吸系统影响的研究项目负责人：王成阳金额单位：万元序号科目名称金额备注(1)(2)(3)(1)(2)(3)1一、项目资金支出86.0000/2(一)直接费用72.000031、设备费2.50004(1)设备购置费2.00005(2)设备试制费0.00006(3)设备改造与租赁费0.500072、材料费24.500083、测试化验加工费16.000094、燃料动力费0.0000105、差旅费7.5000116、会议费2.0000127、国际合作与交流费4.7500138、出版/文献/信息传播/知识产权事务费4.2500149、劳务费9.00001510、专家咨询费1.50001611、其他支出0.000017(二)间接费用14.000018其中：绩效支出3.500019二、自筹资金0.0000NSFC 2015第 4 页国家自然科学基金申请书2015版版本：15010000002212265预算说明书项目资金支出：86.0000万元。(一)直接费用：72.0000万元。1、设备费：2.5000万元。（1）设备购置费：台式电脑5000*210000.00笔记本4000*28000.00一体打印机1000*22000.00（2）设备试制费（3）设备改造与租赁费：饲养房5月*10005000.00.2、材料费：24.5000万元。（1）耗材、药品、实验动物等（3.3150万元）大鼠300只*4012000.00；鼠料3800.00；10ml注射器、10ml、1ml枪头、1.5mlEP管590.00；庆大4盒40.00；载玻片10盒600；PBS10袋50；氯化钠40瓶150；酒精10瓶40；棉球50；灭菌手套250；10%、6%水合氯醛80；10%甲醛、4%冷多聚甲醛80；石腊、酚红、二甲苯340；Harris苏木精、0.5%盐酸酒精、双蒸水、1%氨水320；中性树胶、胶纸、胶片780；六味补气胶囊50盒500；金水宝4盒180；脾氨肽20瓶500；烟丝2000；脂多糖80支800；细胞培养板24孔3箱2400；Opti-MEMI培养基400；滤器25mm6盒2100；EP管1.5ml5包500；黄、蓝、白吸头5000。（2）药品、试剂、试剂盒（21.1850万元）胰酶、0.1%型胶原酶、酶结合物稀释液300；苏木精及碳酸锂工作液100；总蛋白提取试剂盒20000；PVDF膜100；DNAMarker100；抗兔HRP15000；抗山羊HRP7500；抗鼠HRP7500；显、定影液1000；PVDF膜200；10%胎牛血清500ml18000；SP通用型二抗和DAB试剂盒15000；JAK/STAT-SOCSmRNAPCR试剂盒25000；鼠抗JAK1、p-JAK1、JAK2、p-JAK2、兔抗STAT3、兔抗p-STAT3、STAT5、p-STAT5、SOCS1、SOCS3、CIS单抗6000；IFN-、IL-1、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17、TGF-1试剂盒30000；JAK/STAT-SOCS单抗30000；合成siRNA序列36000。3、测试化验加工费：16.0000万元。影像5000.00；肺功能500.00；病理及评分15500.00；流式芯片术测血清细胞因子10000.00；免疫组化测JAK/STAT-SOCS10000.00；RT-qPCR测组织JAK/STAT-SOCS通路mRNA10000.00；WesternBlotting测通路蛋白10000.00；原代肺泡上皮细胞培养、鉴定20000.00；含药血清对其增殖影响10000.00；siRNA链10000.00；PCR测siRNA干扰效率12000.00；Westernblot测转染后肺泡上皮细胞STAT1、STAT3、STAT5、p-STAT1、p-STAT3、p-STAT5蛋白15000.00；六味胶囊含药血清对肺泡上皮细胞的siRNA干扰STAT-SOCS通路：ELISA测细胞因子5000.00RT-qPCR测JAK/STAT-SOCSmRNA15000.00免疫荧光染色测细胞STAT1、p-STAT1、STAT3、p-STAT3、STAT5、p-STAT5、SOCS35000.00WesternBlotting测细胞JAK/STAT-SOCS通路蛋白10000.00。4、燃料动力费：0.0000万元。