不同阶段神经梅毒与血清固定...和Th17相关细胞因子分析_王娟娟.pdf

作者单位 1.苏州高新区人民医院皮肤性病科，江苏 苏州 215129;2.苏州大学附属第二医院皮肤科，江苏 苏州 215004 通信作者季江，E-mail:jijiang 网络首发时间 2022-12-0214 18 网络首发地址https:/ 年 3 月第 37 卷第 3 期Mar.2023，Vol37，No3http:/不同阶段神经梅毒与血清固定患者外周血Th1、Th2 和 Th17 相关细胞因子分析王娟娟1，尹兴平1，季江2 摘要 目的检测不同临床阶段神经梅毒与梅毒血清固定患者外周血 Th1、Th2 及 Th17相关细胞因子表达水平，以了解患者细胞免疫相关因子状况。方法收集苏州大学附属第二医院及苏州高新区人民医院 2017 年 9 月 2021 年 10 月期间确诊为神经梅毒的患者 79 例(包括无症状型 6 例，早期 23 例，晚期 50 例)，血清固定患者 65 例，对照组(健康体检者)30 例。采用酶联免疫吸附法检测各组外周血中Th1 细胞因子(IL-2、IFN-)、Th2 细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10)及 Th17 细胞因子(TNF、IL-17A)的表达水平，统计分析检测结果。结果IL-2、IFN-、IL-4、IL-17A在神经梅毒、血清固定患者和对照组间的水平差异有统计学意义(P 0.05)。神经梅毒和血清固定患者外周血 IL-2、IFN-、IL-4 高于对照组且 IL-17A 低于对照组，差异均有统计学意义(P 0.05)。神经梅毒与血清固定患者外周血 Th1、Th2、Th17 相关细胞因子差异无统计学意义(P 0.05)。IL-2、IFN-、IL-4、IL-17A 在不同临床阶段神经梅毒患者和对照组间的含量变化差异有统计学意义(P 0.05)。IL-17A 在早期神经梅毒与对照组之间差异无统计学意义(P 0.05)，晚期神经梅毒患者 IL-17A 低于对照组，差异有统计学意义(P 0.05)。结论神经梅毒和血清固定患者的 Th1、Th2 及 Th17 类细胞因子存在异常，且神经梅毒不同阶段之间也存在差异，可能与神经梅毒和血清固定的发病机制有关。关键词 神经梅毒;血清固定;Th1;Th2;Th17;细胞因子 中图分类号 759.1 文献标志码 A 文章编号 1001 7089(2023)03 0330 06 DOI 10 13735/j cjdv1001-7089 202208094Analysis of Th1，Th2 and Th17 elated Cytokines in Peripheral Blood of Patients withDifferent Stages of Neurosyphilis and Serofast SyphilisWANG Juanjuan1，YIN Xingping1，JI Jiang2(1.Department of Dermatology，the Peoples Hospital of Suzhou New District，Suzhou 215129，China;2.Department of Dermatology，the Second Affiliated Hospital of Soochow University，Suzhou 215004，China)Corresponding author JI Jiang，E-mail:jijiang Abstract ObjectiveTo detect the expression level of Th1，Th2 and Th17 related cytokines inperipheral blood of patients with different stages of neurosyphilis and serofast syphilis，so as to understand the status of immune-related factors in cells of patients MethodsA total of 79 patients diagnosed with neurosyphilis(including 6 asymptomaticpatients，23 early syphilis and 50 late syphilis)and 65 patients with serofast syphilisfrom September 2017 to October 2021 in our hospital were included in the study，and王娟娟，尹兴平，季江 不同阶段神经梅毒与血清固定患者外周血 Th1、Th2 和 Th17 相关细胞因子分析http:/30 healthy physical examinees as the control group.The levels of Th1 cytokines(IL-2，IFN-)，Th2 cytokines(IL-4，IL-6，IL-10)and Th17 cytokines(TNF，IL-17A)in peripheral blood were detected by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)esultsThere were significant differences in the levels of IL-2，IFN-，IL-4 andIL-17A in patients with neurosyphilis，those with serofast syphilis and control group(P 0.05).The levels of IL-2，IFN-and IL-4 in patients with neurosyphilis andpatients