黄芩苷通过PGE2在脑缺血再灌注损害小鼠认知功能中的作用研究.pdf

实用医学杂志 2023年第39卷第15期 The Journal of Practical Medicine 2023 Vol.39 No.15黄芩苷通过PGE2在脑缺血再灌注损害小鼠认知功能中的作用研究邓翕仁1，2 曾道君1，2 张官鹏3 段晓霞1，2西南医科大学附属医院1麻醉科，3心电图室（四川泸州 646000）；2西南医科大学麻醉学系，麻醉与重症医学泸州市重点实验室（四川泸州 646000）【摘要】目的探讨黄芩苷通过抑制 PGE2 对脑缺血再灌注损伤（CIRI）小鼠神经炎症及认知功能障碍的影响。方法成年雄性 C57BL/6J 小鼠随机分组，行短暂双侧颈总动脉闭塞（tBCCAO）造模，给予黄芩苷灌胃或侧脑室注射 PGE2 干预。水迷宫检测小鼠认知功能；ELISA 测定术后 72 h 海马脂质过氧化及神经炎症水平；HE 染色观察脑组织病理改变；Western blot 检测海马铁死亡相关蛋白 GPX4、DMT1、PTGS2 表达。结果CIRI 引起小鼠认知功能损害，并伴随海马神经元损伤、神经炎症、脂质过氧化及铁死亡相关蛋白异常表达（P 0.05）；黄芩苷预处理可改善 CIRI 引起的认知功能损害，并伴随海马神经元损伤减轻，神经炎症、脂质过氧化、铁死亡相关蛋白异常表达减少（P 0.05）。侧脑室注射PGE2后小鼠海马PGE2上调，并伴随海马神经炎症、脂质过氧化、铁死亡相关蛋白异常表达（P 0.05）；黄芩苷通过抑制 PGE2 上调减少海马神经炎症、脂质过氧化、铁死亡相关蛋白异常表达（P 0.05）。海马 PGE2 上调加重 CIRI 引起的小鼠认知障碍（P 0.05）；黄芩苷通过抑制 PGE2 的上调改善认知功能损害（P 0.05）。结论黄芩苷改善 CIRI 引起的认知功能损害，其机制与 PGE2 相关的神经炎症被抑制有关。【关键词】黄芩苷；前列腺素E2；认知功能；脑缺血再灌注损伤；神经炎症【中图分类号】R453.9The effect of baicalin on cognitive function of cerebral ischemia-reperfusion injury in mice through PGE2 DENG Xiren*，ZENG Daojun，ZHANG Guanpeng，DUAN Xiaoxia.*Department of Anesthesiology，the Affiliated Hospital of Southwest Medical University，Luzhou 646000，China；*Department of Anesthesiology，Anesthesiology and Critical Care Medicine Key Laboratory of Luzhou，Southwest Medical University，Luzhou 646000，ChinaCorresponding author：DUAN Xiaoxia Email：【Abstract】ObjectiveTo investigate the effects of baicalin on neuroinflammation and cognitive dysfunction in mice with cerebral ischemia-reperfusion injury（CIRI）by inhibiting PGE2.MethodsAdult male C57BL/6J mice were randomly divided into two groups，the model of bilateral carotid artery occlusion（tBCCAO）was established.Baicalin was given by gavage or PGE2 was injected into lateral ventricle.The cognitive function of mice was detected by Morris water maze.The lipid peroxidation and neuroinflammation in hippocampus were measured by ELISA at 72 h after operation.The pathological changes of brain tissue were observed by HE staining.Western blot was used to detect the expression of GPX4，DMT1 and PTGS2 in hippocampus.ResultsCIRI induced cognitive impairment in mice，accompanied by hippocampal neuronal injury，neuroinflammation，lipid peroxidation