E-selectin基因多态性与3D-slicer辅助下神经内镜治疗老年性中等量丘脑出血预后相关性研究.pdf

Neural InjuryAnd Functional Reconstruction,August 2023,Vol.18,No.8临床研究E-selectin基因多态性与3D-slicer辅助下神经内镜治疗老年性中等量丘脑出血预后相关性研究闫建敏，杨利辉，张翡作者单位邢台市第三医院神经外一科河北 邢台 054000基金项目邢台市科技计划项目（No.2019ZC223）收稿日期2021-01-13通讯作者闫建敏摘要 目的：探讨E-selectin基因多态性与3D-slicer辅助下神经内镜治疗老年性中等量丘脑出血预后的相关因素。方法：选择邢台市第三医院于2016年1月至2020年1月收治的老年性中等量丘脑出血患者268例，均接受3D-slicer辅助下神经内镜血肿清除术治疗。所有患者均采用聚合酶链反应-限制性内切酶长度片段多态性(PCR-RFLP)对E-selectin基因rs2076059位点进行基因分型分析，分为GG、GA、AA基因型。记录患者围手术期情况，包括血肿清除率、穿刺到预设位置成功情况以及术后再出血等并发症情况，术后3个月评价患者预后并比较相关基线情况，包括性别、年龄、出血部位、出血量、是否破入脑室、分型、GCS评分及E-selectin基因多态性。对影响患者预后的因素进行单因素分析，并采用Logistic回归分析患者预后的独立影响因素。结果：E-selectin 基因 rs2076059 位点 3 种基因型（GG、GA、AA）的期望值和观测值均符合Hardy-Weinberg平衡定律（2=4.166，P=0.125）。268例患者术中穿刺至预设位置均成功，术后第1天和第3天血肿清除率分别为（89.2610.14）%和（94.2512.03）%，术后无发生再出血，围手术期并发症颅内感染、肺部感染例数分别有1例和10例。术后3个月预后良好238 例、预后不良30 例，rs2076059位点不同基因型患者的术后预后情况存在差异（P0.05），其中GG基因型应答率明显高于GA、AA基因型（P0.05）。单因素分析显示术后3个月预后良好和预后不良患者的出血部位、出血量、是否破入脑室、分型、GCS评分差异均具有统计学意义（均P60岁老年人群；有高血压病史；接受3D-slicer辅助下神经内镜血肿清除术治疗；知情同意并签字。排除标准：合并脑疝或恶性肿瘤者；中途退出研究者；合并凝血功能异常者；合并严重心、肝、肺、肾等重要脏器功能不全者。268例患者中，男141例，女127例；年龄6076岁，平均（69.232.32）岁；入院时GCS评分为38分25例，912分126例，1315分117例。研究方案得到医院伦理委员会准许。1.2 方法DNA基因提取及E-selectin基因rs2076059位点基因分型检测：治疗前抽取患者外周静脉血3 mL并置于EDTA抗凝管中保存，采用DNA提取试剂盒（型号：QIAGEN DNeasy Blood&Tissue）对样品 DNA进行提取，采用紫外分光光度计（型号：Nano Drop2000）对DNA浓度和纯度进行检测，保证DNA样品的浓度为30 ng/L以上、纯度即吸光度A260/A280处于1.82.0范围内。然后采用聚合酶链反应-限制性内切酶长度片段多态性(PCR-RFLP)技术对基因进行分型检测。E-selectin基因rs2076059位点引物序列为上游引物：CGCAGAGCAAGGAAGCAAATG，下游引物：GCTTCTTTCTCCTCTGGCCACCT。采用测序仪（软件GeneMapper4.1）对基因测序分型，分型为GG、GA、AA。1.3 评价指标494神经损伤与功能重建2023年8月第18卷第8期围手术期情况：包括血肿清除率、术中是否成功穿刺至预设位置和术后并发症。血肿清除率的计算：于术后第1 天和第3天对患者进行常规CT头部检查，利用3D-Slicer软件测量患者血肿体积，计算术后第1天和第3天的血肿清除率。