with serofast syphilis were higher than those in the control group，whereasIL-17A levels were lower than those in the control group(P 0.05).There was nosignificant difference in the levels of Th1，Th2 and Th17 related cytokines betweenneurosyphilis patients and serofast syphilis patients(P 0.05).The levels of IL-2，IFN-，IL-4，and IL-17A in patients with neurosyphilis at different clinical stages werealso statistically different from those in the control group(P 0.05)，but no significantdifference in IL-17A was found between early neurosyphilis patients and the controlgroup(P 0.05).The level of IL-17A in patients with advanced neurosyphilis wasmarkedly lower than that of the control group(P 0.05)ConclusionTh1，Th2 andTh17 related cytokines are abnormal in patients with neurosyphilis and those withserofast syphilis，andtherearealsodifferencesbetweendifferentstagesofneurosyphilis，which may be related to the pathogenesis of neurosyphilis and serofastsyphilis.Key words Neurosyphilis;Serofast;Th1;Th2;Th17;Cytokines梅毒是一种由梅毒螺旋体(Treponema pallidum，TP)感染引起的世界范围内流行的性传播疾病，对公共卫生构成严峻的挑战。部分梅毒患者经规范治疗症状得以改善，但血清学指标长期持续阳性，发展成为血清固定，部分患者因梅毒螺旋体侵犯中枢神经系统如脑膜、脑实质、血管或脊髓等发展为神经梅毒。血清固定和神经梅毒可发生于梅毒不同发展阶段，对患者的身心健康产生严重危害，具体致病机制不明，治疗手段有限，给临床医生对于该病的诊疗造成很大的困惑，故揭示血清固定和神经梅毒的发生机制对梅毒有效防治至关重要。梅毒螺旋体感染机体后宿主的免疫反应对梅毒的发生、发展具有重要意义。多认为机体清除梅毒螺旋体的机制主要与宿主的细胞免疫功能有关1，目前国内外有关神经梅毒和血清固定患者细胞免疫失衡的研究有限，不同阶段神经梅毒的细胞免疫可能存在差异但相关研究甚少。本研究通过检测血清固定、神经梅毒患者以及健康对照组外周血中的Th1、Th2 和 Th17 类细胞因子的水平变化，进一步分析不同阶段神经梅毒患者外周血上述细胞因子水平，研究神经梅毒患者不同阶段的细胞免疫状况、炎症相关因子和免疫抑制情况，探讨其在神经梅毒和血清固定中的作用。1资料与方法1.1一般资料收集苏州大学附属第二医院及苏州高新区人民医院2017 年9 月 2021 年10 月期间收治的神经梅毒患者 79 例，根据 TP 侵犯部位和症状将神经梅毒分为早期(主要损害脑脊膜及血管)和晚期(主要损害脑和脊髓实质)2。79 例患者中，男 62 例，女 17 例，平均年龄 57.0(19 78)岁。根据分类标准分为三组:无症状神经梅毒组 6 例，早期神经梅毒组 23 例，晚期神经梅毒组 50 例。同时收集血清固定患者 65 例，其中男 19 例，女 46 例，平均年龄 42.4(18 74)岁，对照组为 30 例健康体检者，其中男、女各 15 例，平均年龄 46.4(23 69)岁。本研究获医院伦理委员会批准，患者均签署知情同意书。1.2诊断标准神经梅毒患者纳入标准3:有神经梅毒的临床表现且脑脊液 P 和 TPPA 阳性;脑脊液 P 阴性但 TPPA 阳性并满足无其他原因检测发现脑脊液蛋白升高(0.5 g/L)、脑脊液白细胞升高(5 106/L)伴神经梅毒典型临床表现。入组患者外周血 TPPA、P 阳性，且排除了HIV 感染和其他病原体感染。排除神经梅毒标准:血清 P 和 TPPA 阴性;血清 P 或 TPPA 阳性，但脑脊液 P、脑脊133http:/液 TPPA、脑脊液白细胞数和蛋白定量正常，无神经梅毒体征或症状。血清固定诊断标准:梅毒患者经过正规驱梅治疗后临床症状消失，在排除了生物学假阳性、再感染及神经梅毒等其他系统的感染后，其非梅毒螺旋体血清学试验在规定的随访时间结束后(早期梅毒2 年，晚期梅毒 3 年)持续不转阴4。1.3Th1、Th2 及 Th17 类细胞因子检查采集外周血 2 mL，以 3 000 r/min 离心 5 min 后取血清，按照试剂盒说明书，采用酶联免疫吸附试验(试剂盒均购于联科公司)测定，在 450 nm 波长下读取吸光度(A)值。绘制标准曲线，根据标准曲线计算各组外周血中 Th1 细胞因子(IL-2、IFN-)、Th2 细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10)及 Th17 细胞因子(TNF、IL-17A)的含量。1.4统计学处理应用 SPSS22.0 统计软件进行分析。检测结果采用 x s 形式表示，多组数据均数比较采用方差分析，若差异显著，进一步行LSD 检验，取95%可信区间。P 0.05 为差异有统计学意