and abnormal expression of ferroptosis associated proteins（P 0.05）.Baicalin pretreatment could improve the cognitive impairment induced by CIRI in mice，and was accompanied by a reduction in hippocampal neuronal injury，neuroinflammation，lipid peroxidation and abnormal expression of ferroptosis associated proteins（P 0.05）.PGE2 was upregulated in the hippocampus of mice after intracerebroventricular injection of PGE2，accompanied by neuroinflammation，lipid peroxidation and abnormal expression of ferroptosis associated proteins（P 0.05）.Baicalin could decrease the neuroinflammation，lipid peroxidation and abnormal expression of ferroptosis associated proteins in hippocampus by inhibiting PGE2 up-regulation（P 0.05）.The up-regulation of PGE2 in hippocampus aggravated the cognitive impairment induced by CIRI（P 0.05）.Baicalin improved cognitive impairment by inhibiting 基 础 研 究doi：10.3969/j.issn.1006-5725.2023.15.005基金项目：四川省科技厅自然科学基金资助项目（编号：2022SFSC1360）通信作者：段晓霞 E-mail：1881实用医学杂志 2023年第39卷第15期 The Journal of Practical Medicine 2023 Vol.39 No.15the up-regulation of PGE2（P 0.05）.ConclusionBaicalin ameliorates the cognitive impairment induced by CIRI，and the mechanism is related to the inhibition of PGE2-related neuroinflammation.【Key words】baicalin；PGE2；cognitive function；cerebral ischemia-reperfusion injury；neuroinflammation术后认知功能障碍（postoperative cognitive dysfunction，POCD）是指患者术后出现思维力、定向力、记忆力和专注力障碍，是常见的围术期认知功能相关并发症，具有发生率高、危害严重的特点，在非心脏手术中的发生率高达36.6%41.4%1。探究影响术后认知功能的因素对改善患者术后功能恢复及预后、缩短住院时间，甚至降低患者病死率具有重要意义2。目前对POCD 机制的探讨主要集中在神经炎症、退行性变等方面3。围术期血流动力学剧烈波动引起脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia reperfusion injury，CIRI）所造成的神经炎症，是诱发POCD的重要原因4。前列腺素 E2（prostaglandin E2，PGE2）是抑制神经炎症的潜在靶点，研究5显示，PGE2在脑缺血再灌注后表达上调，而抑制PGE2通路可以减轻CIRI造成的神经炎症以及神经功能障碍6。中药单体黄芩苷是源于黄芩的黄酮类化合物，具有抗菌、抗炎、抗氧化和抗凋亡等生物活性7-8，能显著改善CIRI后认知功能，减轻神经元损伤，减少脑梗死体积9-10。相关研究11显示，黄芩苷可通过抑制PGE2表达，减轻外周炎症反应，然而黄芩苷是否通过PGE2发挥减轻神经炎症和改善认知功能的作用目前鲜有报道。为明确黄芩苷是否通过影响神经中枢PGE2表达及神经炎症从而改善认知功能，本研究采用tBCCAO法建立CIRI小鼠模型，探讨黄芩苷对海马PGE2、神经炎症及认知功能的影响，为中医药及单体在围术期认知功能中的保护提供理论基础。1材料与方法1.1 实验动物 68周龄健康雄性SPF级C57BL/6J 小鼠 80 只，购自成都达硕实验动物有限公司实验动物生产许可证号：SCXK（川）2020-030，体质量20 25 g。所有小鼠饲养在光照/黑暗循环12 h的房间中，室温维持在23 25，可自由获取食物和水。