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1 例犬子宫蓄脓的诊治及病原菌的耐药性分析2023 年 第 9 期1 例犬子宫蓄脓的诊治及病原菌的耐药性分析王超，刘正伟，高锋，王心竹，郝春晖，刘琪，赵福庆*（辽宁农业职业技术学院，辽宁 营口 115009）摘 要：文章旨在探究犬子宫蓄脓中病原菌的种类以及耐药情况。对大连市某动物医院接诊的一病例进行了一般检查、血常规检查、血液生化检查、X射线检查、B超检查，最终确诊为子宫蓄脓。对子宫内病原菌进行分离培养鉴定以及药物敏感试验，确定致病菌为大肠杆菌，并对庆大霉素、头孢曲松、头孢噻肟、阿米卡星、头孢吡肟、左氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、氨曲南、复方新诺明、多黏菌素B敏感，对头孢他啶中敏，对红霉素、头孢呋辛、头孢唑啉耐药。根据药敏结果选择头孢曲松进行治疗，取得了较好的治疗效果。关键词：子宫蓄脓；病原分离鉴定；药敏试验；大肠杆菌中图分类号：S 829.2 文献标识码：A 文章编号：1672-9692（2023）09-0045-05Diagnosis and treatment of a dog with pyometra and analysis of drug resistance of pathogenic bacteriaWang Chao,Liu Zhengwei,Gao Feng,Wang Xinzhu,Hao Chunhui,Liu Qi,Zhao Fuqing*(Liaoning Agricultural Vocation-Technical College,Liaoning Yingkou 115009)Abstract:The purpose of the article was to investigate the species and drug resistance of pathogenic bacteria in canine uterine pus storage.General examination,blood routine examination,blood biochemical examination,X-ray examination and B-ultrasonic examination were carried out in a case admitted to an animal hospital in Dalian.The pathogenic bacteria in utero were isolated,cultured,identified and tested for drug sensitivity.The pathogenic bacteria were identified as Escherichia coli,and were sensitive to gentamicin,ceftriaxone,cefotaxime,amicacin,cefepime,levofloxacin,ciprofloxacin,ofloxacin,amtronam,cotrimoxazole and polycolistin B,mesomin to ceftazidime,resistant to erythromycin,cefuroxime and cefazolin.Ceftriaxone was selected for treatment according to the results of drug sensitivity,and good therapeutic effect was achieved.Key words:Pyogenic uterus;Pathogen isolation and identification;Drug susceptibility test;Escherichia coli宠物犬子宫蓄脓是临床中发病率较高的疾病之一，年龄越大发病率越高1。子宫蓄脓是由于子宫脓液聚集以及条件性致病菌感染加重为特征的疾病2。研究表明，该病发病原因复杂，与机体内生殖激素、致病菌的毒力以及犬的年龄和品种有关3。子宫蓄脓分为两种类型：一种为开放型子宫蓄脓，主要表现为阴门处流出脓性分泌物；另一种为闭合型子宫蓄脓，阴门洁净，无分泌物流出4。临床中，两种类型发病严重时常表现为功能紊乱伴发的呕吐、腹泻、电解质失衡等情况，严重时可发生休克、黄疸及脓毒血症5。在整个疾病发展过程中，致病菌起到主要作用，因此，明确致病菌种类以及找到治疗效果良好的抗生素是治疗本病的关键。本文对1例犬子宫蓄脓的病例进行了细菌分离鉴定，并对分离细菌进行药敏试验研究，以期为该病的诊断、治疗及预防提供参考。1病例资料患犬雌性，7岁，体重8.6 kg，免疫齐全，未交配。主诉近1 w患犬阴道口流出黏性棕色分泌物，有腥臭味；食欲减退，饮水量少，精神萎靡，呼吸较从前急促，无其他病史。2检查结果2.1患犬临床检查结果患犬有舔舐生殖器现象，体温升高（39.7），呼吸急收稿日期：2023-03-07作者简介：王超，硕士，助教，研究方向为小动物临床诊疗。通讯作者：赵福庆，博士，讲师，研究方向为动物疾病诊断及治疗。基金项目：辽宁省自然科学基金项目营口联合基金（2021-YKLH-11）；辽宁农业职业技术学院院级课题（Lnz202032）452023 年 第 9 期Modern Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine促（37 次/min），收缩压108 mmHg，舒张压58 mmHg，心率110 次/min，黏膜潮红，皮肤轻度脱水。触诊腹部膨大，阴门处有分泌物流出。建议进行实验室检查和影像学检查。2.2患犬实验室检查结果2.2.1患犬阴道分泌物检查结果无菌棉签蘸取患犬阴道分泌物，涂片染色，镜检观察。结果发现，镜检可见分泌物中有大量的杆状细菌和炎性细胞，未发现霉菌和滴虫感染。