活性调节蛋白、高迁移率族蛋白1在真菌感染性鼻-鼻窦炎患者中表达水平及与T淋巴细胞亚群相关性.pdf

短篇论著.649.ClinJMedJun,20232023年6 月第51卷第6 期临床军医杂志活性调节蛋白、高迁移率族蛋白1在真菌感染性鼻-鼻窦炎患者中表达水平及与T淋巴细胞亚群相关性王伟12，赵姗姗，张明，季民1.潍坊医学院，山东潍坊2 6 10 53;2.同济大学附属东方医院胶州医院耳鼻咽喉头颈外科，山东青岛2 6 6 30 0摘要目的探讨活性调节蛋白（RANTES）、高迁移率族蛋白1（HMGB1）在真菌感染性鼻-鼻窦炎患者中表达水平及与T淋巴细胞亚群的相关性。方法选取自2 0 2 0 年4月至2 0 2 2 年5月同济大学附属东方医院胶州医院收治的12 0 例真菌感染性鼻-鼻窦炎患者为研究对象,并将其纳人B组。另选取同期40 例健康体检者纳人A组。比较两组血清RANTES、HMGB1、T 淋巴细胞亚群水平。比较B组不同严重程度患者血清RANTES、H M CB1、T 淋巴细胞亚群水平。采用多因素Logis-tic回归分析探讨真菌感染性鼻-鼻窦炎发生的危险因素。采用Pearson相关性分析探讨RANTES、H M G B1与T淋巴细胞亚群的相关性。结果B组RANTES、H M CB1、CD 4+、CD 4+/CD 8+水平高于A组，CD8+水平低于A组，差异有统计学意义（P 0.0 5）。中度与重度患者RANTES、H M CB1、CD 4+、CD 4+/CD 8+水平高于轻度患者，CD8+低于轻度患者，差异有统计学意义（P0.05）。重度患者RANTES、H M CB1、CD 4+、CD 4+/CD 8+水平高于中度患者，CD8+水平低于轻度患者，差异有统计学意义（P0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示，RANTES、H M G B1、CD 4+、CD 8+及CD4+/CD8+是真菌感染性鼻-鼻窦炎发生的独立危险因素（P0.05）。RA NT ES、H M CB1表达与CD4+、CD 4+/CD 8+水平成呈相关（P0.05），与CD8+水平呈负相关（P0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准。所有研究对象均知情并签署同意书。1.2研究方法抽取所有研究对象空腹静脉血4 ml,200r/min离心15min，离心半径5cm，于-6 0 冰箱内保存备用。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测RANTES水平。采用酶联免疫吸附法检测血清HMGB1水平,将待检血清标本置于室温中，配置标准品，清洗并拍干酶标板，依次加人标准液、样本、检测抗体，封板，震荡均匀后置于室温中孵育2h,洗板，加酶标记物，震荡，置于室温中孵育45min,加人终止液终止反应，于450 nm处测吸光值，计算HMGB1水平。取两管洁净试管做抗凝处理，分别将2 0 l的CD4+、CD8+单克隆抗体导人试管，室温37 孵育30 min，加人融.650.Clin J Med Off,Jun,2023临床军医杂志2023年6 月第51卷第6 期血剂溶血,2 0 0 0 r/min离心2 min,弃上清液,洗涤,加入固定剂150 ul,将0.5ml的PBS混合均匀制备为悬液,应用流式细胞仪检测CD4+、CD 8+、CD 4+/CD 8+水平。1.3统计学方法采用SPSS26.0统计学软件处理数据。计量资料以均数标准差（xs）表示，两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用方差分析。采用多因素Logistic回归分析探讨真菌感染性鼻-鼻窦炎发生的独立危险因素。RANTES、H M G B1与T淋巴细胞亚群之间相关性采用Pear-son相关性分析。以P0.05为差异有统计学意义。2结果2.1两组血清RANTES、H M C B1、T 淋巴细胞亚群水平比较B组RANTES、H M G B1、CD 4+、CD 4+/CD 8+水平高于A组,CD8+水平低于A组，差异有统计学意义（P0.05）。见表1。2.2B组不同严重程度患者血清RANTES、H M CB1、T 淋巴细胞亚群水平比较交中度与重度患者RANTES、H M G B1、CD4+、CD 4+/CD 8+水平高于轻度患者，CD8+低于轻度患者,差异有统计学意义（P0.05）。重度患者RANTES、HMCB1、CD 4+、CD 4+/CD 8+水平高于中度患者，CD8+水平低于轻度患者,差异有统计学意义（P0.05）。见表2。2.3多因素Logistic回归分析结果将真菌感染性鼻-鼻窦炎作为因变量，将RANTES、H M G B1、CD 4+、CD 8+及CD4+/CD8+作为自变量纳人多因素Logistic回归分析。结果显示，RANTES、H M CB1、CD 4+、CD 8+及CD4+/CD8+是真菌感染性鼻-鼻窦炎发生的独立危险因素（P0.05）。见表3。2.41血清RANTES、H M G B1表达与T淋巴细胞亚群水平相表1两组血清RANTES、H M G B1、T 淋巴细胞亚群水平比较（xs)组别RANTESHMGB1CD4+CD8+CD4+/CD8+A组0.84 0.4254.38 4.6333.61%2.04%53.12%5.76%0.60 0.28B组3.85 1.3477.92 5.2338.81%3.21%25.68%6.42%1.33 0.45值15.48411.4148.16215.54222.451P值0.0010.0010.0010.0010.001表2 B组中不同严重程度患者的T淋巴细胞亚群水平比较(xs)组别RANTESHMGB1CD4+CD8+CD4+/CD8+轻度患者2.52 0.9566.15 4.9536.72%3.26%29.15%3.32%0.97 0.14中度患者3.82 1.22 079.21 5.12 038.84%4.02%26.06%3.11%01.39 