所有动物已通过学校伦理委员会实验动物福利伦理审查（批准文号：SWMU20220073）。1.2 处理及分组 第一部分动物实验研究黄芩苷对脑缺血再灌注小鼠神经认知、海马神经炎症及铁死亡的调控作用，分为对照（Con）组、黄芩苷（Bai）组、CIRI 组、Bai+CIRI 组，每组各9只。参考 ZHOU 等12的研究，腹腔注射 1%戊巴比妥钠（50 mg/kg）进行麻醉后，采用短暂双侧颈总动脉闭塞法（tBCCAO）建立CIRI模型，即为CIRI组；根据DAI等13的研究，以黄芩苷50 mg/kg灌胃，1次/d，连续7 d，为Bai组；在此基础上进行tBCCAO造模，即为 Bai+CIRI 组；等量生理盐水灌胃的小鼠进行对照即为Con组。第二部分动物实验研究黄芩苷对PGE2上调小鼠海马神经炎症及铁死亡的调控作用，分为对照组、Bai组、PGE2组、Bai+PGE2组，每组各 6 只。以 0.5 L/min 的流速向双侧脑室分别注入 20 g/kg 的 PGE214，建立 PGE2 上调的小鼠即 PGE2 组，然后进行 tBCCAO 造模即为 PGE2+CIRI组；Con组与Bai组处理方法同第一部分。第三部分动物实验研究PGE2对CIRI小鼠认知功能的影响，分为 Con 组、CIRI 组、Bai+CIRI 组、Bai+CIRI+PGE2 组，每组各 4 只。黄芩苷灌胃后进行PGE2 侧脑室注射，然后行 tBCCAO 造模，为 Bai+CIRI+PGE2组；Con组、CIRI组、Bai+CIRI组处理同方法同第一部分。1.3 主要实验试剂和仪器 黄芩苷（95%纯度，上海玻尔化学试剂有限公司）；前列腺素E2（98%纯度，北京百灵威科技有限公司）；GPX4、DMT1、PTGS2、GAPDH 兔抗鼠一抗、山羊抗兔二抗（江苏亲科生物研究中心有限公司）；MDA、PGE2、TNF-、IL-1、IL-6 ELISA 试剂盒（广东安迪基因生物科技有限公司）；BCA 蛋白浓度测定试剂盒、ECL 化学发光检测试剂盒（上海雅酶生物医药科技有限公司）等；水迷宫（上海欣软信息科技有限公司）、电子光学显微镜（Nikon，日本）、电泳仪（北京博迈德基因技术有限公司）、酶标仪（Thermo，美国）、立体定向注射仪（深圳瑞沃德生命科技有限公司）等。1.4检测指标1.4.1 Morris水迷宫 小鼠在手术（T0）后第3天（T3）至第6天（T6）进行定位航行实验，连续4天，术后第 7 天（T7）进行探针试验，检测小鼠游泳的轨迹及游泳速度、逃避潜伏期和总的游泳距离，记录60 s内跨平台次数。1.4.2 HE染色 小鼠在行为学后予以深度麻醉，以4%多聚甲醛心脏灌注后迅速断头取脑，中性甲醛固定脑组织不少于2 d。脑组织脱水后，石蜡包埋、4 m切片，行HE染色。高倍显微镜下（400）观察各切片相同部位细胞形态结构，随机选择海马 CA1 区的 10 个视野拍照并计数正常神经元数量。1882实用医学杂志 2023年第39卷第15期 The Journal of Practical Medicine 2023 Vol.39 No.151.4.3 ELISA法测定MDA、PGE2、TNF-、IL-1、IL-6表达水平 按照ELISA试剂盒说明书操作步骤制备试剂和样品，加入标准品和样品，室温避光孵育后洗板、显色，加入终止液，混匀后立即测量450 nm吸光度值，制作标准曲线，计算样本浓度。1.4.4 Western blot法测定GPX4、DMT1、PTGS2水平 取行为学后小鼠海马组织，加入RIPA组织裂解液匀浆之后冰浴彻底裂解，高速离心后取上清液，用BCA试剂盒测定样品蛋白浓度。制胶、上样、电泳、转膜后5%脱脂牛奶室温封闭1 h，TBST洗膜后加入一抗4 孵育过夜，用TBST 漂洗3次后加入二抗孵育，再以TBST漂洗，ECL曝光显影。IMAGE-J软件分析灰度值，目标带灰度值/GAPDH灰度值用以表示蛋白相对表达水平。1.5 统计学方法 本研究所采用的统计分析由GraphPad Prism 9.0和SPSS 27.0统计软件完成。计量资料用（x s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，以P 0.05）。与 CIRI 组相比较，Bai+CIRI 组小鼠术后游泳速度差异无统计学意义（P 0.05）。与Con组相比较，CIRI组小鼠逃避潜伏期在测试第 3 天（T5）及第 4 天（T6）明显延长，差异有统计学意义（P 0.01）。与CIRI组相比较，Bai+CIRI组小鼠逃避潜伏期在T3、T4时间点明显缩短，差异有统计学意义（P 0.05）。CIRI组小鼠跨平台次数较 Con 组显著减少，差异有统计学意义（P 0.01）。Bai+CIRI组较CIRI组显著增多，差异有统计学意义（P 0.01）。见图1、表1。2.2 黄芩苷对CIRI小鼠海马炎症水平的影响 ELISA结果显示：与Con组相比较，CIRI组小鼠海马组织促炎因子 IL-6、IL-1、TNF-及 PGE2 水平显著升高（P 0.05）；与 CIRI 组相比较，Bai+CIRI 组小鼠海马组织PGE2、IL-6、IL-1、TNF-水平显著下降（P 0.05）。