败毒散及败毒颗粒对上呼吸道感染的治疗作用研究.pdf

人参研究GINSENG RESEARCH2023 年第 4 期败毒散收载于2020 版叶中国药典曳袁处方来源于叶太平惠民和剂局方曳和叶小儿药证直决曳遥 叶太平惠民和剂局方曳原文述败毒散野治伤寒时气袁头痛项强袁壮热恶寒袁身体烦疼袁及寒壅咳嗽袁鼻塞声重袁呕哕寒热袁并皆治之冶袁应为感受野时气冶所表现的症状1-6遥距今已有千余年历史袁是中医经典名方之一袁在治疗外感疫病方面具有独特疗效遥 败毒散为我公司独家品种袁经过长期的临床应用袁发现其发汗解表袁散风祛湿疗效确切袁特别是在治疗体虚感冒尧风寒感冒等方面袁疗效较为显著遥 市场同类产品少袁未见有明显毒副作用的临床报道遥本文旨在通过药效学实验研究探讨败毒散对上呼吸道感染的治疗作用袁 为人们提供一种安全尧有效的中药产品遥1 材料与方法1.1 材料败毒散渊批号院20170411冤尧 败毒颗粒渊批号院X20170401冤袁 均由吉林修正药业新药开发有限公司提供曰对照药品拜阿司匹林渊批号院BJ32151冤袁拜耳医药保健有限公司曰 氢溴酸右美沙芬渊 批号院A1611003冤袁石家庄以岭药业股份有限公司曰盐酸氨溴索分散片渊批号院1624309冤袁烟台东诚大洋制药有限公司曰布洛芬颗粒渊批号院1605625冤袁哈药集团世一堂药厂曰九味羌活颗粒渊批号院160201冤袁九寨沟天然药业集团有限责任公司遥1.2 动物SPF 级Wistar 大鼠袁130耀150g 雄性袁180耀220g 雌雄兼用曰SPF 级ICR 小鼠袁18耀22g 雌雄兼用袁 均购自长春市亿斯实验动物技术有限责任公司遥1.3 仪器JA1103N 型电子天平袁上海民桥精密科学仪器有限公司曰YLS-6B 智能热板仪袁山东省医学科学院设备站曰 电子体温计袁 东莞市福达康实业有限公司曰SMP500-18272-LSIO 酶标仪袁Manufactured in ChinaDesigned in California USA曰YLS-8A 型多功能诱咳引喘仪袁山东省医学科学院设备站遥1.4 方法1.4.1 解热实验正式实验前3d袁将100 只大鼠袁雌雄各半袁置于实验环境中模拟实验操作(包括捕捉尧固定尧灌胃尧安放温度计)袁以适应实验室条件袁每日测量体温(肛温)1次袁连续2 日袁单次体温超过38.5 益或2 次体温差值超过0.5 益的剔除不用遥 筛选出合格大鼠80 只袁随机分为8 组袁分别为空白对照组尧模型对照组尧阳性组渊布洛芬颗粒40mg 窑 kg-1冤尧阳性对照药组渊九味羌活颗粒8.0g 窑 kg-1冤尧败毒散组渊3.24g 生药窑 kg-1冤尧败毒颗粒低尧中尧高剂量组渊1.62尧3.24尧6.48g 生药 窑 kg-1冤遥 每组各10 只袁每日灌胃给药1 次袁灌胃体积10ml 窑 kg-1袁给药3d遥实验前动物禁食不禁水过夜袁使排空肠道袁造模前测量体温1 次作为基础体温袁每只大鼠于背部皮下注射20豫干酵母悬液(10ml 窑 kg-1)复制大鼠发热模型袁空败毒散及败毒颗粒对上呼吸道感染的治疗作用研究许艳茹1袁鄢必新1袁徐 建1袁石 菊1袁于艳辉1袁肖俊美2袁王宝成2袁徐 云员*渊1.吉林修正药业新药开发有限公司袁吉林省中药标准化关键工程技术重点实验室袁长春 130103曰2.通药制药集团股份有限公司袁通化 134001冤摘要院目的通过解热尧镇痛尧抗炎尧止咳尧祛痰的实验研究袁明确败毒散尧败毒颗粒的药理作用袁为临床应用提供参考依据遥 方法采用院淤酵母致大鼠发热模型曰于小鼠热板实验曰盂大鼠足趾肿胀抗炎实验曰榆小鼠氨水诱咳实验曰虞小鼠酚红祛痰实验遥观察败毒颗粒解热尧镇痛尧抗炎尧止咳尧祛痰的药理作用遥 结果淤致热后袁败毒散组渊3.24g 生药 窑 kg-1冤及败毒颗粒中尧高剂量组渊3.24尧6.48g 生药 窑 kg-1冤可明显抑制大鼠体温升高袁发挥解热作用袁与模型对照组比较有统计学差异渊P0.01冤曰于败毒散组及败毒颗粒中尧高剂量组渊7.02尧11.7g 生药 窑 