岑软3号油茶嫁接愈合的生理变化研究_蔡娅.pdf

2022 年 12 月 热 带 农 业 科 学热 带 农 业 科 学 第 42 卷第 12 期 Dec.2022 CHINESE JOURNAL OF TROPICAL AGRICULTURE Vol.42,No.12 收稿日期 2022-05-27；修回日期 2022-07-08 基金项目 广西特色经济林培育与利用重点实验室自主课题（No.JA-20-03-01），广西创新驱动课题（No.桂科 AA20302021-1）。第一作者 蔡娅(1993)，女，助理研究员，研究方向为油茶育种、栽培及及植物生理生态学，E-mail：。通讯作者 夏莹莹(1982)，女，高级工程师，研究方向为油茶育种、栽培及植物生理生态学，E-mail：。岑软 3 号油茶嫁接愈合的生理变化研究 蔡娅1,2,3 叶航1,2,3 王东雪1,2,3 吴方圆1,2,3 魏育1,2,3 夏莹莹1,2,3（1.广西特色经济林培育与利用重点实验室 广西南宁 530002；2.广西壮族自治区林业科学研究院 广西南宁 530002；3.广西油茶良种与栽培工程技术研究中心 广西南宁 530002）摘 要 以岑软 3 号油茶嫁接苗砧穗结合部位为材料，进行嫁接愈合相关生理指标分析，为油茶嫁接亲和性研究和砧木利用提供理论基础。结果表明：本砧嫁接 PAL 活性、PPO 活性在整个愈合过程分别呈上升和下降的单一变化趋势，陆川油茶砧木整个时期 PAL 活性无显著性差异；本砧嫁接 POD 活性始终低于陆川油茶砧木，且 2 种砧木之间始终存在显著或极显著差异。本砧嫁接可溶性糖含量变化在 12.3528.31 mg/L，变化幅度较大，整体呈下降趋势；陆川油茶砧木可溶性糖含量有先上升的过程。2 种砧木 MDA 含量整个愈合阶段无显著性差异。本砧嫁接 IAA、ABA、ZR 含量整个愈合时期差异不显著，2 种砧木 ABA 含量在第 35、45 天时存在显著性差异。关键词 岑软 3 号；砧木；砧穗结合部位；生理指标；内源激素 中图分类号 S794.4 文献标识码 A DOI:10.12008/j.issn.1009-2196.2022.12.011 Study on Physiological Changes of Grafting Healing of Camellia oleifera Cenruan 3 CAI Ya1,2,3 YE Hang1,2,3 WANG Dongxue1,2,3 WU Fangyuan1,2,3 WEI Yu1,2,3 XIA Yingying1,2,3(1.Guangxi Key Laboratory of Special Nonwood Forest Cultivation&Utilization,Nanning,Guangxi 530002,China;2.Guangxi Forestry Research Institute(GFRI),Nanning,Guangxi 530002,China;3.Improved Variety and Cultivation Engineering Research Center of Oil-tea Camellia in Guangxi,Nanning,Guangxi 530002,China)Abstract The physiological indexes related to grafting healing were analyzed with the rootstock spike junction of cenruan 3 grafted seedlings as materials,so as to provide theoretical basis for the study of grafting affinity and rootstock utilization of Camellia oleifera.The results showed that PAL activity and PPO activity of cenruan 3 rootstock showed a single change trend of increasing and decreasing in the whole healing process,and there was no significant difference in PAL activity in the whole period of Camellia vietnamensis rootstock.The POD activity of cenruan 3 rootstock was lower than that of Camellia vietna-mensis rootstock,and there was always significant or extremely significant difference between the two rootstocks.The soluble sugar content of cenruan 3 rootstock changed greatly from 12.35 to 28.31 mgL-1,and was decreased,while Camellia vietna-mensis rootstock rootstock had a first rising process.There was no significant difference in MDA content between the two rootstocks in the whole healing stage.There was no significant difference in IAA content,ABA content and Zr content during the whole healing period.There was significant difference in ABA content between the two rootstocks on the 35th and 45th days.Keywords cenruan 3;scion;rootstock spike junction;physiological indices;endogenous hormone 油茶（Camellia oleifera）是我国特有的木本油料植物，也是广西特色的经济林树种。