见表2。2.3 黄芩苷在CIRI引起海马脂质过氧化及铁死亡相关蛋白异常表达中的作用 各实验组铁死亡相关蛋白指标：与Con组相比较，CIRI组小鼠海马组织GPX4、PTGS2蛋白水平显著升高，DMT1蛋白水平显著降低。脂质过氧化MDA水平显著升高，差异有统计学意义（P 0.01）。与CIRI组相比较，ConBaiCIRIBai+CIRI图1黄芩苷对CIRI小鼠认知功能的影响探针实验轨迹图Fig.1Effects of baicalin on cognitive function in CIRI mice-Track plotting of probe test表1黄芩苷对CIRI小鼠认知功能的影响定位航行实验及探针实验结果Tab.1Effects of baicalin on cognitive function in CIRI mice-Place navigation and probe testx s项目逃避潜伏期（s）第1天 第2天 第3天 第4天游泳速度(cm/s)目标象限停留时间（s）逃避潜伏期（s）跨平台次数（次）Con组45.3 3.742.8 3.533.0 1.628.9 0.618.3 2.534.9 3.228.9 0.66.4 1.6Bai组44.9 2.440.2 3.132.3 1.528.8 0.518.9 2.432.3 1.828.8 0.76.8 1.3CIRI组47.6 3.444.1 3.642.3 1.6*40.2 2.3*17.0 2.617.7 2.8*40.1 2.3*2.3 1.3*Bai+CIRI组45.7 2.543.2 3.838.0 1.8#31.8 1.5#17.6 2.429.5 5.8#31.8 1.5#4.4 1.7#F值1.842.7399.13169.631.7950.36161.8423.28P值0.150.06 0.01 0.010.16 0.01 0.01 0.01注：与Con组比较，*P 0.01；与CIRI组比较，#P 0.05，#P 0.011883实用医学杂志 2023年第39卷第15期 The Journal of Practical Medicine 2023 Vol.39 No.15Bai+CIRI组小鼠海马组织DMT1水平升高，GPX4、PTGS2、MDA 水平显著下降，差异有统计学意义（P 0.05）。见图2、表3。2.4 黄芩苷对CIRI小鼠海马神经元的影响 各组小鼠海马HE染色：400倍下Con组、Bai组、CIRI组、Bai+CIRI 组 CA1 区正常神经元计数依次为：（259.0 19.5）/mm2、（266.0 13.8）/mm2、（144.1 13.7）/mm2、（215.3 13.0）/mm2。可见Con组及Bai组海马组织形态结构完整，细胞结构、形态未见异常。与Con相比较，CIRI组海马CA1区可见大量炎症细胞聚集，神经元细胞水肿、变性，细胞核呈现固缩、溶解、坏死状态，正常神经元数量明显减少（P 0.01）。与CIRI组相比较，Bai+CIRI组小鼠海马组织炎性细胞浸润、细胞水肿、神经细胞变性坏死纯度均明显减轻，正常神经元数量明显增多（P 0.01）。见图3。2.5 黄芩苷在PGE2上调引起海马炎症、脂质过氧化及铁死亡相关蛋白异常表达中的作用 与Con组相比较，PGE2 组海马 PGE2 及促炎因子 IL-1、IL-6、TNF-水平显著上调，铁死亡相关指标GPX4、PTGS2、MDA水平显著上升，DMT1水平下调，差异有统计学意义（P 0.01）。与PGE2组相比较，Bai+表2海马炎症因子水平Tab.2Hippocampal cytokines levelx s，pg/mg炎症因子IL-6IL-1TNF-PGE2Con组75.6 3.461.1 1.6355.4 12.0274.1 17.7Bai组72.1 2.559.6 3.8352.9 38.7294.9 20.7CIRI组90.2 4.3*77.8 4.3*440.0 25.5*358.7 14.4*Bai+CIRI组75.4 5.0#64.6 5.2#356.3 24.0#304.0 13.2#F值17.0317.567.5913.90P值 0.01 0.010.01 0.01注：与Con组比较，*P 0.05，*P 0.01；与CIRI 组比较，#P 0.05，#P 0.01黄芩苷CIRI-+-+PTGS2DMT1GPX4GAPDH70 kD62 kD22 kD37 kD图2CIRI后海马铁死亡指标变化Fig.2Changes of ferroptosis in hippocampus after CIRI表3小鼠海马铁死亡相关蛋白相对定量及脂质过氧化水平Tab.3Relative expression of ferroptosis associated proteins and lipid peroxidation of hippocampusx