T细胞酶联免疫斑点试验和结核菌素试验联合诊断初治肺结核的临床价值.pdf

哈尔滨医药 2023 年 6 月第 43 卷第 3 期因是：自由体位分娩可推进产程，减少医疗技术的干预，让孕产妇对自然分娩充满信心，故在自由体位下能更好地放松身体肌肉和心态，在胎头娩出中配合助产士指导，确保胎头缓慢、有节律下降，从而有效扩张阴道和会阴，确保分娩顺利完成，避免会阴域度裂伤、会阴侧切、新生儿窒息等不良事件的发生。此次研究发现，在生活质量评分与分娩满意度上，观察组高于对照组（P0.05），提示自由体位分娩有利于改善分娩效果，减轻分娩疼痛，缩短产后住院时间，提升产后生活质量，促使产妇对分娩效果满意。综上所述，采用自由体位协助孕产妇分娩，能取得较好的效果，有助于提高自然分娩率、降低剖宫产率，值得临床应用。参考文献1 孙丽娜.自由体位分娩对自然分娩率和剖宫产率影响的临床观察 J.黑龙江医学，2019，43（7）：758，764.2 彭雪莲.分析自由体位分娩方法在提升自然分娩率和降低剖宫产率中的作用 J.医学食疗与健康，2020，18（5）：57+60.3 周娜.自由体位分娩护理对促进自然分娩的临床效果分析 J.医学美学美容，2020，29（3）：113.4 罗权.自由体位分娩对自然分娩率和剖宫产率影响的临床分析 J.当代医学，2019，540（25）：177-179.5 冯晓慧，张莹.孕期营养干预与自由体位分娩对降低剖宫产率的临床影响效果分析 J.中国保健营养，2020，30（8）：128.6 徐鹤洋，荆淑华.自由体位提高自然分娩率以及降低剖宫产的临床有效性分析 J.临床医药文献电子杂志，2020，426（5）：91-91.7 袁单香，黄燕艳.产妇分娩在第一产程中采取自由体位对促进自然分娩的作用 J.哈尔滨医药，2014，34（04）：298-299.8 赵合影，胡绚芳，邓影芳.自由体位分娩配合无保护接生技术对第二产程及分娩结局的影响 J.哈尔滨医药，2022，42（01）：76-77.收稿日期：2022-12-20肺结核是一种发病率及病死率均较高的传染性疾病，是因结核分枝杆菌感染多个器官所引起的慢性感染性疾病，损伤人体肺功能，并对生命安全造成严重威胁。临床上普遍认为，初治肺结核治愈率较高，早期发现，尽早规范性治疗是提高疗效和改善预后的关键1。痰涂片和痰培养是诊断肺结核的金标准，但其需进行细菌培养，耗时较长，不能作为临床早期筛查的首选；PPD 试验是常用的肺结核早期筛查方法，有技术要求低、操作简便、经济、安全等优点，但其容易受疫苗、机体非结核菌感染等因素影响出现假阳性，受免疫状态影响出现假阴性2，因此，为了提高临床早期诊断肺结核，需寻求一种更高灵敏度和特异性的检测方法。本研究通过观察探讨 T-SPOT.TB 试验和 PPD 试验联合诊断肺结核的准确度，总结其临床应用价值如下。1资料与方法1.1一般资料：选取 2019 年 8 月至 2021 年 8 月收治的 120 例疑似肺结核患者临床资料进行回顾性分析，其中男 78 例，女 42 例，年龄 1868 岁，平T 细胞酶联免疫斑点试验和结核菌素试验联合诊断初治肺结核的临床价值赵双（黄河三门峡医院检验科，河南 三门峡 472000）摘要目的观察探讨 T 细胞酶联免疫斑点试验（T-SPOT.TB 试验）和结核菌素试验（PPD 试验）联合诊断肺结核的准确度，总结其临床应用价值。方法选取 120 例疑似肺结核患者临床资料进行回顾性分析，以痰涂片和痰培养结果作为金标准，设为对照组；单一 T-SPOT.TB 试验结果，设为观察组 A；单一 PPD 试验结果，设为观察组 B；T-SPOT.TB 试验联合 PPD 试验结果，设为观察组 C，观察对比 4 组在诊断初治肺结核中的漏诊率、误诊率、阳性预测值、阴性预测值、灵敏度、特异性及准确度。结果观察组 A、观察组 B 的灵敏度、特异性、准确度、漏诊率、误诊率、阳性预测值、阴性预测值均与对照组比较差异有统计学意义（P0.05）。观察组 C 的准确度与对照组比较差异有统计学意义（P0.05）。