第2期农垦医学第45卷LncRNAPVT1对EIF4A1的表达调控作用及机制研究金迅郭婷婷孙建伟卢雨林王丹君肖冰琪杜诗尧李冬妹(石河子大学新疆地方与民族高发病教育部重点实验室/医学院生化教研室,新疆石河子,832002)【摘要】目的:探讨长链非编码RNA(Longnon-codingRNA,LncRNA)人浆细胞瘤转化迁移基因1(PlasmacytomaVariantTranslocation1,PVT1)对真核翻译起始因子4A1(EukaryoticTranslationInitiationFactor4A1,EIF4A1)可能的表达调控作用及机制。方法:通过对MGC-803细胞PVT1基因的表达进行干扰,对其干扰效果进行了鉴定,然后利用realtime-PCR和WesternBlot技术对EIF4A1基因mRNA、蛋白水平进行了测定;利用LncBasePredictedv.2预测PVT1作为分子海绵在分子上吸附的miRNA;然后用TargetScan和miRTarBase对调控EIF4A1表达的miRNA进行预测,结合两者结果得出中介miRNA;进一步通过LncBasePredictedv.2寻找PVT1与候选miRNA结合位点,并通过GEO数据库说明候选miRNA在胃癌中的表达情况;最后从干扰PVT1表达的细胞中通过realtime-PCR技术测定候选miRNA的水平。结果:在胃癌细胞MGC-803中成功抑制了PVT1表达。在PVT1表达下调的胃癌细胞中EIF4A1的mRNA和蛋白质的表达水平均下调(<0.05);通过LncBasePredictedv.2预测出277个PVT1可能结合吸附的miRNA;TargetScan和miRTarBase数据库预测出12个可能调控EIF4A1的miRNA;两者结果取交集,发现miR-493-3p可能为PVT1吸附降低的miRNA,且miR-493-3p可能下调EIF4A1的水平;通过LncBasePredictedv.2预测出PVT1与miR-493-3p的结合位点位于染色体的8:128048475-128048492;通过GEO数据库发现miR-493-3p在胃癌组织中处于表达下调状态。Real-timePCR结果显示PVT1水平降低后miR-493-3p水平有所增加(<0.05)。结论:LncRNAPVT1可通过吸附降低miR-493-3p水平而正向调控EIF4A1的表达,miR-493-3p是PVT1调节EIF4A1表达的关键中间分子,为PVT1在胃癌中的作用机制提供线索。【关键词】胃癌;PVT1;EIF4A1;miR-493-3p中图分类号:R735.2文献标识码:ARegulationandMechanismofLncRNAPVT1onEIF4A1ExpressionJINXun,GUOTing-ting,SUNJian-wei,LUYu-lin,WANGDan-jun,XIAOBing-qi,DUShi-yao,LIDong-mei(KeyLaboratoryofXinjiangEndemicandEthnicDisease,ShiheziUniversitySchoolofMedicine,XinjiangShihezi,832002)【Abstract】Objective:ToexploretheroleandmechanismofLongnon-codingRNA(LncRNA)plasmacytomavarian...