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蝉虫草及其寄生真菌产生免疫抑制剂多球壳菌素能力的鉴定.pdfVIP免费

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2023年第57卷第9期ShanghaiJTraditChinMed,Vol.57,No.9,Sept.2023上海中医药杂志蝉虫草及其寄生真菌产生免疫抑制剂多球壳菌素能力的鉴定章安安,贺庆利上海中医药大学创新中药研究院手性药物研究中心(上海201203)【摘要】目的寻找能产生免疫抑制剂多球壳菌素(myriocin)的蝉虫草或其寄生真菌。方法选取蝉虫草原药材大蝉草和蝉花干燥品,蝉花寄生真菌蝉棒束孢菌(Cordycepscicadae或IsariacicadaeMiq.BNCC114807)以及一种线虫草属蝉寄生真菌Ophiocordycepssp.FU30231,通过聚合酶链式反应(PCR)法扩增内源转录间隔区(ITS)序列,鉴定各材料的菌种;分别以乙醇回流提取法和80%甲醇浸提法制备虫生真菌发酵液,并进行液相色谱-质谱(LC-MS)分析;以多球壳菌素标准品为对照,寻找生产多球壳菌素的虫生真菌;通过大量发酵和分离鉴定多球壳菌素,最终确定其产源虫生真菌。结果ITS序列分析表明,蝉虫草原药材大蝉草和蝉花的寄生真菌分别为奇异弯颈霉(Tolypocladiumparadoxum)和蝉棒束孢菌。提取液LC-MS分析结果表明,仅Ophiocordycepssp.FU30231中检测到多球壳菌素的产生。大量发酵并分离纯化后,采用核磁谱鉴定确证了Ophiocordycepssp.FU30231产多球壳菌素的能力。结论Ophiocordycepssp.FU30231首次被鉴定为免疫抑制剂多球壳菌素的生产菌株。【关键词】蝉虫草;虫生真菌;免疫抑制剂;多球壳菌素;免疫疾病IdentificationofabilityofCordycepsanditsparasiticfungitoproduceimmunosuppressantmyriocinZHANGAn'an,HEQingliResearchCenterforChiralDrugs,InnovativeInstituteofChinesePharmacy,ShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shanghai201203,ChinaAbstract:ObjectiveToidentifythesourceofimmunosuppressantmyriocinfromCordycepsanditsparasiticfungi.MethodsDriedrawmaterialsoftraditionalChinesemedicine,DachancaoandChanhua,andtwoparasiticfungiofcicada,Cordycepscicadae(orIsariacicadaeMiq.BNCC114807)andOphiocordycepssp.FU30231,wereselectedaspotentialmyriocinproducingsources.Polymerasechainreaction(PCR)wasappliedtoobtaininternaltranscribedspace(ITS)sequencesofstrainsofallmaterials.Thefermentationbrothofentomogenousfungiwaspreparedbyethanol-refluxextractionand80%methanolextraction,respectively,andanalyzedbyLC-MS.Theentomogenousfungiproducingmyriocinwereidentifi...

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