岑软 3号是广西油茶主推良种，也是目前广西种植面积最大的油茶良种，具有很好的稳产丰产特性1-2。芽苗砧嫁接是油茶育苗生产的主要方法，不仅可保持母树的优良性状，还可以提早开花结果，嫁接苗造林一般比实生苗造林提早 23 年结果。关于油茶嫁接亲和性生理方面已经有一些报道3-7，王瑞等6研究表明，砧木的可溶性蛋白含量与POD 活性高于接穗，而接穗的可溶性糖含量高于砧木。杨志坚等8认为，内源激素 GA3、IAA、ABA 和 ZR 含量都影响油茶芽苗砧嫁接口的愈合。叶航等9-10从形态指标方面研究了 8 个油茶物种与岑软 3 号的嫁接亲和性，发现以本砧嫁接和陆川油茶嫁接亲和性较好，但未对嫁接的亲和性生理进行研究。植物嫁接后砧穗结合部位会产 蔡娅 等 岑软 3 号油茶嫁接愈合的生理变化研究 -67-生一系列的代谢变化，这些代谢相关的生理物质对嫁接成活有很大影响。本研究拟从生理生化方面探讨以陆川油茶砧木和本砧嫁接岑软 3 号愈合过程的生理变化，进一步了解岑软 3 号嫁接的生理亲和机制，为岑软 3 号本砧、异砧利用提供理论依据。1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 试验地概况 试验地广西油茶良种基地位于广西南宁北郊，属于南亚热带季风气候，年平均气温 2021，年平均相对湿度在 80%以上，年降水量 1 350 mm 以上，海拔 80145 m，地势较平缓9。1.1.2 试材 采用岑软 3 号作为接穗，陆川油茶为嫁接砧木，岑软 3 号油茶本砧嫁接为对照，用“接穗-砧木”表示，即 2 个组合分别为“岑软 3号-陆川油茶”（简称 3-L）和“岑软 3 号-普通油茶”（简称 3-P）。每个组合 3 次重复，每个重复200 株。1.2 方法 1.2.1 试验设计 2019 年 11 月中旬，采摘陆川油茶和岑软 3 号的成熟果实，剥出新鲜种子进行沙藏催芽。翌年 5 月 20 日进行芽苗砧嫁接，取胚根中间段为砧木，长度 45 cm。接穗选自广西林科院油茶良种采穗圃的岑软 3 号当年半木质化或木质化春梢，将接穗削成单芽茎段，保留 12 片叶片。嫁接后栽植于以黄心土为基质的无纺布袋（规格为 8 cm12 cm），并加盖薄膜和遮阳网进行保湿遮荫处理，湿度保持在 80%90%。1.2.2 样品采集 嫁接后 35 d 内每隔 7 d 采集样品一次，嫁接后 45、60 d 各采集样品一次，共计采样 7 次。采用完全随机的方法，每次采样每种组合选取 3 株嫁接苗，然后截取砧穗结合部位11.5 cm 装入已开孔的 1.5 mL 离心管，投入液氮中带回实验室保存备用。1.2.3 指标测定 采用蒽酮比色法测定可溶性糖含量，考马斯亮蓝显色法测定可溶性蛋白含量，硫代巴比妥酸法测定丙二醛含量(MDA)，比色法测定苯丙氨酸解氨酶活性（PAL）、多酚氧化酶活性（PPO）、过氧化物酶活性（POD），采用高效液相色谱-串联质谱 HPLC-MS/MS 方法测定吲哚乙酸（IAA）含量、脱落酸（ABA 含量）和玉米素（ZR）含量11-15。1.2.4 数据处理 采用 WPS office 软件进行统计分析和图表绘制；SPSS2.0 软件进行单因素方差分析，比较不同砧木的生理指标差异，采用Pearson 相关分析法分析各指标的相关性。2 结果与分析 2.1 生物酶活性变化及差异分析 对 2 种组合的过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）和苯丙氨酸解氨酶（PAL）的生物酶活性进行分析，结果见图 1。在整个试验期，3-P 的 不同小写字母表示差异显著(p0.05)。图 1 两种砧木生物酶活性变化差异分析 2022 年 12 月 热带农业科学 第 42 卷第 12 期 -68-PAL 活性整体呈上升趋势，整个试验时期上升了80%；PPO 活性整体呈下降趋势，整个时期下降了 62.7%；POD 活性 714 d 时快速下降。3-L 的PAL 活性整个试验期变化不大，差异均不显著；POD 活性愈合前期和后期即第 7 天和 60 天差异不显著；PPO 活性先升高后下降趋势，且 728 d差异不显著，3560 d 差异不显著。对 2 种砧木的生物酶活性作两两比较，结果见表 1。3-P 和 3-L 砧木的 PAL 活性第 14 d 存在显著差异，60 d 时存在极显著差异；POD 活性在第 14 天和 45 天存在差异显著（p0.05），而其它时期差异均达到极显著水平（p0.01）；PPO 活性第 7、21、35 天存在显著差异（p0.05），其它时期无显著差异。表 1 两种砧木生物酶活性差异方差分析 PAL 活性 POD 活性 PPO 活性 取样时间/d 变异来源 自由度 均方 F 值 均方 F 值 均方 F 值 组间 1 133.718 1.238 67 469 066.670 113.559*20 744.640 8.780*7 组内 4 108.020 594 133.330 2 362.800 组间 1 49.824 17.752*2 940 000.000 7.775*45 205.440 0.733 14 组内 4 2.807 378 133.333 61 665.360 组间 1 75.473 7.365 26 966 400.000 97.516*51 226.560 10.745*21 组内 4 10.248 276 533.333 4 767.600 组间 1 9.9