DOI:10.12403/j.1001-1498.20220498侧柏古树组织培养体系的建立常二梅1,江泽平1,刘建锋1,贾子瑞1,李香2,张健强3,赵秀莲1*(1.林木遗传育种全国重点实验室,国家林业和草原局林木培育重点实验室,中国林业科学研究院林业研究所,北京100091;2.北京市绿地养护管理事务中心,北京102211;3.邯郸市林业工程项目中心,河北邯郸057650)摘要:[目的]攻克侧柏古树在组织培养中外植体消毒不彻底、褐化严重、分生能力弱等技术难点,建立侧柏古树的组织培养体系。[方法]以树龄约3000年侧柏古树当年生的新梢为外植体,经过消毒灭菌处理获得无菌外植体。通过筛选适宜的培养基和激素,建立侧柏古树组织培养体系。[结果]外植体用0.3%HgCl2消毒10min的灭菌效果最好,污染率为25.81%,成活率为54.82%。侧柏古树组织培养基的糖源用3%蔗糖的效果比3%葡萄糖更佳。抗氧化剂与吸附剂试验结果表明,在外植体启动培养基中加入3.00g·L−1活性碳,外植体褐化率最低。侧柏古树组织培养的最佳初代培养基为:1/2MS+NAA0.2mg·L−1+6-BA0.1mg·L−1,不定芽诱导率为32.05%,芽生长快,嫩绿且粗壮。最佳的增殖培养基为:1/2MS+6-BA0.05mg·L−1+NAA0.2mg·L−1+KT0.1mg·L−1,增殖系数为1.93,绿色芽生长快且粗壮。最佳的生根培养基为:WPM+NAA0.5mg·L−1+IBA0.5mg·L−1,生根率达到9.12%,每株平均生根数为2.67,平均根长为1.23cm。总共获得24株生根苗,2个月后2株有红根出现,嫩芽继续生长,成功获得侧柏古树组织培养生根苗。[结论]侧柏古树培养基的选择、生长素与细胞分裂素的比例是侧柏古树增殖培养和不定根形成的重要因素,此实验为其他柏科树木组织培养提供了参考。关键词:侧柏;古树;组织培养;褐化;生根中图分类号:S722.43文献标识码:A文章编号:1001-1498(2023)04-0041-09侧柏(PlatycladusorientalisL.)具有抗逆和长寿等优良特性[1]。陕西省黄帝陵树龄约3000年的侧柏古树(黄帝手植柏)为中华十大手植古树之首,具有重要的文化价值[2-4],其繁殖材料极其珍贵又极度匮乏,因此,能利用较少的繁殖材料的组织培养技术对于保存侧柏古树的种质资源至关重要[5-6]。目前,国内已经建立了一些古树,如杜鹃(RhododendronsimsiiPlanch.)、楸树(CatalpabungeiC.A.Mey.)、西府海棠(MalusmicromalusMakino)等的组织培养体系[7-9];但大部分的古树,如柿树(DiospyroskakiThunb.)、侧柏等的组织培养繁殖困难,存在愈伤组织褐化、生根难、组织培养体系不完整等问...