CENPN对头颈鳞状细胞癌患者预后的预测价值研究.pdf

C E N P N对头颈鳞状细胞癌患者预后的预测价值研究陈河林1,2 舒佳玉1 董强2*1.贵州医科大学口腔医学院 贵州 贵阳 5 5 0 0 0 4;2.贵州医科大学附属口腔医院修复种植科 贵州 贵阳 5 5 0 0 0 4 摘要 目的:探讨C E N P N在头颈鳞状细胞癌(h e a d a n d n e c k s q u a m o u s c e l l c a r c i n o m a,HN S C C)中的表达和其对预后的影响。方法:通过T C G A数据库检索C E N P N在HN S C C中的表达水平。选取贵州医科大学附属口腔医院2 0 1 82 0 2 0年收治的4 2例HN S C C患者癌组织标本,采用免疫组织化学法检测C E N P N的表达,分析C E N P N与HN S C C患者临床病理特征和预后的关系。结果:C E N P N在HN S C C中表达上调,差异有统计学意义(P0.0 5)。C E N P N高表达与HN S C C患者病理分级密切相关(P0.0 5)。单因素和多因素回归分析结果显示,年龄、T分类和C E N P N高表达是HN S C C的独立预后影响因素。K a p l a n-M e i e r曲线分析表明C E N P N高表达患者总体生存率更低(P 0.0 5)。结论:C E N P N在HN S C C中表达上调,可作为独立生物学标志物预测HN S C C患者预后。关键词 C E N P N;头颈鳞状细胞癌;预后 文献标识码 A 文章编号 1 6 7 17 6 5 1(2 0 2 3)0 80 6 9 00 6d o i 1 0.1 3 7 0 1/j.c n k i.k q y x y j.2 0 2 3.0 8.0 0 6S t u d y o n P r o g n o s t i c V a l u e o f C E N P N i n H e a d a n d N e c k S q u a m o u s C e l l C a r c i n o m a.CHEN H e l i n1,2,SHU J i a y u1,D ONG Q i a n g2*.1.S c h o o l o f S t o m a t o l o g y,G u i z h o u M e d i c a l U n i v e r s i t y,G u i y a n g 5 5 0 0 0 4,C h i n a;2.D e p a r t-m e n t o f P r o s t h e t i c s a n d I mp l a n t,S t o m a t o l o g i c a l H o s p i t a l o f G u i z h o u M e d i c a l U n i v e r s i t y,G u i y a n g 5 5 0 0 0 4,C h i n a.A b s t r a c t O b j e c t i v e:T o i n v e s t i g a t e t h e e x p r e s s i o n a n d p r o g n o s t i c v a l u e o f C E N P N i n h e a d a n d n e c k s q u a m o u s c e l l c a r c i n o m a(HN S C C).M e t h o d s:T h e e x p r e s s i o n l e v e l o f C E N P N i n HN S C C w a s e v a l u a t e d i n T C GA d a t a b a s e.F o r t y-t w o c a n c e r t i s s u e s r e s e c t e d f r o m HN S C C p a t i e n t s w h o a d m i t t e d t o t h e S t o m a t o l o g i c a l H o s p i t a l o f G u i z h o u M e d i c a l U n i v e r s i t y w e r e c h o s e n t o m e a s u r e C E N P N e x p r e s s i o n b y i mm u n o h i s t o c h e m i s t r y.T h e r e l a t i o n s h i p b e t w e e n C E N P N a n d c l i n i c o p a t h o l o g i c f e a t u r e a s w e l l a s p r o g n o s i s w a s a n a l y z e d.R e s u l t s:T h e e x p r e s s i o n l e v e l o f C E N P N w a s s i g n i f i c a n t l y u p-r e g u l a t e d i n HN S C C(P0.0 5).H i g h e x p r e s s i o n o f C E N P N w a s a s s o c i a t e d w i t h p a t h o l o g i c a l g r a d e.U n i v a r i a t e a n d m u l t i v a r i a t e r e g r e s s i o n a n a l y s i s d e m o n s t r a t e d t h a t a g e,T s t a g e,a