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第 40 卷第 4 期2023 年 8 月实验动物科学LABORATORY ANIMAL SCIENCEVol.40No.4August 2023论著收稿日期:2022-09-26基金项目:北京市科技重大专项(Z191100007619060)作者简介:亓妙(1999),女,研究方向:心血管药理学.E-mail:miaoQi_maru 通信作者:杨润梅(1981),女,副研究员,研究方向:心血管药理学.E-mail:rmyang 不同配方高脂饲料诱导建立大鼠高脂血症模型的比较研究亓 妙 徐晨曦 吕玲娟 杨志宏 杨润梅(中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所药理毒理研究中心,北京100193)摘要:目的应用不同配方的高脂饲料,诱导建立 Sprague-Dawley(SD)大鼠高脂血症模型。方法雄性 SD 大鼠随机分成 6 组:正常对照组和 5 个高脂模型组,连续分别饲喂普通饲料和不同配方高脂饲料 6 周,于诱导 1、2、4 和 6周检测大鼠血脂含量,诱导 6 周后进行肝脂质含量的检测。结果与正常对照组大鼠相比,造模 6 周后,模型 2 和模型 3 组大鼠血清中总胆固醇(TC)含量显著升高,各模型组大鼠血清中的低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)含量均显著升高;且与正常组大鼠相比,各模型组大鼠肝中的甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)含量也显著增加。结论通过饲喂高脂饲料 6 周进行诱导,添加了 20%果糖和 10%猪油的配方 2 和配方 3 高脂饲料能够成功建立大鼠高胆固醇血症模型,为降脂药物的研发提供了一种简单、低成本、稳定的动物模型。关键词:高脂血症模型;高脂饲料;SD 大鼠;胆固醇中图分类号:Q95-3文献标志码:A文章编号:1006-6179(2023)04-0039-05DOI:10.3969/j.issn.1006-6179.2023.04.008Comparative study on the establishment of hyperlipidemia models inrats induced by different high-fat dietsQI Miao,XU Chenxi,LYU Lingjuan,YANG Zhihong,YANG Runmei(Center for Pharmacological and Toxicologial Research Institute of Medicinal Plant Development,CAMS&PUMC,Beijing 100193,China)Abstract:ObjectiveTo discover the hypolipidemic drugs,we established the model of hyperlipidemia in Sprague-Dawley(SD)rats by feeding the high-fat diets of different recipes.MethodMale SD rats were randomly assigned to 6 groups:the control group and 5 model groups.The rats were fed with the control diet and the high-fat diet of five different recipes for 6 weeks respectively.The concentrations of serum lipids were detected at the end of 1,2,4 and 6 weeks feeding.The hepatic lipids concentrations were determined at the end of 6 weeks.ResultCompared with the control group,after 6 weeks of feeding,the concentrations of serum total cholesterol(TC)of the rats in model group 2 and 3 significantly increased;the concentrations of serum low-density lipoprotein cholesterol(LDL-C)of the rats in all model groups significantly increased.And the hepatic lipids concentrations significantly increased in all model groups.ConclusionThe model of hypercholesteremia was established by feeding the high-fat diet of recipe 2 and 3 that adding 20%fructose and 10%lard for 6 weeks in rats.this experiment provides a simple,low-cost,and stable animal model for the development of lipid-lowering drugs.Key words:hyperlipidemia model;high-fat diet;Sprague-Dawley rats;cholesterol 实验动物科学40 卷高脂血症是一种以机体血液脂质水平异常为特征的常见代谢性疾病,也是引起动脉粥样硬化、心脑血管疾病及脂肪肝等的重要致病因素。它对人体的损害是隐蔽、逐步、进行性的,是一种全身性的疾病。