不同生物制剂对南方根结线虫杀虫活性与防治效果_李运朝.pdf

农业环境科学学报Journal of AgroEnvironment Science2022，41（12）:2810-28162022年12月李运朝，李洪涛，及华，等.不同生物制剂对南方根结线虫杀虫活性与防治效果J.农业环境科学学报,2022,41（12）：2810-2816.LI Y C,LI H T,JI H,et al.Insecticidal activity and control effect of different biological preparations against Meloidogyne incognitaJ.Journal of Agro-Environment Science,2022,41（12）：2810-2816.开放科学OSID不同生物制剂对南方根结线虫杀虫活性与防治效果李运朝1，李洪涛1*，及华1，李俊花1，李超楠1，2，章丽1，金小艳3（1.河北省农林科学院生物技术与食品科学研究所，石家庄 050051；2.河北农业大学植物保护学院，河北 保定 071000；3.中农绿康生物技术有限公司，北京 102101）Insecticidal activity and control effect of different biological preparations against Meloidogyne incognitaLI Yunchao1,LI Hongtao1*,JI Hua1,LI Junhua1,LI Chaonan1,2,ZHANG Li1,JIN Xiaoyan3（1.Institute of Biotechnology and Food Science,Hebei Academy of Agriculture and Forestry Sciences,Shijiazhuang 050051,China;2.College of Plant Protection,Hebei Agricultural University,Baoding 071000,China;3.Sino Green Agri-Biotech Co.Ltd.,Beijing102101,China）Abstract：This study explores the insecticidal activity and control effect of different biological agents on Meloidogyne incognita.TenBacillus species and two kinds of Prunus armeniaca（apricot）shell wood vinegar were isolated and cultured in our laboratory and weretested for their insecticidal activity screening against Meloidogyne incognita.The control efficacy of the selected agents was verified usinggreenhouse pot-grown and field-grown tomatoes as testing plants.The indoor bioassay verification test showed that the fermentation brothsof four Bacillus strains and the wild P.armeniaca shell wood vinegar had good poisoning effect on Meloidogyne incognita.The correctedmortalities for the Bacillus fermentation broths were 84.9%for strain XYG169,100%for BMT295,97.9%for strain BMT256,and 80.7%for the YLT74.The corrected mortality rates of nematodes with 100-fold,200-fold,400-fold,600-fold and 800-fold diluted solutions ofP.armeniaca shell wood vinegar were 100%,100%,92.8%,65.4%,and 42.5%,respectively.The pot experiment in the greenhouse showedthat the control effect of the 300-fold solution of P.armeniaca wood vinegar added with 4 g of BMT295 powder was the most effective,with收稿日期：2022-11-10录用日期：2022-12-13作者简介：李运朝（1976），男，河北唐县人，副研究员，从事植物病害生物防治研究。E-mail：L*通信作者：李洪涛E-mail：基金项目：河北省重点研发计划项目（20326505D，20326421D）Project supported：The Key Research and Development Program of Hebei Province（20326505D，20326421D）摘要：为探讨不同生物制剂对南方根结线虫杀虫活性及其防治效果，采用实验室分离培养的10株芽孢杆菌和2种山杏壳木醋液对南方根结线虫进行杀虫活性筛选，并利用温室盆栽番茄实验和番茄田间试验对筛选出的制剂进行防治效果验证。室内生测验证实验表明，有4株芽孢杆菌发酵液和山杏壳木醋液对南方根结线虫有较好的毒杀作用。