2%2C4-二取代-6-氯三氮唑类化合物的合成及其抗肺癌活性研究.pdf

第 卷第 期化学试剂 二取代氯三氮唑类化合物的合成及其抗肺癌活性研究曾宪霞黄怀征凌珍张洁谭凯丽石欣武何林洪(广西医科大学 药学院广西 南宁)摘要:为寻找具有抗肺癌活性的先导化合物以 三氯三嗪为起始原料通过 步反应合成一系列 二取代氯三氮唑衍生物结构由 和 鉴定 体外细胞抗肺癌活性研究表明多个化合物(、和)对受测细胞株表现良好的抗增殖活性尤其是对突变型细胞株、和 其中(联苯基)氯(硝基苯基)三嗪二胺的抗增殖活性最强所有 值均小于 /尽管该化合物因为亲脂性过高难以进入后续研究但其可作为先导化合物为该类结构衍生物的开发提供一定的指导意义关键词:氯二取代三氮唑肺癌表皮生长因子受体野生型突变型中图分类号:文献标识码:文章编号:():./.():.()./.:收稿日期:网络首发日期:基金项目:广西自然科学基金青年基金项目()国家自然科学基金青年基金项目()大学生创新创业项目()作者简介:曾宪霞()女壮族广西东兴人硕士生主要研究方向为抗肿瘤小分子的设计及合成通讯作者:何林洪:.引用本文:曾宪霞黄怀征凌珍等.二取代氯三氮唑类化合物的合成及其抗肺癌活性研究.化学试剂():肺癌已成为肿瘤死亡的主要原因之一其中包括 的非小细胞肺癌()和 小细胞肺癌()测序技术的进步提高了人们对肺癌的认识常见的驱动靶点为表皮生长因子受体()其可介导多条致癌信号通图 含 三氮唑结构的/抑制剂./路包括 和 等参与肿瘤增殖、侵袭、转移和血管生成 由于 抑制剂的应用能明显改善晚期肺癌患者的生存质量以及延长生存期开启了肺癌的个体化和精准化治疗时代 然而 的高突变性包括外显 子/缺 失、/插 入、和 等致使获得性耐药问题层出不穷患者需要定期进行耐药检查以便及时调化学试剂 第 卷第 期整用药方案这也鞭策着 突变抑制剂的快速发展根据文献调研发现三氮唑结构广泛存在于抗肿瘤化合物结构中比如/抑制剂(图)因此本文以其衍生物 二取代氯三氮唑为母核设计并合成了一类具有抗肺癌(包括 野生型和突变型)活性的新型结构化合物 所有目标化合物的结构经核磁共振()和质谱()鉴定具体合成路线如图 所示图 目标化合物的合成.实验部分 主要仪器与试剂 型电子天平(上海梅特勒托利多公司)型磁力搅拌器(河南郑州长城科工贸有限公司)型三用紫外仪(上海市安亭电子仪 器 厂)/型超高效液相色谱串联三重四极杆质谱联用仪、型核磁共振波谱仪(德国 公司)对氟硝基苯、三氯三嗪(萨恩化学技术有限公司)吗啉、硫代吗啉、碳酸铯、无水硫酸钠()、四氢呋喃()、二甲基 甲 酰 胺()、二 氯 甲 烷()、甲 醇()、乙酸乙酯()、石油醚和其他常用耗材(上海毕得医药科技有限公司)所用试剂均为分析纯 实验方法 中间体 的制备往反应瓶中加入 ()原料对氟硝基苯()、()碳酸钾和 溶剂 置于室温中搅拌滴加 吗啉或者硫代吗啉在室温中继续搅拌 监测反应完全停止反应 将反应液倒入冰水中析出大量黄色固体过滤收集滤饼使用清水多次洗涤滤饼低温烘干得到中间体 产率约为 中间体 的制备往三颈瓶中加入 中间体、()氯化铵以及 乙醇和 水的混合溶液在加热回流时加入 ()铁粉继续回流搅拌至 监测反应完全停止反应 使用硅藻土作为助滤剂过滤反应液收集滤液并减压浓缩除去溶剂 加入/溶第 卷第 期曾宪霞等:二取代氯三氮唑类化合物的合成及其抗肺癌活性研究解残留物 萃取 次反应液收集油层并用饱和食盐水萃取 次无水 干燥旋转蒸发仪浓缩油层得到中间体 产率约为 中间体 的制备往反应瓶中加入 ()原料 三氯三嗪()、()碳酸钾和 四氢呋喃作溶剂置于室温中搅拌 相应的 苯胺原料(化合物 或)溶于 四氢呋喃溶液中慢慢滴加进入反应液继续反应至 监测反应完全停止反应 减压浓缩除去溶剂/溶解残留物 萃取 次反应液收集油层并用饱和食盐水萃取 次无水干燥减压浓缩油层并使用硅胶柱层析(石油醚/梯度洗脱)分离纯化收集相应中间体 产率约为 目标化合物的制备往反应瓶中加入 中间体、相应的苯胺原料(和 )或苯酚原料()、()碳酸铯以及 正戊醇置于油浴锅中加热至 监测反应完全停止反应 减压浓缩除去溶剂/溶解残留物 萃取 次反应液收集油层并用饱和食盐水萃取 次无水 干燥减压浓缩油层并使用硅胶柱层析(/梯度洗脱)分离纯化收集相应目标产物产率约为(苯并二氧代醇基)氯(吗 啉 苯 基)三 嗪 二 胺():():()()()()()()()()()():()/:氯(氯氟苯基)(吗啉苯基)三嗪二胺():():()()()()()()()()():()/:氯(吗啉苯基)(硝基苯基)三嗪二胺():():()()()()()()()()()()():()/:(联苯基)氯(吗啉苯基)三嗪二胺():():()()()(和)(和)()()()()():()/:氯(氯苯基)(吗啉苯基)三嗪 