n d h i g h e x p r e s s i o n o f C E N-P N w e r e i n d e p e n d e n t p r o g n o s t i c f a c t o r s i n HN S C C.K a p l a n-M e i e r a n a l y s i s s h o w e d t h a t h i g h e r e x p r e s s i o n o f C E N-P N w a s a s s o c i a t e d w i t h l o w e r o v e r a l l s u r v i v a l r a t e(P0.0 5).C o n c l u s i o n:C E N P N w a s u p-r e g u l a t e d i n HN S C C a n d c o u l d b e a n i n d e p e n d e n t p r o g n o s t i c b i o m a r k e r.K e y w o r d s C E N P N;h e a d a n d n e c k s q u a m o u s c e l l c a r c i n o m a;p r o g n o s i s 头颈鳞状细胞癌(h e a d a n d n e c k s q u a m o u s c e l l c a r c i n o m a,HN S C C)是头颈部最常见的恶性肿瘤,约占头颈恶性肿瘤的9 0%1,且在某些地区其发病率有升高趋势2。目前,HN S C C的治疗仍以手术切除、放疗和化疗为主,但对于临床分期晚期的病人基金项目 国家自然科学基金地区项目(编号:8 2 1 6 0 1 8 6)贵州省科技 厅计划项目(黔 科 合 基 础-Z K2 0 2 1 一 般4 3 3)作者简介 陈河林(1 9 9 0),男,湖北恩施人,博士,主要从事口腔医学相关研究工作。*通信作者 董强,E-m a i l:7 9 1 4 0 0 8 0 4q q.c o m治疗效果欠佳,远期生存率较低2。一些基因的异常表达对HN S C C的发生和发展至关重要3。因此,筛选出明显异常表达的基因对HN S C C的精准治疗非常有必要。着 丝 粒 蛋 白 家 族(c e n t r o m e t r i c p r o t e i n s,C E N P s)包含1 8个蛋白亚型,在细胞有丝分裂期间与着丝粒染色质动态结合和分离,精准调控细胞有丝分裂4。C E N P N是着丝粒蛋白家族成员之一,在细胞分裂S期与着丝粒结合,在G 2期与其分开5。近年来,关于C E N P N与肿瘤进展和复发关系的研究逐渐增多。Z h e n g等6发现在肺腺癌中096J o u r n a l o f O r a l S c i e n c e R e s e a r c h,A u g.2 0 2 3,V o l.3 9,N o.8 C E N P N高 表 达,且 高 表 达 的C E N P N可 激 活P I 3 K/AK T信号通路增强肿瘤细胞的侵袭能力。另外,有研究者证实在乳腺癌中C E N P N参与肿瘤的进展过程7。通过生物信息学分析,C E N P N可作为胶质瘤细胞恶变以及肝癌和结直肠癌预后的生物标志物8-1 0。在HN S C C中,敲除C E N P N可使癌症细胞停留在有丝分裂G 1期,从而抑制细胞增殖1 1。但是,C E N P N在HN S C C中的诊断和治疗价值还不清楚。本研究通过T C GA数据库分析C E N P N基因表达水平,并结合临床患者随访情况,探讨C E N P N与HN S C C患者预后的关系。1 材料与方法1.1 数据来源 从T C GA数据库(h t t p s:/p o r-t a l.g d c.c a n c e r.g o v/)中下载数据集,其中HN S C C组5 0 2例,正常组4 4例。并收集2 0 1 82 0 2 0年我院4 2例HN S C C患者纳入研究。纳入标准:(1)肿瘤发生部位在口腔颌面部和咽喉部,包括喉、舌、牙龈、颊黏膜、腭部、口底、唇、口咽和上颌窦;(2)年龄满1 8岁;(3)病理学诊断为鳞状细胞癌;(4)术前未接受过手术治疗、放疗、化疗和免疫治疗。排除标准:(1)其他部位有肿瘤;(2)心、肺、肾等重要脏器有严重病变。本研究经贵州医科大学附属口腔医院医学管理伦理委员会批准(2 0 2 2伦审第6 6号),所有研究对象签署知情同意书。1.2 试剂和仪器 兔抗人C E N P N多克隆抗体(A b c a m);山羊抗兔抗体(北京博奥森生物技术有限公司);免疫组化试剂盒(S i g m a);光学显微镜(O-l y m p u s)等。1.3 免疫组织化学染色 组织切片由我院病理科制作,切片后在拷片机中烘烤3 0 m i n,并进行脱蜡。采用抗原修复缓冲液修复抗原,室温下山羊血清封闭1 0 m i n,加入C E N P N(11 0 0 0)孵育,4 过夜。P B S洗涤后采用山羊抗兔抗体孵育3 0 m i n,P B S洗涤,滴加辣根过氧化物酶标记链酶卵白素工作液孵育1 0 m i n,P B S洗涤,D A B显色剂显色,封片。在光学显微镜下采集图片。1.4 统计学分析 统计分析使用R软件完成。C E N P N差 异 表 达 使 用“t i d y v e r s e”、“g g p l o t 2”、“r e s h a p e 2”、“c a r”、“r s t a i x”数据包分析;单因素和多因素回归分析使用“t i d y v e r s e”、“s u r v i v a l”、“r e a d x l”数据包。以P6 0岁2 5 75 1.1性别 女1 3 42 6.7 男3 6 87 3.3吸烟 否1 1 12 2.6 是3