不同溶剂提取对刺梨物质含量变化及抗氧化活性的影响.pdf

食品研究与开发圆园23 年 9 月第 44 卷第 17 期DOI：10.12161/j.issn.1005-6521.2023.17.011作者简介：穆兴燕（1996），女（汉），硕士研究生，研究方向：食品工程。*通信作者：刘晓燕（1972），女（汉），教授，硕士，研究方向：食品化学、烘培加工工艺。不同溶剂提取对刺梨物质含量变化及抗氧化活性的影响穆兴燕1，吴胜1，郭银萍1，刘含1，徐菁1，刘晓燕1，2*（1.贵阳学院 食品与制药工程学院，贵州 贵阳 550005；2.贵州省果品加工工程技术研究中心，贵州 贵阳550005）摘要：为探究不同极性的溶剂提取对刺梨物质含量变化及抗氧化活性的影响，分别以水、甲醇、60%乙醇、无水乙醇、正丁醇和乙酸乙酯为提取溶剂，通过测定提取物中抗坏血酸、总多酚、总黄酮、单宁和总三萜含量，采用体外抗氧化方法对刺梨不同溶剂提取物进行抗氧化活性测定，并采用抗氧化活性综合（antioxidant potency composite，APC）指数法进行比较分析。结果表明：60%乙醇提取物中总多酚、总黄酮、单宁和总三萜含量最高；水提取物中抗坏血酸含量最高；乙酸乙酯提取物中总多酚、总黄酮、抗坏血酸和总三萜含量最低；正丁醇提取物中单宁含量最低。对抗氧化活性而言，60%乙醇提取物清除 DPPH 自由基与 ABTS+自由基能力和还原力最强；甲醇提取物的羟基自由基清除率最高；乙酸乙酯提取物清除超氧阴离子自由基的能力最强。APC 指数显示，6 种溶剂提取物的抗氧化能力由强到弱依次为60%乙醇提取物跃甲醇提取物跃水提取物跃无水乙醇提取物跃乙酸乙酯提取物跃正丁醇提取物。由于不同活性成分之间存在协同或拮抗作用，且不同活性成分在不同溶剂中的溶解性不同，因此不同溶剂提取对刺梨活性物质含量和抗氧化活性影响较大。关键词：刺梨；提取物；生物活性成分；活性物质；抗氧化Effects of Different Solvents on Active Component Content and Antioxidant Activity ofRosa roxburghii Tratt ExtractMU Xingyan1，WU Sheng1，GUO Yinping1，LIU Han1，XU Jing1，LIU Xiaoyan1，2*（1.Food and Pharmaceutical Engineering Institute，Guiyang University，Guiyang 550005，Guizhou，China；2.Guizhou Engineering Research Center for Fruit Processing，Guiyang 550005，Guizhou，China）粤遭泽贼则葬糟贼：Rosa roxburghii Tratt was extracted with different solvents including water，methanol，60%ethanol，anhydrous ethanol，n-butanol，and ethyl acetate.The content of vitamin C（VC），total polyphenols，total flavo-noids，tannins，andtotaltriterpenoids inthe extracts was determined.The antioxidant activity antioxidant potencycomposite（APC）in vitro was evaluated for different extracts.The results showed that the content of total polyph-enols，total flavonoids，tannins，and total triterpenoids was the highest in the 60%ethanol extract and that of VCin the water extract.The content of total flavonoids，VC，and total triterpenoids was the lowest in ethyl acetateextract and that of tannins in n-butanol extract.The 60%ethanol extract showed the strongest DPPH and ABTSradical scavenging activities and reducing power.The methanol extract and ethyl acetate extract showed thestrongest hydroxyl and superoxide anion radical scavenging activities，respectively.According to APC，theantioxidant activity was in a descending order of 60%ethanol extract methanol extract water extract anhydrous ethanol extract ethyl acetate extract n-butanol extract.Because of the synergistic or antagonisticeffects between different active components and the varied solubility of different active components in differentsolvents，different solvents have great impacts on the active component content and antioxidant activity of R.roxburghiiextract.