0.24重度患者5.23 1.9888.41 5.66 040.87%4.14%21.84%2.63%1.64 0.370注：与轻度组比较,P0.05;与重度组比较，P0.05表3多因素Logistic回归分析结果变量值SE值Waldx值P值比值比95%可信区间RANTES1.0250.4252.4120.0010.6870.551 0.825HMGB11.2250.5512.2230.0010.6380.5140.811CD4+1.1540.4382.6350.0010.6250.569 0.781CD8+0.8640.3352.5790.0010.7040.622 0.948CD4+/CD8+0.8980.4142.1690.0010.6510.5150.783关性RRANTES、H M CB1表达与CD4+、CD 4+/CD 8+水平呈正相关(P0.05），与CD8+水平呈负相关(P0.05)。见表4。3讨论真菌感染性鼻-鼻窦炎是临床常见的侵袭性疾病，病程较长，且不易根治，极易复发8-9 ，患者易出现头疼、发热、消化功能与睡眠质量下降等症状，若未及时治疗，会增加眼部、肺部并发症的发生风险,甚至死亡10-1。RANTES 是血管平滑肌细胞、T淋巴细胞、血小板分泌的一种趋化因子12-13表4血清RANTES、H M CB1表达与T淋巴细胞亚群水平相关性RANTESHMGB1指标P值产值P值值CD4+0.5410.0010.5570.001CD8+-0.4980.001-0.4720.001CD4+/CD8+0.5240.0010.5170.001.651ClinJMedJun,2023临床军医杂志2023年6 月第51卷第6 期T淋巴细胞亚群是机体细胞免疫指标。有研究报道，机体免疫功能与疾病严重程度密切相关，高水平的CD69、RA NT ES是慢性鼻-鼻窦炎患者鼻息肉的独立危险因素14。本研究发现，RANTES在真菌感染性鼻-鼻窦炎患者中呈高表达。这提示，RANTES在鼻上皮细胞的炎症浸润中起到重要作用,其诱导T细胞结合产生生物学效应,参与免疫应答调节，促进炎症的发展。HMCB1是一种促炎性细胞因子，广泛存在于生物体各细胞中,与晚期糖基化、Toll 样受体结合，促进炎症因子分泌15。HMGB1 在炎症反应中作为一种警报信号，能够激活免疫细胞，刺激免疫细胞迁移，促进识别细菌产物，抑制调亡细胞的吞噬作用，进而维持炎症反应16 。有研究报道，HMGB1可诱导内皮细胞活化,增加炎症细胞的存活,引起组织细胞损伤，导致炎症发生17 。本研究发现,HMGB1在真菌感染性鼻-鼻窦炎患者中呈高表达，提示HMGB1参与炎性反应的发生发展,与既往研究18 结果一致。T淋巴细胞亚群是检测机体细胞免疫的指标，能够对机体多种疾病进行诊断，并根据其病机进行分析，有利于患者预后19-2 0 。本研究中，CD4+、CD 4+/CD 8+在真菌感染性鼻-鼻窦炎患者中随病情严重程度呈上升趋势，CD8+呈下降趋势，提示真菌感染性鼻-鼻窦炎患者细胞免疫失衡，免疫功能降低2 1。本研究还发现,RANTES及HMGB1表达与CD4+、CD 4+/CD 8+水平呈正相关，与CD8+水平呈负相关,且RANTES、H M CB1、CD 4+、CD 8+及CD4+/CD8+是真菌感染性鼻-鼻窦炎发生的独立危险因素，提示其可作为诊断真菌感染性鼻-鼻窦炎患者的生物标志物。综上所述,RANTES、H M G B1在真菌感染性鼻-鼻窦炎中呈高表达,与CD4+、CD 4+/CD 8+呈正相关、与CD8+呈负相关，能够在一定程度上起预测真菌感染性鼻-鼻窦炎病情的作用。参考文献：1Medikeri G,Javer A.Optimal management of allergic fungal rhino-sinusitisJ.J Asthma Allergy,2020,13:323-332.2Barrs VR,Talbot J.Fungal rhinosinusitis and disseminated inva-sive aspergillosis in cats J.Vet Clin North Am Small AnimPract,2020,50(2):331-357.3Tyler MA,Luong AU.Current concepts in the management of aller-gic fungal rhinosinusitis J.Immunol Allergy Clin North Am,2020,40(2):345-359.4赵宁，王亚莉，祁顺来.慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉患者鼻内镜术后炎症细胞及因子表达与术后复发的关系J.中国医刊，2021,56(2):173-177.5范宇，王春，徐化冰.鼻窦内窥镜手术联合药物治疗慢性鼻窦炎临床效果及对血清炎症因子水平的影响J.世界最新医学信息文摘（连续型电子期刊）,2 0 2 1,2 1（9）：8-9,12.6于寒冰，阎艾慧.慢性鼻窦炎鼻息肉合并哮喘患者外周血和鼻息肉组织中炎症细胞的对比分析J.中国耳鼻咽喉颅底外科杂志,2 0 2 0,2 6(6)：6 6 0-6 6 5.7中华耳鼻咽喉头颈外科杂志编辑委员会鼻科组，中华医学会耳鼻咽喉头颈外科学分会鼻科学组.中国慢性鼻窦炎诊断和治疗指南（2 0 18）J.中华耳鼻咽喉头颈外科杂志，2 0 19，54(2):81-100.8 Rowan NR,Janz TA,Schlosser RJ,et al.Radiographic nuances inallergic fungal rhinosinusitis J.Am J Rhinol Allergy,2019,33(3):310-316.9Oretti G,Castellana G,Manuguerra R,et al.Isolated fronto-ethmoi-dal allergic 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