5、差旅费：7.5000万元。3000元/人次3人4次=36000元市内975元/月10月/年4=39000元。6、会议费：2.0000万元。学术会：会费1000元/人次3人4次=12000元专家会2000*48000.00元。7、国际合作与交流费：4.7500万元。访美学习技术1人3月。机票：北京洛杉矶5000元/人/次1人22次=20000元；美食住行用1455$/月/人3月1人6.3元RMB27500元（1$6.3RMBhttp:/ 2015第 5 页国家自然科学基金申请书2015版版本：15010000002212265报告正文 基于 siRNA 沉默 JAKs/STATs 相关基因的六味补气胶囊对 COPD 肺气虚证大鼠呼吸系统影响的研究参照以下提纲撰写，要求内容翔实、清晰，层次分明，标题突出。（一）立项依据与研究内容（一）立项依据与研究内容（4000-8000 字）：1项目的立项依据项目的立项依据（研究意义、国内外研究现状及发展动态分析，需结合科学研究发展趋势来论述科学意义；或结合国民经济和社会发展中迫切需要解决的关键科技问题来论述其应用前景。附主要参考文献目录）；1.1 研究意义1.1 研究意义慢性阻塞性肺部疾病（COPD）是呼吸系统常见疾病，患病人数多，病死率高1-2。肺气虚证是COPD最常见的证型，COPD肺气虚证的变化直接影响疾病发生和发展。COPD肺气虚证发病率随年龄增长而增加，进而累及多系统、多脏器功能障碍，已成为老年人死亡的首要原因COPD肺气虚证发病率随年龄增长而增加，进而累及多系统、多脏器功能障碍，已成为老年人死亡的首要原因3。COPD肺气虚证发病机理复杂，多种炎症因子参与的COPD气道、肺实质及肺血管的慢性炎症性病变。炎症因子可通过多种途径将其信号由胞膜转移到细胞核内参与炎症反应，其中Janus激酶/信号转导转录激活因子(JAK/STAT)信号通路是炎症因子信号转导的重要途径。JAK/STAT通路是细胞因子信号由胞膜向核内传递的主要途径，广泛参与细胞炎症反应和免疫应答4-6。JAK/STAT 通路与COPD的关系密切。JAK/STAT 通路表达紊乱可导致COPD发生，因此，阻断或者抑制JAK/STAT通路活化可有效的调节机体炎症反应，这可能会成为阻断或者抑制JAK/STAT通路活化可有效的调节机体炎症反应，这可能会成为COPD疾病新的治疗途径。COPD疾病新的治疗途径。现代医学对 COPD 的治疗目前无突破性进展。中医药在治疗 COPD 方面显示卓越优势。根据 COPD 呈现肺气虚特点，临床采用益气治法以及拟定的中药六味补气胶囊（主要由炙黄芪、人参、玉竹、益智仁、陈皮、肉桂组成）。六味补气胶囊是经安徽省食品药品监督管理局批准注册的院内制剂(皖药制字 BZ20080030)。六味补气胶囊应用多年，对 COPD 肺气虚证疗效确切。临床研究发现7-9，六味补气胶囊能明显改善 COPD 患者肺部症状体征，提高肺功能参数，改善患者干咳、咳痰、胸闷、气短等肺部症状体征。动物实验亦表明10-11，六味补气胶囊能明显改善 COPD 肺气虚证大鼠肺部影像学及病理学病变，降低免疫炎症反应，改善COPD 大鼠呼吸系统症状及肺功能。因此，采用六味补气胶囊治疗 COPD 肺气虚证并探讨其作NSFC 2015第 6 页国家自然科学基金申请书2015版版本：15010000002212265用机制，其意义具有丰富和完善中医药治疗理论，开辟一条适合中医药治疗 COPD 肺气虚证的新途径。1.2 国内外研究现状及发展动态1.2.1 JAK/STAT信号通路与COPD1.2 国内外研究现状及发展动态1.2.1 JAK/STAT信号通路与COPDJAK/STAT通路与COPD肺部及气道炎症密切相关。JAK/STAT通路激活能导致致炎性细胞因子大量积聚，促使COPD炎性反应增加，直接导致气道、肺组织损伤，出现咳嗽、气喘及肺功能降低。JAK/STAT通路激活能参与细胞增殖、分化、凋亡等多种功能12。JAK/STAT通路转导是通过细胞膜上受体与配体结合，形成二聚体复合体，复合体和JAKs发生聚集而磷酸化，活化的JAK通过催化STATs激活STAT，使其与受体分离进入核内，调控基因转录。炎性反应可加重COPD肺组织损伤，肺组织中巨噬细胞和中性粒白细胞增加，从而诱导JAK/STAT通路中JAK1磷酸化，JAK1活化后迅速激活STAT3使其磷酸化(p-STAT3)。