ＰＯＵ２Ｆ１调控ｍｉＲ⁃４３３⁃３ｐ抑制胃癌细胞增殖、迁移的实验研究赵轶峰，李明霞，张超，胡小敏，王雄，赵铁军基金项目：河北省医学科学研究课题计划项目（２０２１０９５１）作者单位：０７５０００河北张家口，河北北方学院附属第一医院胃肠肿瘤外科作者简介：赵轶峰，本科，副主任医师。主要从事胃肠肿瘤外科方向研究［摘要］目的探讨第２类ＰＯＵ结构域转录因子１（ＰＯＵ２Ｆ１）调控ｍｉＲ⁃４３３⁃３ｐ对胃癌细胞增殖、迁移能力的影响。方法选取２０２１年６月—２０２２年４月在河北北方学院附属第一医院收集的４５例胃癌组织、癌旁组织和人胃黏膜上皮细胞ＧＥＳ⁃１及人胃癌细胞株ＢＧＣ⁃８２３、ＭＫＮ⁃２８、ＳＧＣ⁃７９０１为研究对象，采用ｑＲＴ⁃ＰＣＲ检测胃癌组织、癌旁组织和ＧＥＳ⁃１、ＢＧＣ⁃８２３、ＭＫＮ⁃２８、ＳＧＣ⁃７９０１细胞中ｍｉＲ⁃４３３⁃３ｐ、ＰＯＵ２Ｆ１ｍＲＮＡ表达；采用蛋白印迹法检测胃癌组织、癌旁组织和ＧＥＳ⁃１、ＢＧＣ⁃８２３、ＭＫＮ⁃２８、ＳＧＣ⁃７９０１细胞中ＰＯＵ２Ｆ１蛋白表达；对ＢＧＣ⁃８２３细胞进行转染，分为空白组（细胞未转染）、ＰＯＵ２Ｆ１小干扰ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）组（ＰＯＵ２Ｆ１ｓｉＲＮＡ转染细胞）、ＰＯＵ２Ｆ１ｓｉＲＮＡ⁃ＮＣ组（ＰＯＵ２Ｆ１ｓｉＲＮＡ阴性对照转染细胞）、ｍｉＲ⁃４３３⁃３ｐｓｉＲＮＡ组（ｍｉＲ⁃４３３⁃３ｐｓｉＲＮＡ转染细胞）、ｍｉＲ⁃４３３⁃３ｐｓｉＲＮＡ⁃ＮＣ组（ｍｉＲ⁃４３３⁃３ｐｓｉＲＮＡ阴性对照转染细胞）、ｍｉＲ⁃４３３⁃３ｐｓｉＲＮＡ＋ＰＯＵ２Ｆ１ｓｉＲＮＡ⁃ＮＣ组（ｍｉＲ⁃４３３⁃３ｐｓｉＲＮＡ和ＰＯＵ２Ｆ１ｓｉＲＮＡ阴性对照共转染细胞）、ｍｉＲ⁃４３３⁃３ｐｓｉＲＮＡ＋ＰＯＵ２Ｆ１ｓｉＲＮＡ组（ｍｉＲ⁃４３３⁃３ｐｓｉＲＮＡ和ＰＯＵ２Ｆ１ｓｉＲＮＡ共转染细胞），采用ＭＴＴ法和Ｔｒａｎ⁃ｓｗｅｌｌ实验分别检测ＢＧＣ⁃８２３细胞增殖、迁移能力；采用ｑＲＴ⁃ＰＣＲ和蛋白印迹法分别检测ＢＧＣ⁃８２３细胞中ｍｉＲ⁃４３３⁃３ｐ、ＰＯＵ２Ｆ１ｍＲＮＡ和ＰＯＵ２Ｆ１蛋白表达；采用双荧光素酶报告基因实验验证ＰＯＵ２Ｆ１与ｍｉＲ⁃４３３⁃３ｐ启动子区结合情况。结果与癌旁组织比较，胃癌组织ｍｉＲ⁃４３３⁃３ｐ表达水平显著降低，ＰＯＵ２Ｆ１ｍＲＮＡ和蛋白表达水平显著升高（Ｐ＜０．０５）；与ＧＥＳ⁃１细胞比较，ＢＧＣ⁃８２３、ＭＫＮ⁃２８、Ｓ...