血肿清除率计算公式为：(术前血肿体积术后血肿体积)/术前血肿体积100%6。术后并发症包括术后再出血、颅内感染和肺部感染。预后及相关基线情况：术后3个月门诊随访复查，采用格拉斯哥预后量表(Glasgow outcome scale，GOS)评价预后，分为级；其中级为死亡，评1分；级为植物生存，评2分；级为重度残疾，评3分；级为轻度残疾，评4分；级为恢复良好，评5分；级属于预后良好，级属于预后不良7。记录不同预后患者基线资料，包括性别、年龄、出血部位、出血量、是否破入脑室、分型、GCS评分及E-selectin基因rs2076059位点多态性。1.4 统计学处理采用SPSS19.0软件分析数据，计量资料用（xs）表示，组间比较采用独立样本t检验；计数资料采用百分比表示，组间比较采用2检验；三组数据比较采用单因素方差分析，三组间两两比较采用LSD-t检验。采用Logistic回归分析患者预后相关因素；P0.05表示差异具有统计学意义。采用Hardy-Weinberg平衡检验对E-selectin基因rs2076059位点3种基因型在患者中的分布进行检验。2 结果2.1 E-selectin基因rs2076059位点基因型分布情况E-selectin基因rs2076059位点3种基因型GG、GA、AA的期望值和观测值均符合 Hardy-Weinberg 平衡定律（2=4.166，P=0.125），基因型和等位基因分布情况见表1。2.2 患者围手术期情况268例患者术中穿刺至预设位置均成功，术后第1天和第3天血肿清除率分别为（89.2610.14）%和（94.2512.03）%，术后无发生再出血，围手术期并发症颅内感染、肺部感染例数分别有1例和10例。2.3 E-selectin基因rs2076059位点基因型与患者术后预后的关系268例患者术后3个月预后良好238 例，预后不良30 例。rs2076059位点不同基因型患者的术后预后差异有统计学意义（P0.05），其中GG基因型应答率明显高于GA、AA基因型（P0.05），见表2。2.4 不同预后患者基线资料比较及单因素分析术后3个月预后良好组和预后不良组患者的出血部位、出血量、是否破入脑室、分型以及GCS评分差异均有统计学意义（均P0.05），见表3。2.5 影响患者术后预后因素的多因素分析以患者预后情况（不良=1，良好=0）为因变量，以出血部位（丘脑后部=0，丘脑外部=1，丘脑前部=2，丘脑内侧=3）、出血量、分型（局限型=0，丘脑基底节型=1，丘脑脑室型=2）、GCS评分以及E-selectin基因rs2076059位点（GG=0，GA=1，AA=2）为自变量进行Logistic回归分析，其中出血量、GCS评分以实际值进行赋值。Logistic回归分析结果显示，出血部位、出血量、是否破入脑室、分型、GCS评分以及E-selectin基因rs2076059位点是影响患者术后预后的独立危险因素（P20 mL，意识障碍情况较为严重14。因此临床上需要对患者的丘脑出血部位以及分型明确后，予以个性化治疗方案以强化治疗效果。患者出血量、GCS评分以及是否破入脑室均与患者的病情严重情况相关，病情越重，患者恢复越难，预后越差15。E-selectin属于一种重要的促炎因子，在多种细胞如粒细胞、巨噬细胞、单核细胞粘附和聚集过程中发挥重要参与和调节作用。另有研究报道 E-selectin 还可通过参与脂类代谢调节HDL-C、TC以及LD-C等脂质指标水平，已被证实属于脑卒中的一种危险标志物16。E-selectin基因多态性可以介导白细胞扩增至内皮细胞过程，从而造成出血性脑卒中患者脑细胞发生继发性损伤，对患者预后造成影响。本研究进一步从基因多态性角度研究分析，发现E-selectin基因rs2076059位点不同基因型患者的术后预后存在差异（P0.05），其中GG基因型应答率明显高于GA、AA基因型（P0.05），推测丘脑出血患者的E-selectin基因多态性可能与其介导的炎性反应和炎性因子水平之间存在密切联系。