s项目PTGS2DMT1GPX4MDA(mmol/mg蛋白)Con组1.0 0.001.0 0.001.0 0.0021.25 0.78Bai组1.08 0.130.93 0.161.16 0.1119.39 0.89CIRI组1.47 0.10*0.69 0.10*1.86 0.10*27.59 0.87*Bai+CIRI组1.22 0.09#1.01 0.03#1.64 0.10#24.94 0.85#F值19.439.7780.7375.16P值 0.01 0.01 0.01 0.01注：与Con组比较，*P 0.01；与CIRI 组比较，#P 0.05，#P 0.01Con组Bai组CIRI组Bai+CIRI组海马CA1区图3各组小鼠海马组织H&E 染色变化（400）Fig.3H&E staining images of mice hippocampus of each group（400）1884实用医学杂志 2023年第39卷第15期 The Journal of Practical Medicine 2023 Vol.39 No.15PGE2 组海马促炎因子 IL-1、IL-6、TNF-水平显著下降，铁死亡相关指标GPX4、PTGS2、MDA水平显著下降，DMT1 水平升高，差异有统计学意义（P 0.05）。见图4和表4、5。2.6 PGE2 在黄芩苷改善认知功能损害中的作用 与 CIRI 组相比较，Bai+CIRI 组小鼠逃避潜伏期在测试第 3 天开始明显缩短，差异有统计学意义（P 0.01）。与 Bai+CIRI 组相比较，Bai+CIRI+PGE2组小鼠逃避潜伏期明显延长，差异有统计学意义（P 0.05）。Bai+CIRI 组小鼠跨平台次数较CIRI 组显著增加，差异有统计学意义（P 0.01）。Bai+PGE2+CIRI组较Bai+CIRI组显著减少，差异有统计学意义（P 0.05）。见图5、表6。3讨论本研究表明黄芩苷预处理可改善CIRI引起的认知功能损害，并伴随神经炎症、脂质过氧化及铁死亡相关蛋白的异常表达减少，其机制与黄芩苷抑制PGE2的上调有关。神经炎症在认知功能损害病理过程中发挥重要作用，而不同程度和部位的 CIRI 差异，对脑产黄芩苷PGE2-+-+PTGS2DMT1GPX4GAPDH70 kD62 kD22 kD37 kD图4侧脑室注射PGE2后海马铁死亡相关指标变化Fig.4Changes of ferroptosis in hippocampus after lateralventricle injecting PGE2表4侧脑室注射PGE2后海马铁死亡相关蛋白相对定量及脂质过氧化水平Tab.4Relative expression of ferroptosis associated proteins and lipid peroxidation of hippocampus after lateral ventricleinjecting PGE2x s项目PTGS2DMT1GPX4MDA(mmol/mg蛋白)Con组1.0 0.001.0 0.001.0 0.0020.83 1.40Bai组1.06 0.111.07 0.081.17 0.0920.66 0.90CIRI组1.72 0.13*0.62 0.06*1.88 0.17*25.45 1.05*Bai+CIRI组1.27 0.071.02 0.091.54 0.1122.61 1.10F值37.6728.4437.7111.68P值 0.01 0.01 0.01 0.01注：与Con组比较，*P 0.01；与CIRI 组比较，#P 0.05，#P 0.01表5侧脑室注射PGE2后海马炎症因子水平变化Tab.5Hippocampal cytokines level after lateral ventricle injecting PGE2 x s，pg/mg项目IL-6IL-1TNF-PGE2Con组78.3 4.163.1 2.2343.1 11.5269.1 14.6Bai组74.4 3.160.5 2.9331.4 31.7254.9 21.7PGE2组99.3 5.1*91.3 4.5*497.8 18.6*445.6 19.8*Bai+PGE2组76.4 4.970.1 6.1382.3 21.2287.0 11.6F值21.0433.0135.8277.83P值 0.01 0.01 0.01 0.01注：与Con组比较，*P 0.01；与PGE2组比较，P 0.05，P 0.05Con组CIRI组Bai+CIRI组Bai+CIRI+PGE2组图5PGE2在黄芩苷改善认知功能损害中的作用探针实验轨迹图Fig.5Effects of PGE2 on baicalin in improving cognitive impairment-Track plotting of probe test1885实用医学杂志 2023年第39卷第15期 The Journal of Practical Medicine 2023 Vol.39 No.15生不同的神经炎症效应，栓塞大脑中动脉（MCAO模型）将导致大脑额叶、顶叶及颞叶局部缺血，诱发神经元凋亡，再灌注激活NLRP3炎症小体加剧神经元凋亡、肢体运动障碍15。