p-STAT3反过来又促进炎性反应表达升高而加重COPD发生。致炎性细胞因子IL-6是JAK1/STAT3活化的重要调节物，在COPD肺上皮和内皮细胞中，IL-6直接活化STAT3，同时，伴随STAT的活化，LPS诱导活化了STAT激酶和JAK1。STAT4、STAT6能分别介导对IL-12、IL-4的反应过程，同时参与调节Th细胞向Thl、Th2亚群的分化过程13。转录因子STAT4的活化具有促炎作用，STAT4信号传导途径由IL-12激活，从而诱导、促使INF-的转录和表达14,15。转录因子STAT6的活化具有免疫调节、抑制免疫炎症的作用，STAT6通过JAK-STAT信号转导途径介导Th2细胞因子如IL-4及IL-13的表达。因此，JAK/STAT通路的过激活能进一步验证COPD可能的发病机制，并且对于探讨六味补气胶囊的治疗机制意义深远。1.2.2 JAK/STAT 信号通路抑制因子（suppressor of cytokine signaling，SOCS）对 COPD的作用JAK/STAT通路的过激活能进一步验证COPD可能的发病机制，并且对于探讨六味补气胶囊的治疗机制意义深远。1.2.2 JAK/STAT 信号通路抑制因子（suppressor of cytokine signaling，SOCS）对 COPD的作用SOCS 家族中主要作用是 SOCS1、SOCS3 及 CIS 蛋白。SOCS 可抑制细胞因子信号传导，是细胞因子信号传导的抑制因子。SOCS 蛋白对细胞因子信号传导进行负调节的分子机制。SOCS 可抑制 JAK/STAT 通路信号传导16-17。SOCS家族成员可调制JAKs的失活化、阻碍STATs接近受体结合位点、促使信号转导蛋白泛素化并被蛋白酶体所降解。SOCS 蛋白是多数细胞因子受体信号传导的重要调节剂，它们通过负反馈方式调节细胞因子启动的 JAK/STAT 信号传导。SOCS 与 JAK 结合而抑制其激酶活性，竞争性抑制 STAT 与活化受体的结合而抑制STAT 的激活18。CIS、SOCS1 及 SOCS3 在细胞系中的过表达可抑制众多细胞因子和生长因子如 IL-1、IL-2、IL-3、TGF 的信号转导。细胞因子通过 JAK/STAT 通路可诱导 SOCS3 基NSFC 2015第 7 页国家自然科学基金申请书2015版版本：15010000002212265因表达。其表达产物又特异性地抑制细胞因子介导的 JAK/STAT 通路19。在 COPD 的发生过程中有 JAK/STAT 通路的异常活化，而 SOCS3 在 COPD 众多细胞中经常发生甲基化而被关闭表达，SOCS3 的“沉默”可能是 JAK/STAT 通路的异常活化的重要原因20。SOCS3 可以抑制 STAT3 信号的激活，减弱免疫反应的强度，降低了 Th1 型细胞因子损伤。在 COPD 模型中 SOCS3 的转基因小鼠对 Th2 细胞的反应敏感性增加，气道炎症程度升高时肺组织病理特征均显著上升，使得 COPD 病情加重。因此，将 SOCS 作为靶标，通过特异性促进或阻断JAK/STAT 通路治疗 COPD 疾病将是研究的一个重点。将 SOCS 作为靶标，通过特异性促进或阻断JAK/STAT 通路治疗 COPD 疾病将是研究的一个重点。（JAK/STAT-SOCS 信号通路活化见图 1）。图 1JAK/STAT-SOCS 信号通路示意图1.2.3 siRNA（small interfering RNA）沉默 JAK/STAT-SOCS 基因对 COPD 的影响图 1JAK/STAT-SOCS 信号通路示意图1.2.3 siRNA（small interfering RNA）沉默 JAK/STAT-SOCS 基因对 COPD 的影响RNA干扰是由双链RNA介导的序列特异性转录后的基因沉默现象。近几年利用RNA干扰技术特异性剔除或关闭特定基因表达而防治疾病成为医学界研究的热点21。JAK/STAT 途径NSFC 2015第 8 页国家自然科学基金申请书2015版版本：15010000002212265是细胞因子信号转导的重要途径，细胞因子、趋化因子通过JAK/STAT 途径在COPD中发挥作用。COPD主要表现为可逆性气流受限和气道炎症、持续性气道高反应性和气道重构。JAK/STAT途径参与细胞因子信号转导而影响Th细胞分化，其中IL-4 和IL-12 作用最突出。