观察组 A 的特异性、误诊率、阳性预测值与观察组 C 比较差异有统计学意义（P0.05）。观察组 B 的灵敏度、特异性、准确度、漏诊率、误诊率、阳性预测值与观察组 C 比较差异有统计学意义（P0.05）。观察组 A 的准确度与观察组 C 比较差异有统计学意义（P0.05）。结论T-SPOT.TB 试验的灵敏度较高，但特异性较低，T-SPOT.TB 试验和 PPD 试验联合诊断可提高特异性，结合影像学检查、体格检查等综合诊断，提高临床早期诊断肺结核的准确率。关键词T 细胞酶联免疫斑点试验；结核菌素试验；初治肺结核；准确度中图分类号R521文献标识码B学科分类代码：32011文章编码：1001-8131（2023）03-0085-03DOI：10.3969/j.issn.1001-8131.2023.03.03285哈尔滨医药 2023 年 6 月第 43 卷第 3 期均年龄为（32.3依5.5）岁，病程3d 至 2 个月，平均病程（26.3依2.8）d；临床表现为咳嗽 43 例、发热 16 例，胸闷 14 例，胸痛 11 例，咯血 23 例；体检时发现，平时无症状 77 例。本次研究经过本院伦理委员会批准，患者及其家属知情同意，并签署知情同意书。1.2纳入与排除：纳入标准：淤年龄逸18 岁；于有肺部听诊闻及哮鸣音、咳嗽、咳痰、发热或不伴发热等疑似肺结核临床症状及体征；盂所有被试对本次试验内容充分知晓，并自愿签署知情同意书。排除标准：淤合并慢性阻塞性肺疾病、支气管哮喘、非结核性肺部感染等；于合并心、肝、肾功能不全；盂合并凝血功能障碍、血液系统、免疫系统、恶性肿瘤等疾病；榆合并精神异常、认知功能障碍。1.3检测方法1.3.1PPD 试验：将 0.1mL（5IU）PPD（成都生物制品研究所提供），以孟都氏法，对被试前臂掌侧 1/3位置皮下注射，按 全国结核病防治工作手册 进行结果判定3，硬结直径逸5mm 为阳性，硬结直径逸10mm 为强阳性，提示结核感染。1.3.2T-SPOT.TB 试验：抽取被试 5mL 抗凝静脉血样本，立刻送检，在生物安全柜内，以密度梯度离心法，离心分离出外周血单个核细胞，经洗涤、提纯后，制备出工作浓度的细胞悬液，将其和抗原混合后置入微孔培养板进行培养，以 TB 特异性 ESAT-6（抗原 A）和 CFP-10（抗原 B）肽段作为刺激原，经孵化后，以 10伊WB 洗涤液（PBS）洗涤微孔板，然后加入酶标二抗原液，混合口制成二抗工作液，甩掉培养板孔上过夜的培养液，每个孔加入 200滋L的PBS洗涤液，重复四次后拍干，每个孔加入 50滋L 二抗工作液；在 48益下孵育 1h，再以 PBS 洗涤液洗涤四次后，向每个孔加入 50滋L 底物工作液，放置室温下反应 7min，用蒸馏水冲洗后，待培养板干燥，采用德国 AID 公司的酶联免疫斑点分析仪（ELISPOT）进行斑点计数。根据抗原 A 和（或）抗原 B 的反应进行结果判定，阳性标准：空白对照孔的斑点数6，任意 1 个实验孔的斑点数空白孔的斑点数*24。1.3.3痰涂片和痰培养方法：留取被试者清晨深咳的脓性痰液样本，以适量的生理盐水稀释后，置于密闭无菌容器中保存，取少量样本滴于载玻片上，进行染色后，在显微镜下观察，100 个视野内可见逸3个结核分歧杆菌，判断为阳性；依据 分枝杆菌分离培养标准化操作及质量保证手册 的操作规范进行痰液样本培养5，在罗氏培养基（酸性）上可见明显菌落，将菌落刮落，采取比例法进行药敏试验，培养基斜面生长菌落数对应判定为阴性、1+、2+、3+、4+。1.4观察指标：以痰涂片和痰培养结果作为金标准，设为对照组；T-SPOT.TB 试验结果，设为观察组A；PPD 试验结果，设为观察组 B；T-SPOT.TB 试验联合 PPD 试验结果，设为观察组 C，观察对比 4 组在诊断初治肺结核中的漏诊率、误诊率、阳性预测值、阴性预测值、灵敏度、特异性及准确度。