茶尺蠖和灰茶尺蠖幼虫两种共有寄生蜂的鉴定_周孝贵.pdf

39(1)1-9 中国生物防治学报 Chinese Journal of Biological Control 2023 年 2 月 收稿日期：2021-12-24 基金项目：国家重点研发计划（2019YFD1002100）；中国农业科学院茶叶研究所基本科研业务费（1610212019002）；农业基础性长期性科研工作（ZX09NK22）；中央高校基本科研业务费（2021FZZX001-31）作者简介：*共同第一作者，周孝贵，硕士，助理研究员，E-mail：；唐璞，博士，副教授，E-mail：。*通信作者，肖强，研究员，E-mail：；陈学新，博士，教授，E-mail：。DOI:10.16409/ki.2095-039x.2022.01.003 茶尺蠖和灰茶尺蠖幼虫两种共有寄生蜂的鉴定 周孝贵1*，唐 璞2*，吴 琼2，郭华伟1，肖 强1*，陈学新2*（1.中国农业科学院茶叶研究所/农业农村部茶叶质量安全控制重点实验室，杭州 310008；2.浙江大学昆虫科学研究所，杭州 310058）摘要：茶尺蠖 Ectropis obliqua(Prout)及其近缘种灰茶尺蠖 E.grisescens Warren 是我国茶树上最为重要的两种食叶性害虫，茶尺蠖绒茧蜂 Apanteles sp.和单白绵绒茧蜂 Apanteles sp.是茶尺蠖 Ectropis spp.幼虫期最重要的两种寄生性天敌昆虫。为了明确这两种绒茧蜂的物种名称及形态差别，同时探明这两种绒茧蜂是否是茶尺蠖和灰茶尺蠖的共有寄生蜂，本研究采集了我国 8 省 22 个地方的茶尺蠖或灰茶尺蠖幼虫，通过室内饲养获得两种绒茧蜂的标本，对标本进行形态鉴定；同时将两种绒茧蜂的 COI 基因序列与 Bold 数据库中已知物种进行比对。结果表明，从野生茶尺蠖和灰茶尺蠖幼虫中均饲养出之前报道的茶尺蠖绒茧蜂Apanteles sp.和单白绵绒茧蜂 Apanteles sp.两种寄生蜂；形态鉴定和分子比对结果表明，这两种广义绒茧蜂Apanteles spp.实为尺蠖原绒茧蜂 Protapanteles immunis(Haliday,1834)和单白绵副绒茧蜂 Parapanteles hyposidrae(Wilkinson,1928)。本研究明确了40多年前国内报道的茶尺蠖幼虫期的两种绒茧蜂 Apanteles spp.的物种名称和主要形态特征，确定了这两种绒茧蜂是茶尺蠖和灰茶尺蠖的共有寄生蜂，同时报道了一个中国新记录种尺蠖原绒茧蜂。研究结果为今后正确判定本地优势寄生蜂物种进而对茶尺蠖和灰茶尺蠖进行生物防治提供科学依据。关 键 词：尺蠖原绒茧蜂；单白绵副绒茧蜂；形态鉴定；DNA 条形码；中国新记录种 中图分类号：S476.3 文献标识码：A 文章编号：1005-9261(2023)01-0001-09 Identification of Two Common Larval Parasitic Wasps of Ectropis obliqua and Ectropis grisescens(Lepidoptera:Geometridae)ZHOU Xiaogui1*,TANG Pu2*,WU Qiong2,GUO Huawei1,XIAO Qiang1*,CHEN Xuexin2*(1.Key Laboratory of Tea Quality and Safety Control,Ministry of Agriculture/Tea Research Institute of Chinese Academy of Agricultural Sciences,Hangzhou 310008,China;2.Institute of Insect Sciences,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China)Abstract:Ectropis obliqua(Prout)and Ectropis grisescens Warren(Lepidopotera:Geometridae)are two of the most destructive chewing pests in Chinas tea plantations.Two of the parasitic wasps,which previously reported as Apanteles spp.(Hymenoptera:Braconidae:Microgastrinae),can play important role in controlling Ectropis spp.during the larval stage in nature.In order to determine the species names and morphological differences of the two wasps,and to confirm whether these two species are common parasitic wasps of E.obliqua and E.grisescens,we identified the wasp specimens emerged from E.obliqua and E.grisescens that were collected from 22 locations in 8 provinces of China and reared in the laboratory,and compared the COI sequences of the voucher specimens with those of known species recorded in the BOLD database.The findings revealed that both parasitic wasps