IL-12诱导Th1分化需要活化STAT4、IL-4和IL-13诱导Th2分化需要活化STAT6。应用siRNA沉默技术在呼吸系统疾病中发挥重要作用22。RNA干扰技术沉默哮喘支气管上皮细胞STAT1，可优于STAT1在信号转导水平阻断炎症的进一步发展，从而减轻气道高反应性和气道重构。用siRNA沉默小鼠SOCS3基因，能改善气道反应性和嗜酸粒细胞浸润。研究发现23以siRNA沉默人类气道平滑肌细胞的STAT3 后，能明显减少STAT3 的mRNA生成，而STAT3能使气道反应性增强和气道平滑肌增生，继而引起气道重塑发生，从而使COPD加重。因此，应用siRNA干扰技术沉默COPD肺泡上皮细胞STAT基因，阻止气道变应性炎症反应，有望成为改善COPD气道炎症和高反应性的高效手段，对防治COPD的发生发展具有重要的临床意义。1.2.4.COPD 采用“补肺益气”治法的依据（1）理论依据应用siRNA干扰技术沉默COPD肺泡上皮细胞STAT基因，阻止气道变应性炎症反应，有望成为改善COPD气道炎症和高反应性的高效手段，对防治COPD的发生发展具有重要的临床意义。1.2.4.COPD 采用“补肺益气”治法的依据（1）理论依据中医学认为肺主气，肺主呼吸之气，又主一身之气。肺主宣发和肃降，包括水液和气机两个方面。肺主治节，治理和调节全身脏腑组织生理功能，体现在肺司呼吸，调节气机，助心行血及调节水液代谢，是对肺的主要生理功能的高度概括。从 COPD的发展规律来看，本病的发展经由肺气虚、脾气虚、肾气虚而逐渐加重。首先，脾与肺是母子关系，肺虚则子盗母气，导致肺脾两虚，则出现肺气虚的气短、自汗、易感与脾气虚的脘痞、纳差、便溏等症并见；脾气虚致水液运化失常，则水湿内聚生痰，壅塞于气道，使得咳、痰、喘等症状进一步加重。其次，肺与肾是母子关系，肺虚可母病及子，导致肺肾两虚，则出现肺气虚诸症与肾气虚的动则气喘、腰酸腿软、小便清长等症并见；肾气虚则水液失去温煦，上则水饮射肺凌心，外则泛溢肌肤，出现咳痰喘、肢体水肿等症。COPD缓解期常以诸虚证为主。肺气虚证不仅是 COPD 缓解期的重要证型，也是患者易于急性加重的基础。肺气虚卫外功能不足，腠理不密，开合功能失司，容易感受风寒外邪，外邪袭肺则使肺宣发肃降更为失常，进一步加重 COPD 的症状。统计显示，COPD 的证型频率中肺气虚证占重要地位。感染、免疫功能异常、肺功能进行性下降同肺气虚紧密相关。COPD 肺功能进行性下降的重要因素是呼吸道反复感染，同时由于年龄的增加，免疫功能不断下降，COPD患者常有免疫功能异常，免疫功能异常又极易导致感染，感染再度导致肺功能进行性下降，三者交互作用共同构成 COPD 肺气虚证特征。因此，“肺失宣降、治节障碍”是 COPD 肺气虚证的基本病机，从中医角度防治 COPD 的关键在于“补肺益气”。（2）临床依据（2）临床依据六味补气胶囊临床治疗 COPD 患者取得良好疗效。六味补气胶囊干预NSFC 2015第 9 页国家自然科学基金申请书2015版版本：15010000002212265肺气虚型 COPD 稳定期患者，能够减缓患者肺功能下降，提高生活质量。临床选择 COPD 稳定期肺气虚证患者，随机分为治疗组和对照组。对照组和治疗组均给予常规治疗，治疗组在常规治疗的基础上给予六味补气胶囊口服。在治疗前后采用圣乔治呼吸问卷分别对两组患者的生活质量进行测评，并检测肺功能。结果显示，治疗前后两组肺活量和 FEV1比较，以及两组治疗后肺活量和 FEV1比较，差异均无统计学意义。治疗后两组呼吸症状、活动受限和疾病影响评分显著低于治疗前，六味补气胶囊组呼吸症状、活动受限、疾病影响和生活质量的改善明显优于对照组。六味补气胶囊除改善 COPD 肺气虚证患者肺功能水平，还能明显提高 6 分钟步行距离，降低 CRP、TNF-水平和 BODE 指数，降低咳嗽、气喘、胸闷症状。说明六味补气胶囊能在一定程度上降低炎症反应，改善患者症状体征，提高患者生活质量。六味补气胶囊能明显改善 COPD 肺气虚证患者肺纹理增多、增粗或紊乱和肺气肿症状。研究证实，六味补气胶囊能明显提高 COPD 肺气虚证患者 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+表达，降低CD8+表达。