双侧颈动脉闭塞后恢复血流（tBCCAO模型）的小鼠，海马CA1区大量促炎因子释放，小鼠记忆能力下降、认知功能损害16。本研究采用 tBCCAO 模型证实，CIRI 引起小鼠认知功能障碍，运动功能未受影响。在此基础上，我们运用黄芩苷预处理再对小鼠进行tBCCAO，证明黄芩苷可改善CIRI引起的认知功能损害。既往研究17表明，黄芩苷可通过抑制NLRP3炎性小体的激活和 TLR4/NF-B 信号通路抑制小胶质细胞诱导的神经炎症，改善阿尔兹海默症模型小鼠的记忆力和认知缺陷。LIU等18发现黄芩苷可显著抑制反复脑缺血再灌注造成的IL-6、IL-1、TNF-水平上调。上述研究说明黄芩苷改善认知功能的原因与其抑制神经炎症有关。我们研究发现，小鼠 CIRI 后海马炎症因子 IL-6、IL-1、TNF-水平显著上升，而黄芩苷预处理可改善这些CIRI小鼠的认知功能，并伴有炎症因子释放减少。CIRI诱导海马小胶质细胞激活和神经炎症增加，IL-6、IL-1、TNF-水平显著上调19。我们已有研究结果证实 PTGS2 上调与 TNF-表达成正相关，参与小鼠术后认知功能障碍20。PTGS2 催化花生四烯酸生成PGE2，是大脑中最丰富的前列腺素之一。PGE2通过与PGE2受体（EP）结合介导炎症反应，参与生理和病理生理神经过程21-22。相关研究提示，黄芩苷可抑制额叶皮层、海马、以及下丘脑PGE2的产生23，抑制PGE2表达可减轻巨噬细胞相关炎症反应11。我们发现 CIRI 后海马PGE2 上调，黄芩苷预处理可显著降低海马 PGE2水平，下调 IL-6、IL-1、TNF-等炎症因子表达。因此，黄芩苷可通过抑制 PGE2 水平抑制神经炎症，减轻CIRI引起的认知功能损害。CIRI 通过激活小胶质细胞合成多种炎症因子，导致脂质过氧化和神经元铁死亡发生。YAN等24发现慢性脑灌注不足的大鼠海马促炎细胞因子 IL-6、IL-1、TNF-上调，海马神经元铁死亡加重。QU等25发现，抑制iNOS可特异性地促进M1小胶质细胞铁死亡从而减轻神经炎症，改善蛛网膜下腔出血后脑损伤。我们通过海马定向注射PGE2 上调海马 PGE2，发现海马神经炎症加重，IL-6、IL-1、TNF-水平上调，脂质过氧化水平升高，铁死亡相关蛋白 GPX4、DMT1、PTGS2 异常表达，而黄芩苷预处理小鼠再进行PGE2上调，这些小鼠对海马神经炎症、脂质过氧化及铁死亡相关蛋白的表达影响不明显。黄芩苷抑制神经炎症，从而改善CIRI引起的认知功能损害，PGE2在其中发挥关键作用。综上所述，黄芩苷通过抑制PGE2相关的神经炎症、脂质过氧化、铁死亡相关蛋白异常表达，从而改善CIRI引起的认知功能损害。该研究具有一定的理论基础研究价值，为治疗CIRI提供了新思路，我们拟进一步探讨 PGE2 在 CIRI 引起认知功能损害中的作用，并开展功能验证。【Author contributions】DENG Xiren performed the experiments and wrote the article.ZHENG Daojun performed the experiments.ZHANG Guanpeng revised the article.DUAN Xiaoxia designed the study and reviewed the article.All authors read and approved the final manuscript as submitted.参考文献1 LAI Z，SHAN W，LI J，et al.Appropriate exercise level attenuates gut dysbiosis and valeric acid increase to improve neuroplasticity and cognitive function after surgery in mice J.Mol Psychiatry，2021，26（12）：7167-7187.2 LIU B，HUANG D，GUO Y，et al.Recent advances and perspec表6PGE2在黄芩苷改善认知功能损害中的作用定位航行实验及探针实验结果Tab.6Effects of PGE2 on baicalin in improving cognitive impairment-Place navigation and probe test x s项目逃避潜伏期（s）第1天 第2天 第3天 第4天游泳速度（cm/s）目标象限停留时间（s）逃避潜伏期（s）跨平台次数（次）Con组42.7 2.337.4 0.929.7 0.824.8 1.317.5 0.636.5 3.828.6 0.77.1 0.9CIRI组42.5 2.039.0 1.235.0 1.3*32.6 1.4*18.1 0.325.3 