不良孕产史夫妇外周血细胞遗传学和临床特征分析_王明蕊.pdf

第 41 卷第 1 期2023 年 2 月广东医科大学学报JOURNAL OF GUANGDONG MEDICAL UNIVERSITYVol.41 No.1Feb.202364不良孕产史夫妇外周血细胞遗传学和临床特征分析王明蕊，叶蔚，张娜，李玉婷（广东医科大学附属医院妇产科，广东湛江 524000）摘要：目的探讨湛江地区遗传咨询者外周血淋巴细胞染色体核型异常、多态发生率及类型，帮助临床诊疗、指导优生优育和提高湛江地区出生人口素质。方法选取该院行遗传咨询的 223 对夫妇，其中将不良孕产的 104 对夫妇设为不良孕产组，正常孕产的 119 对夫妇设为正常孕产，对两组外周血淋巴细胞进行培养、制片及G 显带染色体核型的分析。结果不良孕产组染色体核型异常检出率明显高于正常孕产组(11.5%vs 1.3%，P0.01)；不良孕产组的染色体核型中主要表现为染色体呈多态性占 33.3%，臂间倒位占 33.3%，平衡易位占 29.2%，常染色体数目异常占 4.2%。结论夫妻双方染色体核型异常和染色体多态性是生育异常的重要因素之一，需对生育异常的夫妇进行染色体检查，以提高人口质量。关键词：出生缺陷；外周血染色体核型分析；不良孕产中图分类号：R 329.2+3 文献标志码：A 文章编号：2096-3610（2023）01-0064-04Analysis on cytogenetic and clinical characteristics of peripheral blood lymphocytes of the couples with a history of abnormal child-bearingWANG Ming-rui,YE Wei,ZHANG Na,LI Yu-ting(Department of Obstetrics and Gynecology,the Affiliated Hospital of Guangdong Medical University,Zhanjiang524000,China)Abstract:ObjectiveTo explore the abnormal karyotypes,polymorphisms and types of peripheral blood lymphocytes of genetics consulting persons in Zhanjiang to facilitate clinical diagnosis and treatment,guide prenatal and postnatal care and improve the quality of birth population in Zhanjiang.MethodsA total of 223 couples who consulted genetics in this hospital were selected,of which 104 couples with abnormal child-bearing were set as the Abnormal Child-Bearing Group while 119 couples with normal child-bearing were set as the Normal Child-Bearing Group.The peripheral blood lymphocytes of the two groups were cultured,sliced and subject to G-banded karyotype analysis.ResultsThe detection rate of abnormal karyotype in the Abnormal Child-Bearing Group was significantly higher than that in the Normal Child-Bearing Group(11.5%vs 1.3%,P0.05）。所有研究方法均经广东医科大学附属医院伦理委员会批准。所有受试者均给予书面正式同意。1.2方法 本文采用G 显带方法，采集受试者外周血细胞，送本院细胞遗传室检验。通过胰酶消化和吉姆萨染色方法，使染色体呈现深浅不同的带型，通过条带识别、核型分析，判断染色体是否存在异常及异常的方式。染色体异常命名原则依据人类细胞基因组学国际命名体系的有关规定命名7。1.3统计学处理应用 SPSS23.0 统计学软件进行统计分析，计数资料以率表示，组间比较采用 2 检验，P0.05 为差异有统计学意义。2结果2.1外周血染色核型异常检出情况在104对不良孕产夫妇中，异常核型24例（11.5%），其中 8 例（33.3%）染色体核型呈多态性，8 例（33.3%）染色体臂间倒位，平衡性易位 7 例（29.2%），1 例（4.2%）常染色体数目异常。在 119 对正常孕产夫妇中，检测出核型异常 3 例（1.3%），其中多态型 2 例（66.7%），臂间倒位 1 例（33.3%）。不良孕产组与正常孕产组的异常核型率比较差异有统计学意义（P0.01）。表明双亲染色体异常，生育结局不良的可能性较大。2.2外周血染色体核型情况正常孕产组 3 例染色体异常核型中多态型为 46，XY，1qh+、46，XX，1qh+，臂间倒位核型为 46，XX，inv（9）（p12q13），3 例临床表现均为正常孕产。不良孕产组异常核型与临床表现详见表 1。3讨论染色体畸变，如结构和数量异常，增加或减少遗传物质，导致妊娠停止、早期流产、死产、新生儿出生缺陷等。在本研究中，不良孕产组 104 对夫妇中，检出染色体核型异常 24 例；正常孕产组 119 对夫妇中，染色体核型异常 3 例，两组差异有统计学意义（P0.01），表明双亲染色体异常者其生育结局不良的可能性较大，因此核型分析对高危妊娠具有重要意义。