kg-1冤可延长小鼠痛阈值袁与空白对照组比较有显著差异渊P0.05冤曰盂败毒散及败毒颗粒中尧高剂量组渊3.24尧6.48g 生药 窑 kg-1冤在造模后1耀4 小时内均能不同程度的抑制大鼠足趾肿胀袁且成一定的量效关系袁与模型对照组比较有显著性差异渊P0.001冤曰榆败毒散组及败毒颗粒低尧中尧高剂量组渊2.34尧7.02尧11.07g 生药 窑 kg-1冤可明显延长氨水刺激后的咳嗽潜伏期袁并且抑制氨水刺激后5min 内的咳嗽次数袁与空白对照组比较有显著性差异渊P0.001冤曰虞败毒散及败毒颗粒低剂量组渊2.34g 生药 窑 kg-1冤尧九味羌活颗粒组及氨溴索对照组可明显增加小鼠酚红排泌量袁与空白对照组比较有显著性差异渊P0.05冤遥结论败毒散尧败毒颗粒具有明显的解热尧镇痛尧抗炎尧止咳尧祛痰作用袁可作为上呼吸道感染的预防及治疗用药遥关键词院败毒散曰败毒颗粒曰上呼吸道感染曰解热曰止咳基金项目院吉林省科技发展计划项目渊20200404075YY冤遥作者简介院许艳茹袁硕士袁高级工程师袁研究方向院药理毒理研究遥*通信作者院徐云袁硕士袁高级工程师袁研究方向院中药新药开发遥 E-mail:.DOI院10.19403/ki.1671-1521.2023.园4.00620人参研究GINSENG RESEARCH2023 年第 4 期白对照组注射等量的生理盐水袁然后各组大鼠灌胃给药(10ml 窑 kg-1)袁测量给药后1尧2尧3尧4h 大鼠肛温袁记录体温变化吟T益遥1.4.2 镇痛实验在55依0.5 益环境下测定ICR 小鼠痛阈值袁每只小鼠测量2 次袁每次测量间隔30min袁取平均值为小鼠基础痛阈值袁 选取痛阈值在530s 的小鼠70 只袁 体重1822g袁将小鼠随机分为7 组袁空白对照组渊灌胃等体积溶媒冤尧阳性对照布洛芬颗粒组渊80mg 窑 kg-1冤尧九味羌活颗粒组渊17.6g 窑 kg-1冤尧败毒散组渊7.02g 生药 窑 kg-1冤尧败毒颗粒低尧中尧高剂量组渊2.34尧7.02尧11.7g 生药 窑 kg-1冤袁每组10 只袁灌胃给药10ml 窑 kg-1袁连续7 日遥 末次给药后60min 测舔足潜伏期袁记录痛阈值袁超过60s 者按60s 计算遥1.4.3 抗炎实验取雄性大鼠80 只袁体重100130g袁按体重随机分为空白对照组尧模型对照组渊灌胃等体积溶媒冤尧阳性对照阿司匹林组渊540mg 窑 kg-1冤尧 九味羌活颗粒组渊8.0g 窑 kg-1冤尧败毒散组渊3.24g 生药 窑 kg-1冤尧败毒颗粒低尧中尧高剂量组渊1.62尧3.24尧6.48g 生药窑 kg-1冤袁每日灌胃给药1 次袁灌胃体积10ml 窑 kg-1袁连续7 日遥 给药第7日袁 用电子数显卡尺测量大鼠右后足趾基础厚度袁末次给药30min 后袁 于大鼠右后肢足趾皮下注射5%角叉菜胶溶液0.1ml/只袁随后分别在给药后1尧2尧3尧4 和6h 各测一次足趾厚度袁用肿胀度表示结果遥肿胀度=肿胀后的足趾厚度-足趾基础厚度1.4.4 止咳实验ICR 小鼠袁雌雄各半袁取小鼠逐只放入多功能诱咳引喘仪袁以25%氨水喷雾15s袁观察小鼠从喷雾开始到出现腹肌收缩张嘴的时间袁1.5min 内不出现咳嗽小鼠弃去遥 将合格小鼠70 只随机分组袁 分别是模型组尧氢溴酸右美沙芬组渊47mg 窑 kg-1冤尧阳性对照药组渊九味羌活颗粒17.6g 窑 kg-1冤尧败毒散组渊7.02g 生药 窑 kg-1冤尧败毒颗粒低尧中尧高剂量组渊2.34尧7.02尧11.7g 生药 窑 kg-1冤袁每日灌胃给药1 次袁连续7 日遥 末次给药后40min袁将小鼠放入多功能诱咳引喘仪实验装置中袁 用浓度为25%氨水喷雾15s袁观察遥 以小鼠出现咳嗽的时间渊从喷雾开始到小鼠出现咳嗽的时间冤尧 咳嗽次数渊记录5min 内的咳嗽次数冤为观察指标袁观察止咳作用遥小鼠咳嗽的判断以剧烈收缩腹肌并张嘴为准袁可听到轻微咳嗽声遥 潜伏期指从开始喷雾到产生咳嗽的时间遥1.4.5 祛痰实验ICR 小鼠80 