1.8*39.7 0.6*3.8 1.2*Bai+CIRI组43.9 1.737.6 0.831.8 1.4#26.3 1.1#18.0 0.433.4 1.6#29.3 1.2#6.5 1.0#Bai+CIRI+PGE2组44.9 2.038.9 1.034.1 1.531.2 1.017.3 0.530.6 3.231.7 1.95.4 1.1F值1.242.91713.9038.622.7811.8770.337.534P值0.340.08 0.01 0.010.09 0.01 0.01 0.01注：与Con组比较，*P 0.01；与CIRI 组比较，#P 0.05，#P 0.01；与Bai+CIRI组比较，P 0.05，P 0.011886实用医学杂志 2023年第39卷第15期 The Journal of Practical Medicine 2023 Vol.39 No.15tives of postoperative neurological disorders in the elderly surgical patients J.CNS Neurosci Ther，2022，28（4）：470-483.3 彭观发，王力峰，钟茂林，等.非编码RNA在术后认知功能障碍发病中的研究进展 J.实用医学杂志，2022，38（17）：2128-2132.4 WANG R，PU H，YE Q，et al.Transforming Growth Factor Beta-Activated Kinase 1-Dependent Microglial and Macrophage Responses Aggravate Long-Term Outcomes After Ischemic Stroke J.Stroke，2020，51（3）：975-985.5 IKEDA-MATSUO Y，TANJI H，OTA A，et al.Microsomal prostaglandin E synthase-1 contributes to ischaemic excitotoxicity through prostaglandin E2 EP3 receptors J.Br J Pharmacol，2010，160（4）：847-859.6 LI L，YU Y，HOU R，et al.Inhibiting the PGE（2）Receptor EP2 Mitigates Excitotoxicity and Ischemic Injury J.ACS Pharmacol Transl Sci，2020，3（4）：635-643.7 PAN L，CHO K S，YI I，et al.Baicalein，Baicalin，and Wogonin：Protective Effects against Ischemia-Induced Neurodegeneration in the Brain and Retina J.Oxid Med Cell Longev，2021，2021：8377362.8 解寻，孔晋亮，罗劲，等.中药对耐药菌生物膜抑制作用的研究进展 J.实用医学杂志，2021，37（21）：2813-2816.9 LONG Y，XIANG Y，LIU S，et al.Macrophage membrane modified baicalin liposomes improve brain targeting for alleviating cerebral ischemia reperfusion injury J.Nanomedicine，2022，43：102547.10刘恒，孙凡，徐倩倩，等.黄芩苷对脑小血管病模型大鼠认知功能及脑内血管内皮生长因子和内皮抑素表达水平的影响 J.吉林大学学报（医学版），2019，45（5）：1080-1085+1197.11李岩，李明，邝枣园，等.黄芩苷对小鼠巨噬细胞环加氧酶-2和前列腺素E2表达的影响 J.实用医学杂志，2009，25（24）：4129-4131.12ZHOU Z，MA Y，XU T，et al.Deeper cerebral hypoperfusion leads to spatial cognitive impairment in mice J.Stroke Vasc Neurol，2022，7（6）：527-533.13DAI J，QIU Y M，MA Z W，et al.Neuroprotective effect of baicalin on focal cerebral ischemia in rats J.Neural Regen Res，2018，13（12）：2129-2133.14XU Y，LIU Y，LI K，et al.COX-2/PGE2 Pathway Inhibits the Ferroptosis Induced by Cerebral Ischemia Reperfusion J.Mol Neurobiol，2022，59（3）：1619-1631.15