二 胺():():()()()()()()()()():化学试剂 第 卷第 期()/:氯(吗啉苯基)(硝基苯氧基)三 嗪胺():():()()()()()()()()():()/:氯(硝基苯基)(硫代吗啉苯基)三嗪二胺():():()()()()()()()()()()():()/:氯(硝基苯基)(苯氧基苯基)三嗪二胺():():()()()()()()()()(和)():()/:氯(氯苯基)(硝基苯基)三嗪 二 胺():():()()()()()():()/:(联苯基)氯(硝基苯基)三嗪二胺():():()()()()()(和)()()():()/:(苄氧基)苯基)氯(硝基苯基)三嗪二胺():():()()()()()()()(和)()()()():()/:(苄氧基)苯基)氯(硝基苯基)三嗪二胺():():()()()()()()(和)()()()()():第 卷第 期曾宪霞等:二取代氯三氮唑类化合物的合成及其抗肺癌活性研究 ()/:(氯(硝基苯基)氨基)三嗪基)氧 基)苯 甲 酸 乙 酯():():()()()()()()()()()():()/:(氯(硝基苯基)氨基)三嗪基)氧 基)苯 甲 酸 甲 酯():():()()()()()()()()():()/:(氯(硝基苯基)氨基)三嗪基)氧基)苯甲酰胺():():()()()(和)()()()():()/:(氯(硝基苯基)氨基)三嗪基)氨基)苯基苯甲酰胺():():()()()(和)()()()()():()/:(氨基苯基)(氯(硝基苯基)氨基)三嗪基)氨基)苯甲酰胺():():()()()()()()()():()/:肺癌细胞系的抗增殖活性测试采用 法测定细胞毒性实验细胞为非小细胞肺癌细胞系()、()、(/)、()和肺癌细胞系()采用 孔板进行体外活性测试培养温度为 加入梯度浓度化合物孵育 后测定抑制率选用 软件拟合剂量响应曲线得 值 结果与讨论 目标化合物的波谱分析目标化合物 的结构应用、和 进行了表征现以 为例予以说明 根据 分析脂肪区化学位移 和 积分均为 个氢多重峰分别为吗啉结构上氧邻位和氮邻位的 个氢芳香区化学位移 积分 个氢单峰为二氧戊环亚甲基的 个氢 化学位移 积分个氢单峰 积分 个氢单峰 积分 个氢单峰 积分 个氢双峰以及 积分 个氢双峰为两个苯基上的 个氢 积分 个氢单峰为两个仲胺的氢 从化学试剂 第 卷第 期 可知吗啉官能团的化学位移处于高场其余碳原子出峰则位于低场与化合物实验式相符 此外再根据 确定其分子量为 确认其结构正确 目标化合物的抗肺癌细胞增殖活性分析为了寻找可在体外对野生型 和多种突变型 均能有效抑制的先导化合物选择在野生型细胞系 和、()突变型细胞系 和 以及()突变型细胞系 检测目标化合物的抗增殖活性结果总结于表 化合物 中仅 和 对各细胞呈现抗增殖活性观其结构两个化合物均存在间硝基苯胺碎片 于是保留三氮唑上的间硝基苯胺碎片对另一苯胺取代基进行构效关系研究 当苯胺上取代基为对位苯基()时对所有细胞系均能有效抑制值小于/略优于 当吗啉被替换成硫代吗啉()活性显著下降 当取代基为对位氧苯基()、对位氯原子()、对位甲氧基苯基()和对位乙氧基苯基()时保持与 相似的活性 当苯胺的对位为裸露的酰氨键()时化合物可有效抑制 野生型和()突变型对()突变型细胞抑制活性较差当酰氨键被取代或者更换成酯类衍生物活性较 下降 综合来看以 二取代氯三氮唑基为母核的衍生物间硝基苯胺为活性必需官能团另一苯胺取代基结构越简洁、平面性越强抗肺癌活性越优表 目标化合物的对肺癌细胞系的抗增殖活性()注.()(/)化合物 /注:值是 次独立实验的平均值 和()(/)和()结论以 三氯三嗪为初始原料经过 步反应合成并鉴定得到 个 二取代氯三氮唑衍生物 体外活性研究表明多个化合物(、和)对肺癌细胞株表现良好的抗增殖活性尤其是 突变型细胞株、和 其中(联苯基)氯(硝基苯基)三嗪二胺的抗增殖活性最强所有 值均小于/由于亲脂性过高难以进入深一步的研究因此可作为先导化合物为该类结构衍生物的开发提供一定的指导意义参考文献:.:.第 卷第 期曾宪霞等:二取代氯三氮唑类化合物的合成及其抗肺癌活性研究():.:.():.:.王红陈玉博.肺癌发病率死亡率居首位.河南肿瘤登记年报.:.谢月红周季颖汪锦娟.抑制剂的研究进展.精细化工中间体():.蔡凯尔谢志龙熊英环等.小细胞肺癌化疗耐药的分子机制研究进展.海南医学():.黄国栋刘心宁郑心等.非小细胞肺癌 耐药机制研究新进展.青岛大学学报(医学版)():.():.():.:.:.黄怀征姚华良何林洪等.()抑制剂的设计、合成及活性评价.化学试剂():.()().:./.:.:.