说明六味补气胶囊通过改善肺气虚证患者免疫失调状态，增强 T 细胞免疫功能低下，调节免疫系统内环境稳定。（3）实验依据（3）实验依据动物实验研究，六味补气胶囊能改善 COPD 大鼠肺功能参数如第 0.3 s用力呼气容积(FEV0.3)、吸气阻力(Ri)、呼气阻力(Re)及肺顺应性(Cldyn)。进一步对 COPD肺气虚证大鼠肺组织影像学观察发现，六味补气胶囊能改善肺气虚证大鼠胸片横膈在前肋、后肋的位置。说明六味补气胶囊通过改善肺气虚证大鼠肺功能水平，进一步改善肺气肿影像学表现。通过 ELISA 法测定 COPD 肺气虚证大鼠支气管灌洗液 TNF-、白三烯（LTB4）表达发现。六味补气胶囊能明显降低 COPD 肺气虚证支气管灌洗液中细胞总数及细胞分类计数，降低支气管灌洗液 TNF-、LTB4 表达。对血清 VEGF、TNF-、ICAM-1、IL-8 检测发现，六味补气胶囊同样能降低其表达水平。说明肺气虚证气道炎症的降低，IL-8、ICAM-1 等因子表达减少，使得各种生物或理化刺激导致气道促炎因子的释放减弱，从而降低中性粒细胞为主的炎细胞定向聚集于气道。这与中医理论“肺朝百脉，主治节”相符。同时，六味补气胶囊能改善 COPD 肺气虚证大鼠细胞凋亡，调节 Fas、FasL 蛋白表达，而 Fas、FasL 蛋白表达与 COPD 肺气虚证有关。这也间接证实通过补肺气的方法是改善 COPD 机制之一。据此，本研究提出如下假设：本课题组根据多年研究发现 COPD 肺气虚证“肺失宣降、治节障碍”的基本病机，提出siRNA 沉默 STAT 相关基因，调控 COPD 肺气虚证的发展，调节 STAT-SOCS 通路而改善 COPD肺气虚证，并采用中药复方六味补气胶囊干预 JAK/STAT-SOCS 通路，阻断或抑制 JAK/STAT通路活化、调节机体炎症反应，调控 siRNA 表达和细胞因子网络，使肺的治节功能重建，本课题组根据多年研究发现 COPD 肺气虚证“肺失宣降、治节障碍”的基本病机，提出siRNA 沉默 STAT 相关基因，调控 COPD 肺气虚证的发展，调节 STAT-SOCS 通路而改善 COPD肺气虚证，并采用中药复方六味补气胶囊干预 JAK/STAT-SOCS 通路，阻断或抑制 JAK/STAT通路活化、调节机体炎症反应，调控 siRNA 表达和细胞因子网络，使肺的治节功能重建，NSFC 2015第 10 页国家自然科学基金申请书2015版版本：15010000002212265从而最终改善 COPD 肺气虚证呼吸系统功能。参考文献从而最终改善 COPD 肺气虚证呼吸系统功能。参考文献1AlYami,Marja A(#),AlAhmari Mohammed D,Alotaibi Hajed,AlRabeeah,Saad,AlBalawi Ibrahim,Mubasher Mohamed,Evaluation of efficacy of non-invasive ventilation in Non-COPD andnon-trauma patients with acute hypoxemic respiratory failure:A systematic review and meta-analysis,Ann Thorac Med,2015,10(1):16-24.2Abroug,Fekri(#),Ouanes Islem,Abroug Sarra,Dachraoui Fahmi,Abdallah Saoussen Ben,Hammouda Zeineb,Ouanes-Besbes Lamia,Systemic corticosteroids in acute exacerbation of COPD:a meta-analysis of controlled studies with emphasis on ICU patients.,Ann Intensive Care,2014,4:32-32.3Lainscak Mitja(#)(*),Gosker,Harry R,Schols Annemie M W J,Chronic obstructive pulmonarydisease patient journey:hospitalizations as window of 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