2023年食物中毒及肠道传染病采样黎明（教学课件）.ppt

食物中毒及肠道传染病采样 成都市疾病预防控制中心 黎 明 2022.9 前 言 食物中毒和肠道传染病是最常见的卫生事件,在食物中毒和肠道传染病诊断与技术处理过程中,实验室检查是非常重要的,检验结果直接关系到食物中毒和肠道传染病事件的控制和病人的救治,在食物中毒和肠道传染病流行病学调查中对可疑标本的采集与送检,是保证检验质量的前提,同时也是一项涉及面较广的根本技能,每个卫生工作者都应掌握。病原学分类病原学分类 食物中毒：化学性 生物性 生物性：细菌细菌、病毒、真菌毒素 肠道传染病：生物性 生物性：细菌细菌、病毒 采样：细菌性食物中毒的样品采集最具代表性 一、标本的采集原那么 1 典型性原那么 食物中毒标本的采集不同于卫生评价采样,应根据中毒病人的临床表现和现场流行病学调查,初步判断中毒类型,根据可疑食物的性质采集可能含毒最多的标本。如细菌性食物中毒以病人用药前的排泄物、可疑残留食物,尤其是动物性食物为主;真菌及真菌毒素性食物中毒以食物原料为主;化学性与植物性食物中毒以可疑残留食物、食物原料、病人排泻物及体液为主。2 适时性原那么 为了防止可疑食物丧失和被检物质组分发生变化,保证得到正确结论必须尽快采样送检。流调人员到达现场后应及时采样送检,临床有时需要实验室结果采用针对性的药物进行抢救,故采样送检的时间性在食物中毒处理中尤其重要。3 适量性原那么 由于引起食物中毒的毒物种类繁多,有时需实验室检索的工程很多,这要求有一定的样本量,在可能的情况下尽量多采。二、食物中毒标本的采集 通过初步调查结果和对中毒事故的初步判断，根据需要进行采样，样品一般情况下有以下几种：食品原料及剩余食品；患者的呕吐物、粪便、血液、尿液；食品容器及加工工具外表涂抹；食品生产经营者的手试、肛试，必要时可做全面的身体健康检查；其他与中毒食品有关的物品或病人的标本等。1.采样用具要求采样用具要求 所有采样的用具包括标本容器要符合微生物检验的无菌及无抑菌物质 采样用具包括 酒精灯、镊子、剪刀、勺子、试管架、灭菌棉拭子、灭菌肛拭管、灭菌生理盐水管、灭菌aCl营养肉汤管、-运送培养基、别离平板、pH7.6甘油缓冲液、灭菌容器(玻璃瓶、塑料袋、纸袋等)、饮盒；止血带、采样垫巾、无菌棉签、复合碘伏消毒液、真空采血管生化工程用生化管；免疫工程用生化管或肝素抗凝管；血常规工程用2mlEDTA-K2抗凝管、持针器、一次性静脉采血针。2.采样人要求采样人要求 采样必须由2 名以上专业人员执行,出示证件说明来意及采样依据,告知被采样人所享有的权利和义务,在被采样者的陪同下进行样品的采集;应防止样品受到污染,并注意被采样人及采样人员的卫生和平安，采样人员采样时应着工作服，戴口罩和一次性手套;详细填写采样单,被采样单位或个人签字确认;对标本进行编号,同时在标本容器上作标识;填写送检单。3.采样方法采样方法 1残存食物、原料的采集残存食物、原料的采集 采取可疑食物时，最好采取餐桌上剩余食采取可疑食物时，最好采取餐桌上剩余食物。假设做细菌检验，必须注意无菌操作，可物。假设做细菌检验，必须注意无菌操作，可用灭菌镊子夹取后，放入灭菌的容器内，取用灭菌镊子夹取后，放入灭菌的容器内，取200500克。克。如无剩余食物时，可用灭菌盐水，冲洗盛如无剩余食物时，可用灭菌盐水，冲洗盛装过可疑食物的容器或食具，并将洗涤水装入装过可疑食物的容器或食具，并将洗涤水装入灭菌容器内采样；亦可用沾有灭菌生理盐水的灭菌容器内采样；亦可用沾有灭菌生理盐水的消毒棉拭子在盛过可疑中毒食物的容器内涂擦，消毒棉拭子在盛过可疑中毒食物的容器内涂擦，然后将其放入装有灭菌盐水的试管内。然后将其放入装有灭菌盐水的试管内。体积较大的肉食及鱼类等，可将其外表消后，去内部样品，放入灭菌容器内。必要时也可采取半成品及原料送检。2食物制售环节的采样食物制售环节的采样 炊具、容器、锅、盆、桶、刀、菜板、炊具、容器、锅、盆、桶、刀、菜板、抹布等样品的采取，可用棉拭沾灭菌生理盐抹布等样品的采取，可用棉拭沾灭菌生理盐水反复涂擦，然后置于灭菌容器内。菜板可水反复涂擦，然后置于灭菌容器内。菜板可用刀刮取其外表，将刮下的木屑放入灭菌容用刀刮取其外表，将刮下的木屑放入灭菌容器内。抹布可用灭菌剪刀剪下一块，置于盛器内。抹布可用灭菌剪刀剪下一块，置于盛有灭菌生理盐水的容器内。有灭菌生理盐水的容器内。