emerged from E.obliqua as well as E.grisescens during the larval stage.Based on morphological and molecular data,these two species of Apanteles spp.were identified as Protapanteles immunis(Haliday,1834)and 2 中 国 生 物 防 治 学 报 第 39 卷 Parapanteles hyposidrae(Wilkinson,1928).In conclusion,this study has confirmed the specific species names and morphological characteristics of the two wasps reported as Apanteles sp.in China more than 40 years ago,which are common larval parasitic wasps of E.obliqua and E.grisescens,and the P.immunis is recorded for the first time in China.These results provide a scientific basis for accurately identifying indigenous dominant parasitic wasps,which might help manage E.obliqua and E.grisescens.Key words:Protapanteles immunis;Parapanteles hyposidrae;morphological identification;DNA barcoding;new record species for China 寄生蜂是一类重要的天敌昆虫，在害虫的生物防治中有着极其重要的作用。茶尺蠖 Ectropis obliqua(Prout)及其近缘种灰茶尺蠖 Ectropis grisescens Warren 是我国茶树上最为重要的鳞翅目害虫，严重发生时可将茶树叶片全部食尽，给茶叶生产造成巨大的经济损失1-5。20 世纪 70 年代以来，天敌资源的发掘和利用越来越受重视，研究人员在浙江杭州、临安和安徽十字镇等茶尺蠖的主要分布区域发现了寄生于其幼虫的两种寄生性天敌绒茧蜂，分别被称作茶尺蠖绒茧蜂 Apanteles sp.和单白绵绒茧蜂 Apanteles sp.6-9。这两种绒茧蜂是茶尺蠖幼虫期最为重要的天敌寄生蜂，条件适宜时对茶尺蠖幼虫的最高自然寄生率可达 90%以上6-8，在茶尺蠖的种群控制方面发挥着极其重要的作用。40 多年来，我国研究人员对茶尺蠖绒茧蜂和单白绵绒茧蜂的生物学特性、种群生态和化学生态等方面进行了一系列研究2,7,9-20，描述了两种寄生蜂的形态特征2,3,7,8,21，但至今一直未完全明确这两种寄生蜂的种名。国内曾报道尺蠖长颊茧蜂（曾用名：叉带尺蛾绒茧蜂、尺蠖绒茧蜂、叉带尺蛾长颊茧蜂、后黄卷蛾长颊茧蜂）Dolichogenidea hyposidrae(Wilkinson)（原学名：Apanteles hyposidrae Wilkinson）寄生于茶尺蠖 Ectropic obliqua hypulina Wehrli22-25，其形态跟单白绵绒茧蜂相同，也有学者将其记作尺蠖绒茧蜂或茶尺蠖绒茧蜂 Apanteles hyposidrae Wilkinson26-28。但该种绒茧蜂究竟为单白绵绒茧蜂，还是茶尺蠖绒茧蜂还需进一步确认。另外，由于茶尺蠖和灰茶尺蛾的外部形态特征极为相似，对两者的鉴定经常混淆不清，一直以来将它们统称为茶尺蠖或茶尺蛾5。近年来才研究明确，在我国，茶尺蠖主要分布于浙、苏、皖茶区，灰茶尺蠖分布于全国各产茶省，两者在浙、苏、皖交界区域混合发生，呈带状分布29-31。因此，早些年各地区报道的茶尺蠖绒茧蜂和单白绵绒茧蜂是否是茶尺蠖和灰茶尺蠖共有的寄生蜂还需要进一步明确27,28,32,33。本文通过采集茶尺蠖和灰茶尺蠖野生种群饲养获得了两种绒茧蜂的样本，结合 20 世纪以来保存于中国农业科学院茶叶研究所昆虫标本馆和浙江大学寄生蜂标本馆中的标本，采用形态鉴定和 DNA 条形码技术，对两种绒茧蜂进行鉴定，以期明确茶尺蠖幼虫期两种广义绒茧蜂属 Apanteles spp.寄生蜂的种类，以及探明这两种绒茧蜂是否是茶尺蠖和灰茶尺蠖幼虫的共有寄生蜂，为获得本地优势寄生蜂用于茶尺蠖和灰茶尺蠖的生物防治提供科学依据。1 材料与方法 1.1 样品来源 20162021 年，在浙江、湖北、江苏、安徽等 8 省 22 个地方（表 1）采集茶尺蠖或灰茶尺蠖幼虫带回室内饲养，收集寄生尺蠖幼虫的绒茧蜂的茧，待其羽化后制成干标本或单头保存于无水乙醇中备用。另外，检视了中国农业科学院茶叶研究所茶树昆虫标本馆和浙江大学寄生蜂标本馆中的采自全国的两种绒茧蜂成虫标本。在每个地方获得的同种寄生蜂标本中，分别选取 1 头以上的成虫标本作为凭证标本用于形态鉴定和分子检测，样品信息见表 1。1.2 形态鉴定和分子序列分析 在 Olympus 解剖镜（SZ-61）下观察标本的形态，选取各地收集到的寄生蜂标本，在浙江大学寄生蜂分类实验室进行物种鉴定；在 KEYENCE VHX-6000 显微系统下拍照，并对成虫主要外部形态特征进行描述。参考 Taekul 等34的方法使用天根 DNA 提取试剂盒（DP304）对凭证标本进行无损法提取总 DNA，提取 DNA 后的标本继续保存。采用通用引物（LCO1490：5GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG3，第 1 期 周孝贵等：茶尺蠖和灰茶尺蠖幼虫两种共有寄生蜂的鉴定 3 表 1 寄生蜂标本采集信息 Table 1 Collec