综上所述，老年性中等量丘脑出血患者的E-selectin基因rs2076059 位点多态性与患者行3D-slicer辅助下神经内镜血肿清除术预后之间存在显著相关性，其中基因型GG属于保护因素，基因型AA/GA属于独立危险因素；同时出血部位、出血量、是否破入脑室、分型以及GCS评分也会对患者预后产生影响。参考文献1 中华医学会神经外科学分会,中国医师协会急诊医师分会,中华医学会神经病学分会脑血管病学组,等.高血压性脑出血中国多学科诊治指南J.中华神经外科杂志,2020,36:757-770.2 刘宇,李振.丘脑出血继发脑室内出血的诊断和治疗进展J.中国医师进修杂志,2018,41:655-658.3 彭逸龙,伍益,陈少霭,等.3D-Slicer的虚拟现实技术在神经内镜下经鼻蝶入路垂体瘤手术中的运用J.广东医学,2019,40:246-249.4 Liu LJ,Liu L,Li Y,et al.Ultrasmall superparamagnetic nanoparticlestargeting E-selectin:Synthesis and effects in mice in vitro and in vivoJ.Int J Nanomedicine,2019,14:4517-4528.5 朱友德,文薇,孙明华.丘脑出血的临床及治疗J.国外医学 神经病学神经外科学分册,1995,22:62-65.6 李志强,苗林,任雅盼,等.利用3D Slicer软件辅助定位行高血压脑出血微创穿刺治疗J.中国微创外科杂志,2020,20:608-611.7 伍学斌,康强,李敏,等.3D-Slicer联合sina软件辅助神经内镜微创手术治疗高血压脑出血的疗效观察J.中国脑血管病杂志,2018,15:134-139.8 易袁晶,魏雪利,马明明,等.内皮素-1基因多态性与脑出血的关系及其对血压的影响J.中国神经精神疾病杂志,2019,45:314-317.9 Srivastava K,Chandra S,Narang R,et al.E-selectin gene in essentialhypertension:Acase control studyJ.Eur J Clin Invest,2018,48:C12868.10 吴军,福婷,韩涛,等.炎症因子基因与缺血性脑卒中患者预后的相关性分析J.解放军预防医学杂志,2019,37:42-45,54.11 黄龙,茅国兴.3D slicer软件辅助下微创穿刺联合阿托伐他汀钙治疗高血压脑出血的疗效分析J.中国现代医学杂志,2019,29:118-122.12 罗明,段发亮,吴京雷,等.神经导航结合3D重建技术引导神经内镜颅内血肿清除术经验介绍J.临床神经病学杂志,2018,31:84-85.13 杨利辉,宋纪宁,高海晓,等.神经内镜治疗老年性中等量丘脑出血的研究J.立体定向和功能性神经外科杂志,2017,30:47-48,55.14 王宇,陶英群.小量丘脑出血立体定向微创手术治疗进展J.中国微侵袭神经外科杂志,2019,24:382-384.15 黎学谦,江耿思,陈伟轩,等.基于丘脑血供解剖学的丘脑出血新分型与丘脑出血患者预后的相关性分析J.中国医药科学,2020,10:124-126,153.16 徐黔宁,刘东红,闫李侠,等.可溶性细胞间黏附分子-1和E-选择素水平在急性冠脉综合征心肌梗死患者中的临床意义J.中国卫生检验杂志,2018,28:1212-1213,1217.组别预后良好组预后不良组t/2值P值例数23830性别/（男/女）128/11013/171.1670.280年龄/（岁，xs）69.253.1168.363.021.4820.140出血部位/例（%）丘脑前部（n=62）52（83.87）10（16.13）12.1900.007丘脑内侧（n=58）46（79.31）1