3患者吐泻物及粪便的采集患者吐泻物及粪便的采集 患者呕吐物、排泄物及洗胃液样品，应患者呕吐物、排泄物及洗胃液样品，应取新鲜的，并防止混入其他杂质和细菌。假取新鲜的，并防止混入其他杂质和细菌。假设疑心为细菌性食物中毒，采粪便时应用肛设疑心为细菌性食物中毒，采粪便时应用肛拭子采样，已用抗生素治疗后采取粪便样品，拭子采样，已用抗生素治疗后采取粪便样品，可能影响检验效果。假设病人正在洗胃或呕可能影响检验效果。假设病人正在洗胃或呕吐，那么应直接采取洗胃液或呕吐物装入灭吐，那么应直接采取洗胃液或呕吐物装入灭菌的容器内。中毒者的粪便、呕吐物样品，菌的容器内。中毒者的粪便、呕吐物样品，每份取每份取5-10克，洗胃液克，洗胃液100200ml。肛拭采样肛拭采样 A、采样人员采样前检查肛拭管外表是否光、采样人员采样前检查肛拭管外表是否光滑、有无破损及裂痕以防意外；肛拭管放滑、有无破损及裂痕以防意外；肛拭管放于于pH7.6的甘油缓冲液中。的甘油缓冲液中。B、采样者采样时嘱被检者放松，充分暴露、采样者采样时嘱被检者放松，充分暴露其肛门，避开内外痔，将肛拭管轻轻插入其肛门，避开内外痔，将肛拭管轻轻插入肛门约肛门约5cm，儿童约，儿童约-3cm,轻轻转动几圈，轻轻转动几圈，擦取直肠外表的粘液后取出，放入增菌液擦取直肠外表的粘液后取出，放入增菌液或或C-B运送培养基中。运送培养基中。C、为防止污染，采集标本时应将装有增菌、为防止污染，采集标本时应将装有增菌液的试管口在酒精灯火焰上灭菌。液的试管口在酒精灯火焰上灭菌。4血、尿样采集血、尿样采集 疑心是感染型细菌性食物中毒时，可在疑心是感染型细菌性食物中毒时，可在发病初期采血直接培养病原体。观察从患者发病初期采血直接培养病原体。观察从患者血液、排泄物中别离出的菌株，是否与食物血液、排泄物中别离出的菌株，是否与食物中别离出的菌株同一菌型。对疑似细菌性食中别离出的菌株同一菌型。对疑似细菌性食物中毒物中毒,应采患者急性期应采患者急性期(3 d 内内)和恢复期和恢复期(2 周左右周左右)血液。血液。方法方法:无菌操作抽取静脉血无菌操作抽取静脉血3m1 于无菌试于无菌试管中管中,同时采集同时采集1 份正常人血样作对照；尿样份正常人血样作对照；尿样品每份取品每份取100-200毫升。毫升。5组织器官的采集组织器官的采集 组织器官采集包括尸解或手术后采取组织器官采集包括尸解或手术后采取的胃、肝、肾、肺等重要器官标本的胃、肝、肾、肺等重要器官标本,尸解最尸解最好在病人死亡后好在病人死亡后48 h内进行内进行,要注意防止所要注意防止所用器械带来污染。用器械带来污染。每一采集部位应更换消毒器械每一采集部位应更换消毒器械,每种组每种组织应多部位采集织应多部位采集,每份标本应采集每份标本应采集50100 g 于无菌洁净容器中于无菌洁净容器中,分别保存冷藏送检。分别保存冷藏送检。6从业人员带菌检查从业人员带菌检查 细菌性食物中毒对从业人员带菌检查细菌性食物中毒对从业人员带菌检查非常重要非常重要,粪便用肛拭管直接采样粪便用肛拭管直接采样(不宜留不宜留便便),保存于增菌液中；保存于增菌液中；对患有呼吸道或皮肤病从业人员对患有呼吸道或皮肤病从业人员,用无用无菌拭子对其咽部或皮肤病灶处进行涂抹采菌拭子对其咽部或皮肤病灶处进行涂抹采样样,保存于无菌试管或增菌液中同时涂片数保存于无菌试管或增菌液中同时涂片数张张(立即火焰固定立即火焰固定)。三、水污染事件的样品采集 在调查水域污染状况时，需进行综合分析判断，抓住根本点如水流入前、流入后充分混合的地点，用水地点，流出地点等，以取得代表性水样。对江河、湖泊、泉水、井水等水源采样时，将容器浸入水体中，待水至容器23处时取出。在采集管网系统水样前，先消毒，再放水5分钟，以保证样品具有代表性。严格按无菌采样标准要求采样。四、标本的送检 中毒标本应尽快分析,标本送检前,应根据采样记录和样品登记表清点样品,填好装箱单和送样单,盛装标本的容器或包装要牢固,防止破碎和污染,把标本放入样品箱(或塑料桶)中由专人负责,立即送检。微生物检验和易变质标本一般从取样到检验不应超过2 h,如超过2 h,应将标本保持在8 以下,且不得超过6 h。短途(市内)运送加冰保冷即可;长途运送需加干冰保冷。标本采集与送检是食物中毒调查处理过程中重要步骤,要求在标本采集后应尽可能地用快速检验方法在现场进行定性检验,以协助诊断;对现场无法进行检验的标本在保证标本原始状态下尽快送检,以便在最短的时间内查明中毒原因,采取有效的抢救措施抢救病人,制定控制措施防止蔓延。