第49卷第4期2023年7月吉林大学学报（医学版）JournalofJilinUniversity（MedicineEdition）Vol.49No.4Jul.2023DOI：10.13481/j.1671‐587X.20230414PMS2通过ERK/ERCC1通路对结肠癌SW480细胞生物学行为的影响黄雪茹1,丁绪浩1,陈素贤2,谭琦2,吴月明3,牛晓敏1,王亚帝4,佟青1（1.锦州医科大学附属第三医院临床检验诊断学教研室，辽宁锦州121000；2.锦州医科大学附属第三医院病理科，辽宁锦州121000；3.锦州医科大学附属第三医院肿瘤二科，辽宁锦州121000；4.锦州医科大学附属第三医院精准医学中心，辽宁锦州121000）［摘要］目的目的：探讨减数分裂后分离蛋白2（PMS2）表达对结肠癌SW480细胞生物学行为的影响，阐明PMS2与切除修复交叉互补组1（ERCC1）和细胞外调节蛋白激酶（ERK）信号转导通路的关系。方法方法：将PMS2siRNA质粒和PMS2过表达质粒分别转染入结肠癌SW480细胞（分别为PMS2敲减组和PMS2过表达组），同时设PMS2敲减对照组（siRNA-NC组）和PMS2过表达对照组（PMS2control组）。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组细胞中PMS2mRNA表达水平，Westernblotting法检测各组细胞中PMS2蛋白表达水平，CCK-8法检测各组细胞增殖活性，细胞划痕实验检测各组细胞迁移率，Transwell小室实验检测各组细胞中侵袭细胞数，流式细胞术检测顺铂作用后各组细胞凋亡率。通过String数据库，对PMS2、ERCC1和ERK上下游蛋白的关系进行生物信息学分析。SW480细胞分别采用3条siRNA进行PMS2和ERCC1敲减，采用RT-qPCR法验证PMS2与ERCC1的相互作用，采用Westernblotting法检测各组细胞中PMS2、细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）和磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）蛋白表达水平。结果结果：RT-qPCR法和Westernblotting法检测，PMS2基因敲减和过表达细胞模型构建成功。与siRNA-NC组比较，PMS2敲减组细胞增殖活性和细胞迁移率明显升高（P<0.05或P<0.01），侵袭细胞数明显增加（P<0.01），顺铂作用后细胞凋亡率明显降低（P<0.01）；与PMS2control组比较，PMS2过表达组细胞增殖活性和细胞迁移率明显降低（P<0.01），侵袭细胞数明显减少（P<0.01），顺铂作用后细胞凋亡率明显升高（P<0.01）。蛋白-蛋白互作（PPI）富集P值为2.09e-07，包含ERCC1和ERK1/2等相互作用节点数共有13个，提示PMS2、ERCC1和ERK1/2之间可能存在调控作用。与siRNA-NC组比较，各PMS2敲减组细胞中ERCC1mRNA表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）；与siERCC1-NC组比较，各ERCC1敲减组细胞中PMS2mRNA表达水平差异无...