有研究报道，孕妇染色体异常发生率为 0.47%0.84%8，频繁流产或死产的孕妇发生率为0.8%12.5%，这是导致流产的重要因素。染色体多态性是指在正常人群中经常发生的各种染色体形式的小变异，其特征主要是异染色质的变异，主要分布在Y 染色体的着丝粒、端粒、卫星、次级收缩和长臂上，该变异的异染色质具有非编码的高度重复的序列，并且无结构基因，大部分的多态性无转录活性。多态性变异的发生率约为2.6%，无明确的临床意义，如本文结果所示，8 例患者表 1不良孕产组 24 例染色体异常核型结果异常分类异常核型n 临床表现多态型46，XY，1qh+2胎儿染色体异常46，XX，1qh+1胎儿染色体异常46，XX，16qh+2自然流产46，XY，1qh+2复发性流产46，XX，9qh+1复发性流产臂间倒位46，XX，inv（9）（p12q13）4复发性流产 1-3 次46，XX，inv（5），（q31q35）1稽留流产46，X，inv（Y）（p11，2q11，2）1复发性流产46，XY，inv（9）（p12q13）1胎儿染色体异常46，X，inv（Y）（p11q11）1复发性流产平衡易位46，XX，9qh（+）t（10；19）（q2413.3）1复发性流产46，XX，t（6；15）（p21.3；q24）1稽留流产46，XX，t（1；4）（q43；q21）1复发性流产46，XX，t（6；21）（p12；q22）1复发性流产46，XX，t（1；10）（q21；q26）1复发性流产46，XX，t（2；9）（q12；q13）2稽留流产数目异常47，XY，+mar1复发性流产广东医科大学学报662023年 第41卷发生多态变异，导致流产。常见的多态变异有（9）、（9）（Y）和PSs。平衡易位和臂间倒位是临床上常见的染色体结构异常。在本研究中，7对夫妇核型检出平衡异位，平衡易位是指两条或两条以上的染色体相互易位，不产生遗传物质的损失，也不造成明显的遗传效应。虽然平衡易位载体具有正常的表型，没有染色体物质的丢失，但平衡易位本身是非常有害的9。根据配子体发生过程中同源染色体片段配对的特征，生殖细胞在减数分裂过程中，平衡易位形成 18 种配子，且形成以下 3 种情况如正常核型、染色体易位载体与部分单倍型或部分三体，最后一个因素是导致流产、死胎儿、死产、胎儿畸形、新生儿死亡和其他生殖疾病的重要因素10。本研究中所检测夫妇为平衡易位携带者，虽然表型正常但其可产生异常的精子和卵子，两者结合后可能产生染色体异常的胚胎，从而引起早期流产。因此，对不明原因的自然流产夫妇染色体的研究，其意义不仅是病因学诊断，更重要的是检出携带者（包括家族中的携带者），指导他们的婚姻和生育，进行产前诊断，避免染色体异常胎儿的出生。本文出现 7 例患者染色体平衡异位，虽不能证明染色体异态性与习惯性流产有直接的因果关系，但至少提示染色体平衡异位与胎儿发育异常之间有某种关联，应引起高度重视。在臂间倒位人群中，inv（9）的发生率约为 1.8%。有研究认为，inv（9）倒位导致的宫内死亡的概率高于正常胎儿，因为inv（9）在减数分裂中形成倒置环，产生不平衡配子，导致早产、死产、不孕等；亦有研究者认为倒置不涉及遗传物质的丢失，可以看作是染色体性结构多态性11-12。虽然inv（9）携带者有流产史，但该结论需要大样本调查进一步证实，以证明inv（9）与自然流产和胚胎流产有直接关系。因此，在整个妊娠期间应密切观察inv（9）的携带者，规范分娩检查，加强产后随访。有研究表明，由于Y 倒置会导致精子发生相关基因区域受损，inv（Y）可能影响精子发生、精子质量和功能13。在本研究中，2 例inv（Y）携带者同时有自然流产或胚胎流产史，推测inv（Y）与流产、胚胎流产有关。但由于样本量小，还需要进一步的研究。Wang 等14认为，如果inv（Y）携带者在妊娠期间没有流产或死产，胎儿预后往往良好。在本研究中，8 例染色体倒置均聚集在 5、9 和Y 号染色体上，染色体倒置分为臂内倒置和臂间倒置。在同一染色体上的两次断裂后，它被 180 度反转的片段重新连接。其中，inv（9）最常见，臂间倒置人群的发生率为 1.8%。在减数分裂过程中，臂间倒置染色体会形成一个独特的倒置环和 4 个不同的配子如正常染色体、倒置染色体、不平衡染色体与缺失染色体。倒置的遗传效应取决于重复片段和缺失片段的长度以及基因的致死效应15。在这项研究中，7 对染色体倒置的夫妇存在不同次数的复发性流产史，且有一对夫妻 父亲方，46，XY，inv（9）（p12q13）胎儿存在染色体异常。mar 是一种来源未知的多余染色体，也称为标记染色体，由结构重排的染色体片段组成。其临床表现多样，无表型，发生率低于 1%。目前，还无法判断mar 是否会影响生育能力。因此，我们应该为这类患者提供更好的遗传咨询。随着人类社会的工业化和生活方式的改变，大量的环境因素可能会影响孕妇，增加胎儿染色体非整倍体的风险16-17。环境中不利的物理、化学和生物因素可能导致细胞染色体畸变18。人们在生产、劳动和生活过程中接触到有害物质，包括家庭装饰、新车、家具、修指甲产生的有毒物质，直接损害生殖细胞，导致染色体异常19-20。目前，当胎儿染色体核型在产前诊断中出现异常时，建议胎儿的父母应进行外周血染色体核型分析。如果亲本是同一携带者，且表型正常，则可以认为胎儿是与亲本具有相同表型的携带者，但一旦产前检查发现染色体核型异常，应考虑隐性重排。对于新的突变，应该考虑怀孕和分娩的风险以及表型异常的风险，如果有必要，建议在决定是否终止妊娠之前做基因芯片检查。临床医生在遗传咨询中应更多地关注染色体多态性，对复发性流产、死产、不孕症等患者应进行染色体检查。同时，对符合产前诊断指征孕妇的羊膜细胞核型进行必要分析，对减少出生缺陷、提高人口质量具有重要意义。参考文献：1 卫生部发布 中国出生缺陷防治报告(2012)J.中国药房,2012,23(39):3693.2 严恺,金帆.出生缺陷相关遗传病产