公式如下：灵敏度=真阳性例数/（真阳性例数+假阴性例数）*100%；特异性=真阴性人数/（真阴性例数+假阳性例数）*100%；准确度=真阳性例数/金标准真阳性例数*100%；漏诊率=假阴性例数/总检测例数*100%；误诊率=假阳性例数/总检测例数*100%；阳性预测值=真阳性例数/（真阳性例数+假阳性例数）*100%；阴性预测值=真阴性人数/（真阴性例数+假阴性例数）*100%6。2结果观察组与对照组的检查结果对照，见表 1。表 1观察组与对照组检查结果对照n观察组 A、观察组 B 的误诊率、漏诊率、灵敏度、特异性、准确度、阳性预测值、阴性预测值均与对照组比较差异有统计学意义（P0.05）。观察组 C 的准确度与对照组比较差异有统计学意义（P0.05）。观察组 A 的灵敏度、准确度、漏诊率、阴性预测值与观察组 C 比较差异有统计学意义（P0.05）；特异性、误诊率、阳性预测值与观察组 C 比较差异无统计学意义（P0.05）。观察组 B 的灵敏度、特异性、准确度、漏诊率、误诊率、阳性预测值与观察组 C 比较差异有统计学意义（P0.05）。观察组 A 的误诊率、漏诊率、灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值比较差异无统计学意义（P0.05）；观察组 A 的准确度与观察组 C 比较差异无统计学意义（P0.05）。见表 2、表 3。3讨论临床认为，初治肺结核若能得到尽早规范性治疗，治愈率较高。因此，对肺结核进行早期筛查、尽早确诊、尽早规范性治疗，对提高其临床疗效及改善预后，有着非常重大的意义。痰涂片和痰培养是诊断肺结核的金标准，可以准确地检出结核分枝杆菌，但细菌培养时间较长，约需 4 周，且技术要求较高，流程操作烦琐，不是理想的早期筛查方法7。PPD试验是通过皮下注射 PPD，根据注射部位硬结情况组别阳性阴性真阳性真阴性假阳性假阴性观察组 A98228316157观察组 B883269221910观察组 C9228892533对照组10812108120086哈尔滨医药 2023 年 6 月第 43 卷第 3 期组别误诊率漏诊率灵敏度特异性准确度观察组 A15/120（12.5）7/120（5.8）83/90（92.2）16/31（51.6）83/108（76.9）观察组 B19/120（15.8）10/120（8.3）69/79（87.3）22/41（53.7）69/108（63.9）观察组 C3/120（2.5）3/120（2.5）89/92（96.7）25/28（89.3）89/108（82.4）对照组00100.0（90/90）100.0（12/12）100.0（108/108）阳性预测值83/98（84.7）69/88（78.4）89/92（96.7）100.0（108/108）阴性预测值16/23（69.6）22/32（68.8）25/28（89.3）100.0（12/12）判定有无感染过结核菌，属于 IV 型变态反应原理的一种皮内试验，机体被结核杆菌感染过之后，对应产生致敏 T 淋巴细胞，少许的结核杆菌或 PPD 进入机体产生刺激时，可促使其释放出多种可溶性淋巴因子，使得血管通透性增加，引起大量的巨噬细胞聚集在局部，表现为在 4872h 内，局部皮肤会出现红肿硬结反应，提示阳性8。PPD 试验操作简便，技术要求较低，价格经济，相对痰培养出结果要快很多，适合早期筛查使用，但其灵敏度和特异性均达不到较高水平，本研究统计结果中也显示，PPD 试验结果的灵敏度、特异性、准确度均低于痰涂片和痰培养结果，漏诊率和误诊率均高于痰涂片和痰培养结果，具有统计学意义，考虑通过 PPD 致敏反应中，非结核菌感染和卡介苗接种均有可能引起类似变态反应，导致结果出现假阳性，而受检者免疫功能低下状态，T 淋巴细胞含量较低，则容易导致结果出现假阴性。T-SPOT.TB 试验是以 T 细胞免疫应答作为基础，检测结核分枝杆菌的特异性抗原对机体进行刺激后产生 酌-干扰素的致敏 T 淋巴细胞数量或 酌-干扰素的浓度，判定机体是否感染过结核杆菌。T-SPOT