随着人们饮食结构的改变,高脂血症的发病率明显上升,成为了目前常见临床疾病1,而且由其诱发的各类疾病已严重威胁人类身体健康。建立稳定、理想的高脂血症模型是研究疾病的重要基础,也是降脂新药研发的需要。大鼠是目前最常用的实验动物,具备饲养方便、成本较低、取血量大等特点,也常用于建立高脂血症动物模型,广泛的用于降脂药物的研究2-3。通过文献4-6调研,我们发现大鼠的高脂饲料配方种类众多,建模效果也不稳定。因此本实验在饲料中添加不同比例的胆固醇、猪油、蔗糖、果糖和酪蛋白等常用造模剂,目的在于找到一个能诱导稳定高脂血症模型的大鼠高脂饲料配方,为降脂药物的研发奠定基础。1材料和方法1.1材料1.1.1实验动物:SPF 级雄性 SD 大鼠 60 只,体质量 200 220 g,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供【SCXK(京)2016-0006】。饲养于中国医学 科 学 院 药 用 植 物 研 究 所 动 物 中 心 屏 障 环 境【SYXK(京)2017-0020】中。温度:21 25 ,湿度:40%60%,12 h 光照阴暗交替。所有实验操作均按照该中心的操作指南执行,并得到中国医学科学院药用植物研究所动物伦理委员会的许可,伦理审批号:SLXD-20200918027。1.1.2实验饲料:普通饲料由江苏省协同医药生物工程有限责任公司提供,高脂饲料从河南省环宇禾康生物科技有限公司自行订购,总共有五种配方。配方见表 1。表 1高脂饲料配方表(%)Table 1Recipes of high-fat diets(%)组别果糖蔗糖猪油胆固醇胆盐酪蛋白普通饲料120/510.3568.7220/1010.3563.7320/1010.3/68.74/20510.3568.75/201010.3563.71.1.3试剂:血清总胆固醇(total cholesterol,TC)检测试剂盒,批号 191671,有效期至 2021-06-23;甘油 三 酯(triglyceride,TG)检 测 试 剂 盒,批 号191051,有效期至 2021-08-26;低密度脂蛋白-胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)检测试剂盒,批号 191321,有效期至 2020-09-26;高密度脂蛋白-胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)检测试剂盒,批号 191211,有效期至 2020-10-13,以上试剂盒均来源于中生北控生物科技股份有限公司。1.2方法大鼠适应饲养 3 d 后开始实验,随机分为正常组、模型 1 组、模型 2 组、模型 3 组、模型 4 组、模型 5组,10 只/组。正常组给予普通饲料,其余各模型组给予相应配方的高脂饲料,配方见表 1。自由饮水,连续喂养 6 周。每日记录大鼠进食量,每周称重。分别于造模 1、2、4 及 6 周后,禁食不禁水 12 h,大鼠麻醉后眼眶内眦后静脉丛采血约 0.5 mL,血样 4 下静置 2 h、3 500 r/min 离心 15 min 取血清,测定TC、TG、HDL-C、LDL-C 的含量。过量麻醉处死大鼠,剖取肝,检测肝中 TG、TC 的含量。1.3统计学分析实验数据以均数标准差(xs)表示,采用 SPSS 19.0 统计软件进行方差分析,P0.05,即组间有统计学差异。2结果2.1进食量与正常对照组大鼠相比,模型 2 组、模型 3 组和模型 5 组大鼠的进食量明显减少,其中,模型 2 组从造模第 1 周持续至第 6 周,差异具有统计学意义,模型 3 组大鼠在造模第 1、3、4、5 和 6 周差异具有统计学意义,模型 5 组大鼠在造模第 3、4 和 6 周差异具有统计学意义。其余模型组大鼠进食量与正常组比较无明显差异(表 2)。04第 4 期亓妙等:不同配方高脂饲料诱导建立大鼠高脂血症模型的比较研究 表 2各组大鼠进食量(xs,g/d,n=10)Table 2Food intake of rats in each group(xs,g/d,n=10)组别第 1 周第 2 周第 3 周第 4 周第 5 周第 6 周正常组24.01.228.62.030.23.328.11.730.54.927.91.0模型 1 组23.61.529.12.927.21.827.32.030.55.127.41.5模型 2 组21.91.5 25.82.2 24.61.2 23.81.1 25.83.524.01.3 模型 3 组22.11.7 26.33.525.02.7 23.62.2 25.95.924.42.8 模型 4 组24.91.429.72.429.11.628.22.230.54.127.51.6模型 5 组24.51.027.81.826.70.8 25.11.3 27.84.925.31.1 注:与正常组比较,P0.05,P0.01,P0.001Note:Compared with the normal group,P0.05,P0.01,P0.0012.2体质量造模前各组大鼠体质量无明显差异。与正常组大鼠相比,造模 1 周后开始,持续至 6 周,模型 3 组大鼠体质量明显降低,差异有统计学意义;其余各模型组大鼠体质 量与正常 组大鼠 比 较 无 明 显 差 异(图 1)。注:与正常组比较,P0.05,P0.01Note:Compared with the normal group,P0.05,P0.01图 1各组大鼠体质量(xs,n=10)Fig.1Weight of rats in each group(xs,n=10)2.3血清脂质含量与正常组大鼠相比,造模 1 周后至 6 周,各模型组大鼠的总胆固醇(TC)含量,与正常组相比都有所升高,但只有模型 2 和模型 3 组大鼠与正常组的差异一直有统计学意义(图 2);造模 1 周后持续至 6周,各模型组大鼠血清中的低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)含量与正常组相比均明显升高,差异有统计学意义(P0.001)(图 3);各模型组大鼠血清中的高密