只袁雌雄各半袁体重1822g袁按体重随机分为空白对照组尧 模型对照组渊灌胃等体积溶媒冤尧氨溴索组渊70mg 窑 kg-1冤尧阳性对照药组渊九味羌活颗粒17.6g 窑 kg-1冤尧败毒散组渊7.02g 生药 窑 kg-1冤尧败毒颗粒低尧中尧高剂量组渊2.34尧7.02尧11.7g 生药 窑 kg-1冤袁每日灌胃给药1 次袁连续7 日遥小鼠末次给药30min 后袁腹腔注射0.5%酚红生理盐水溶液10ml窑 kg-1袁30min 后处死动物袁解剖分离出气管袁剥去气管周围组织袁剪去甲状软骨下至气管分支处的一段气管袁放入盛有生理盐水2ml 的试管中袁 再加入1mol 窑 L-1氢氧化钠溶液0.1ml袁避光放置30min 后取上清液袁用酶标仪于波长546nm 处测吸光度OD 值遥 OD 值越大表示酚红排泌量越多袁说明药物的祛痰作用越强遥 据回归方程求出浓度(滋g 窑 ml-1)遥按照酚红标准曲线袁计算回归方程遥 在100ml 量瓶内用5豫氢氧化钠溶液精确配制浓度为1mg窑 ml-1的酚红母液袁 再稀释成0.0尧0.1尧0.5尧1.0尧1.5尧10.0滋g 窑ml-1溶液袁于546nm 处测得吸光度(A)袁以酚红剂量(C)为纵坐标尧吸光度(A)为横坐标袁制作标准回归方程遥2 结果2.1 解热实验造模后袁模型对照组大鼠体温明显升高袁与空白对照组比较有显著性差异渊P0.001冤遥 败毒颗粒中尧高剂量组及败毒散组可明显抑制大鼠体温升高袁发挥解热作用袁与模型对照组比较有统计学差异渊P0.05袁P0.01冤曰九味羌活颗粒组在1耀2h 抑制大鼠体温升高作用显著渊P0.05袁P0.01冤曰布洛芬颗粒组可持续抑制大鼠体温升高变化渊P0.05袁P0.01袁P0.05冤遥 结果见表1遥许艳茹等院败毒散及败毒颗粒对上呼吸道感染的治疗作用研究表 1 对大鼠体温变化的影响渊x依s袁n=10冤组别剂量渊g 生药 窑 kg-1冤给药后各时间点体温差渊驻T 益冤1h2h3h4h空白对照组要要要0.08依0.190.05依0.190.16依0.310.26依0.33模型对照组要要要0.72依0.36#1.44依0.21#1.76依0.33#1.54依0.23#败毒散组3.240.41依0.26*1.04依0.22*1.45依0.24*1.23依0.25*低剂量组1.620.42依0.291.24依0.301.41依0.30*1.28依0.32中剂量组3.240.37依0.25*1.16依0.27*1.36依0.17*1.19依0.20*高剂量组6.480.37依0.12*1.20依0.16*1.44依0.28*1.26依0.31*九味羌活颗粒组8.00.42依0.20*1.08依0.26*1.54依0.361.32依0.30布洛芬颗粒组40mg0.43依0.16*0.98依0.19*1.33依0.17*1.14依0.25*与空白对照组比较#P0.001曰与模型对照组比较*P0.05袁*P0.01袁*P0.001遥21人参研究GINSENG RESEARCH2023 年第 4 期2.4 止咳实验败毒颗粒低尧中尧高剂量组可明显延长氨水刺激后小鼠的咳嗽潜伏期袁 并且减少氨水刺激后5min 内的咳嗽次数袁 与空白对照组比较有显著性差异渊P0.01袁P0.001冤袁败毒颗粒低尧中剂量组与败毒散组比较有显著性差异渊P0.01袁P0.001冤遥 结果见表4遥表 4 对小鼠咳嗽潜伏期和咳嗽次数的影响渊x依s袁n=10冤与空白对照组比较*P0.05袁*P0.01袁*P0.001遥2.5 祛痰实验败毒颗粒低剂量组尧九味羌活颗粒组及氨溴索对照组可明显增加小鼠酚红排泌量袁与空白对照组比较有显著性差异渊P0.05冤遥 结果见表5遥表 5 对小鼠酚红排泌量的影响渊x依s袁n=10冤与空白对照组比较#P0.001曰与模型对照组比较*P0.05袁*P0.01遥2.3 抗炎实验模型对照组注射角叉菜胶溶液后袁各时间点大鼠足趾厚度明显增加袁与空白对照组比较有显著性差异渊P0.001冤遥 败