2.2.2患犬血常规检查结果（见表1）患犬外侧小隐静脉采血约0.5 mL，放入含有EDTA试管中混匀，利用爱德氏血液分析仪进行检测。由表1可知，患犬白细胞数为59.15109/L，中性粒细胞数为 51.62109/L，单核细胞数为 4.56109/L，数值偏高。血小板数为73109/L，数值偏低。结果提示，患犬体内存在严重感染。2.2.3患犬血清生化检查结果（见表2）患犬外侧小隐静脉采血约1 mL，放入无抗凝剂的试管中，利用血液生化分析仪进行检测。由表2可知，患犬血液球蛋白含量为51 g/L，C反应蛋白含量为97.5 mg/L，提示患犬体内存在显著的全身炎症。2.3患犬影像学检查结果2.3.1患犬X射线检查结果（见图1、图2）由图1、图2可知，患犬腹腔子宫部位出现密度均匀的液体成像，提示患犬子宫内可能存在积液或蓄脓。2.3.2患犬B超检查结果患犬保定，对腹部超声部位剃毛，涂抹耦合剂，利用探头在患犬耻骨前端先纵向扫查，再横向扫查以确定膀胱位置，再利用探头从患犬子宫颈向上扫查，子宫超声扫查结果见图3。由图3可知，患犬子宫壁增厚，伴有积液，提示患犬患有子宫蓄脓、子宫内膜炎、子宫壁囊肿。2.4患犬诊断结果根据临床症状及实验室检查、影像学检查结果，患犬表1患犬血常规检测结果Tab.1Routine blood test results of sick dog项目白细胞数目/(109/L)中性粒细胞数目/(109/L)淋巴细胞数目/(109/L)单核细胞数目/(109/L)中性粒细胞百分比/%淋巴细胞百分比/%单核细胞百分比/%红细胞数目/(1012/L)血红蛋白/(g/L)红细胞比容/%平均红细胞体积/fL平均红细胞血红蛋白含量/pg红细胞分布宽度变异系数/%血小板数目/(109/L)结果59.1551.622.764.6587.34.77.95.9114339.566.824.213.273参考范围6.0017.003.6212.300.834.910.141.9752.081.012.033.02.013.05.108.5011019033.056.060.076.020.027.012.517.2117490表2患犬血清生化检查结果Tab.2Serum biochemical test results of sick dog项目血糖/(mmol/L)肌酐/(mol/L)尿素/(mmol/L)磷离子/(mmol/L)钙离子/(mmol/L)总蛋白/(g/L)白蛋白/(g/L)球蛋白/(g/L)谷丙转氨酶/(U/L)碱性磷酸酶/(U/L)谷氨酰转移酶/(U/L)总胆红素/(mol/L)胆固醇/(mmol/L)胰淀粉酶/(U/L)脂肪酶/(U/L)C反应蛋白/(mg/L)结果5.89823.51.052.3082315111193055.1350021097.5参考范围4.117.95441592.59.60.812.201.983.0052822340254510125232120110152.848.265001 5002001 800010.0图1患犬X射线检查结果（腹背位）Fig.1 X-ray results of sick dog(ventral dorsal position)图2患犬X射线检查结果（右侧位）Fig.2 X-ray results of sick dog(right lateral position)46现代畜牧兽医2023 年 第 9 期确诊为子宫蓄脓。经与宠主沟通后决定进行子宫摘除术。3治疗3.1术前准备患犬禁食12 h，禁水4 h，术前补液以纠正机体电解质平衡。手术器械包消毒烘干。麻醉前患犬注射止血敏（酚磺乙胺）、美洛昔康注射液，仰卧保定后进行术部剃毛，丙泊酚诱导麻醉，气管插管连接呼吸麻醉机，异氟烷维持术中麻醉。术部碘伏消毒，铺设创巾。3.2手术过程患犬脐后方3 cm处切开约5 cm的切口，剪除多余的脂肪组织以防止术后结节产生。子宫钩进入患犬腹腔将肠管拉到一侧，暴露子宫后将子宫角缓慢拉出，找到卵巢和输卵管，并钝性分离出卵巢，利用三钳法分别结扎两侧卵巢血管。分离周围的子宫韧带，将两边的动、静脉结扎完全，利用三钳法将子宫体夹紧贯穿结扎，切断子宫体。患犬摘除的子宫和卵巢见图4。荷包缝合患犬子宫残端，先用温热的0.9%生理盐水冲洗，再使用温热的甲硝唑冲洗腹腔，缝合腹壁肌肉层、皮下组织，最后常规结节缝合患犬皮肤，腹部伤口消毒上药、贴敷料贴。患犬苏醒后佩戴伊丽莎白圈，防止舔咬伤口。3.3术后护理术后患犬精神沉郁，没有食欲、不愿意活动，8 h后少量喂食喂水，观察患犬无异常后再少量喂食高能量易消化食物。观察患犬状态，无异常后再慢慢过渡到正常的饮食结构。整个护理过程中，应保证环境安静整洁。3.4病原菌的分离与鉴定手术取出子宫后，2 mL无菌注射器抽取约1 mL子宫内液体，放入1.5 mL无菌离心管中，置于4 温箱保存后将样品转送至实验室进行病原菌分离鉴定。3.4.1病原菌培养及染色镜检结果样本经划线法涂布接种于培养皿，37 培养12 h后，可观察到培养基上的菌落形态单一，呈灰白色、圆形、光滑、湿润、不透明、菌落较大，无嗜血现象。挑取单个菌落进行革兰氏染色，显微镜下观察细菌形态单一，呈短杆状，为革兰氏阴性菌（红色），菌株编号命名为W201101。革兰氏染色镜检结果见图5。3.4.2病原菌PCR鉴定结果挑取单个菌落加入1 mL灭菌水中制成菌液，100 水浴加热10 min，8 000 r/min离心3 min。取1 L离心后的菌液作为 PCR 扩增模板，利用 16S rDNA 通用引物 27F、1492R作为引物，扩增片段长度为1 500 bp。PCR 反 应 体 系（20 L）：2Taq PCR MasterMix 10 L、上下游引物各1 L、DNA模板1 L、灭菌水7 L。PCR 反应条件：95 预变性 5 min；94 变性 30 s，55 退火30 s，72 延伸2 min，共30个循环；72 延伸7 min，4 保温。PCR产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳验证后