运藻赠 憎燥则凿泽：Rosaroxburghii Tratt；extract；bioactive ingredients；active components；antioxidant基础研究68食品研究与开发圆园23 年 9 月第 44 卷第 17 期刺梨（Rosa roxburghii Tratt）又叫山王果、刺莓果等，多种植于云贵高原、四川西部高原等地区。刺梨含有丰富的维生素 C、黄酮、多酚、单宁、三萜等有益于人体健康的营养成分1，因其维生素 C 含量十分丰富，故被誉为“VC之王”。同时，刺梨具有极高的药用价值，其花、叶、果、籽均可作为药物使用，不仅具有解酒2、抗炎3、提高免疫力、抗氧化4等功能，还可以降血糖5-6、降血脂7-8、抗突变、抗肿瘤9、改善糖尿病炎症10、抗衰老11等。目前，对刺梨活性成分进行提取、分离、纯化的研究较多，常用的提取溶剂有水、乙醇、甲醇等12，但不同溶剂提取对刺梨活性物质含量变化及抗氧化活性影响的研究鲜有报道。赵玉红等13研究发现，采用不同浓度乙醇提取“鲁赫”刺蔷薇叶时，60%乙醇提取效果显著优于其他浓度乙醇。因刺梨的活性成分十分丰富，故本试验采用强极性及中等极性的溶剂进行提取比较。以水、甲醇、60%乙醇、无水乙醇、正丁醇和乙酸乙酯为溶剂，通过对刺梨提取物中的活性物质含量和抗氧化活性进行测定分析，以便后期为刺梨资源的加工利用提供参考。1材料与方法1.1材料与试剂刺梨：产自贵州省龙里县；没食子酸标准品（99%）：上海阿拉丁生化科技股份有限公司；芦丁标准品（逸98%）、1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（1，1-diphe-nyl-2-picrylhydrazyl radical，DPPH）：上海源叶生物科技有限公司；2，2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二胺盐 2，2-azinobis-（3-ethylbenzthiazoline-6-sulph onate，ABTS）：合肥博美生物科技有限责任公司；单宁酸标准品（逸98%）：北京索莱宝科技有限公司；熊果酸标准品（93%）：上海麦克林生化科技有限公司；福林酚试剂：国药集团化学试剂有限公司；甲醇、无水乙醇、正丁醇：天津市富宇精细化工有限公司；乙酸乙酯：天津市风船化学试剂科技有限公司；以上试剂均为分析纯。1.2仪器与设备高速多功能粉碎机（CS-2000）：永康市天祺盛世工贸有限公司；高功率数控超声波清洗器（KQ-400KDE）：昆山市超声仪器有限公司；旋转蒸发仪（N-1300）：上海爱朗仪器有限公司；紫外可见分光光度计（i3）：济南海能仪器股份有限公司；全波长酶标仪（MultiskanSKY）：赛默飞世尔科技（中国）有限公司。1.3试验方法1.3.1刺梨提取物的制备将刺梨洗净、切片、去籽、烘干至恒重，粉碎过筛，各准确称取 50 g 刺梨干粉于 6 个锥形瓶中，分别加入水、甲醇、60%乙醇、无水乙醇、正丁醇和乙酸乙酯以料液比 1 颐 10、1 颐 8、1 颐 6（g/mL）提取 3 次，45 益水浴浸泡2 h，于 45 益、200 W 超声辅助提取 30 min，抽滤后合并3 次滤液，减压浓缩，加入纯净水将水提物溶解定容至100 mL，其他提取物用 60%乙醇溶解定容至 100 mL，用 10 mL 离心管分装好后，储存于-20 益冰箱备用。1.3.2不同溶剂提取物含量测定1.3.2.1刺梨提取物中抗坏血酸含量的测定参照曹建康等14的方法进行测定。结果以每克干粉中含有的抗坏血酸质量表示，即 mg/g 干粉。1.3.2.2刺梨提取物中总多酚含量的测定参照王慧竹15的方法进行测定。以没食子酸标准品作标准曲线，回归方程为 Y=126.83X+0.015 5（R2=0.999 8）。结果以每克刺梨干粉中所含没食子酸当量（mg/g 干粉）表示。1.3.2.3刺梨提取物中总黄酮含量的测定参照连紫凌等16的方法进行测定。以芦丁标准品作标准曲线，回归方程为 Y=10.839X-0.013 3（R2=0.999 3）。结果以每克刺梨干粉中所含芦丁当量（mg/g干粉）表示。1.3.2.4刺梨提取物中单宁含量的测定参照李志等17的方法进行测定。以单宁酸标准品作标准曲线，回归方程为 Y=67.03X-0.024 9（R2=0.997 4）。结果以每克刺梨干粉中所含单宁酸当量（mg/g 干粉）表示。1.3.2.5刺梨总三萜含量的测定参照张雁冰等18和代甜甜等19的方法进行测定。以熊果酸标准品作标准曲线，回归方程为 Y=3.991 4X-0.047 6（R2=0.998 4）。结果以每克刺梨干粉中所含熊果酸当量（mg/g 干粉）表示。1.3.3不同溶剂提取物抗氧化活性测定1.3.3.1DPPH 自由基清除率的测定参照汪洋等20的方法，稍作修改，分别配制浓度引文格式：穆兴燕，吴胜，郭银萍，等.不同溶剂提取对刺梨物质含量变化及抗氧化活性的影响J.食品研究与开发，2023，44（17）：68-75.MU Xingyan，WU Sheng，GUO Yinping，et al.Effects of Different Solvents on Active Component Content and AntioxidantActivityofRosaroxburghiiTrattExtractJ.Food Research and Development，2023，44（17）：68-75.基础研究69食品研究与开发圆园23 年 9 月第 44 卷第 17 期为 0.04、0.08、0.12、0.16、0.20 mg/mL 的刺梨不同溶剂提取物，吸取处理好的刺梨提取物各 100 滋L，与等量0.2 mmol/L DPPH 乙醇溶液混匀后，暗反应 30 min，于517 nm 处测定吸光值 A1。分别用等量无水乙醇代替样品和 DP