菌株XYG169发酵液对线虫校正死亡率为84.9%；菌株BMT295发酵液对线虫校正死亡率为100%；菌株BMT256发酵液对线虫校正死亡率为97.9%；菌株YLT74发酵液对线虫校正死亡率为80.7%。山杏壳木醋液稀释100、200、400、600倍和800倍溶液的线虫校正死亡率分别为100%、100%、92.8%、65.4%和42.5%。盆栽实验表明BMT295粉剂4 g+山杏壳木醋液300倍液处理防效最好，相对防效为74.00%。田间试验表明BMT295粉剂+山杏壳木醋液300倍液处理对南方根结线虫防治效果最好，其相对防效为64.54%，该结论与盆栽实验结论一致。综合室内生测实验、盆栽实验和田间试验结果，BMT295粉剂和山杏壳木醋液联合使用防治效果显著，可以作为生物杀线虫剂进一步在田间试验推广。关键词：番茄根结线虫病；南方根结线虫；生物防治；芽孢杆菌；木醋液中图分类号：S432.4文献标志码：A文章编号：1672-2043（2022）12-2810-07doi:10.11654/jaes.2022-1146李运朝，等：不同生物制剂对南方根结线虫杀虫活性与防治效果2022年12月根结线虫（Meloidogyne spp.）被列为全球十大植物寄生线虫之首，属于专性寄生病原物，其种间和种内群体间遗传变异大、地理分布广、寄主范围宽、对作物危害严重，且极难防治1。90%以上的植物根结线虫病是由南方根结线虫（M.incognita）、北方根结线虫（M.hapila）、爪哇根结线虫（M.javanica）和花生根结线虫（M.arenaria）引起2，其中，以南方根结线虫的危害最为普遍3。近年来，我国保护地蔬菜种植业发展迅速，温室连年种植同种蔬菜作物，致使许多老龄温室根结线虫病害日趋严重，已造成了蔬菜的大幅度减产，给菜农们带来了巨大的经济损失4。目前，国内外防治根结线虫病的主要方法有农业防治、物理防治、化学防治、微生物农药防治及植物源农药防治5。其中，化学防治方法因见效快、操作简单而广受菜农欢迎，但化学药剂易使病原菌产生抗药性，易造成环境污染，不利于现代绿色农业的发展6。微生物农药是指由微生物及其代谢产物加工而成的有杀虫、杀菌、除草、杀鼠或调节植物生长作用的具有农药活性的物质，包括农用抗生素和活体微生物农药，是生物防治的物质基础和重要手段7。对根结线虫有毒效作用的微生物很多，目前研究较多的有巴氏杆菌（Pasteruria spp.）、假单胞杆菌（Pseudomonas spp.）、链霉菌（Streptomyces spp.）、类立克次体（Rickettsia spp.）和芽孢杆菌（Bacillus spp.）及其他土壤细菌8-10。植物源农药如苦参碱、印楝素、藜芦碱和马兜铃内酰胺等也对根结线虫具有较高的防治效果11-13。植物源农药具有分解快、残留低、污染少、毒性小等特点14，因此，提取植物杀线虫活性物质研制植物源农药成为研究的热点之一。阿维菌素与植物源农药复配表现出对根结线虫良好的拮抗效果15-16。生防菌与阿维菌素、苦参碱、印楝素、藜芦碱混用可对黄瓜根结线虫的防治起到增效作用17。山杏主要分布于我国三北地区，山杏壳木醋液是山杏壳烧制活性炭过程中的副产物，是含有多种有机物的混合物，具有促进植物生长、消毒土壤、杀菌、防虫防腐、除草和除臭等多种作用18-19。李维蛟等20对根结线虫的防治研究表明，木醋液对根结线虫具有较强的抑制作用且在一定时间内具有特效性。本研究采用本实验室分离培养的10株芽孢杆菌和2种山杏壳木醋液对南方根结线虫进行杀虫活性筛选，并利用温室盆栽番茄实验和设施番茄田间试验对筛选出的生物制剂进行防治效果验证，以期为大面积推广应用奠定基础。1材料与方法1.1 材料1.1.1 供试线虫南方根结线虫由中国农业大学线虫实验室提供。挑取人工接种南方根结线虫的空心菜根结虫卵，将卵置于无菌水中孵化，收取27 d孵化出的活幼虫（J2）供测试。1.1.2 供试药剂供试生防菌剂为本实验室分离培养的10株芽孢杆菌，菌株编号分别是 XYG169、BMT112、YCG39、YCG47、BMT295、BMT238、BMT256、BMT193、YLT74、BMT204；对照药剂为北京农科院植环所提供的“微物主益”抗根结线虫菌剂（木霉厚垣孢子含量 2108CFUg-1）；由菌株BMT295经中试发酵制成的芽孢杆菌可湿性粉剂BMT295（2109CFUg-1）；2种植物提取物分别是山杏壳木醋液（pH 2.7，有机酸总含量为12.96%）和精制山杏壳木醋液（pH 5.6，有机酸总含量为7.36%），由石家庄升隆炭业科技有限公司提供。1.1.3 供试作物供试作物为番茄，品种为“粉佳”，由河北饶阳大尹村镇番茄育苗基地提供。1.2 方法1.2.1 室内生测实验10株芽孢杆菌菌液经摇床发酵培养48 h，用无菌水分别配制成浓度为4108CFUmL-1和2108CFUmL-1的菌液，山杏壳木醋液稀释成100、200、400、600倍和800倍，精制山杏壳木醋液分别稀释成100、200、300倍和400倍。在24孔组织培养板内每孔加入25L约含75条根结线虫（J2）的水溶液，再加入稀释成一定倍数的生物制剂溶液 300 L，每个处理 3 次重a relative control effect of 74.00%.The field experiment showed that the same treatment of 300-fold solution had the best control effect onMeloidogyne incognita,with a relative control effect of 64.54%.The results of indoor bioassay and pot and field experiment revealed thatthe BMT295 powder mixed with P.armeniac