不同池塘混养品种对拟穴青蟹生长、体成分和免疫性能的影响.pdf

第36卷第5期,2023年9月 宁 波 大 学 学 报（理 工 版）中国科技核心期刊 Vol.36 No.5,Sep.2023 JOURNAL OF NINGBO UNIVERSITY(NSEE)中国高校优秀科技期刊 DOI:10.20098/ki.1001-5132.2023.0109 不同池塘混养品种对拟穴青蟹生长、体成分和免疫性能的影响 周冬平1,刘 磊1*,方 伟1,黄辛联1,付媛媛2,徐永健1,王春琳1（1.宁波大学 海洋学院,浙江 宁波 315832;2.宁波海洋研究院,浙江 宁波 315832）摘要:为探讨不同混养品种对拟穴青蟹(Scylla paramamosain)生长、体成分、免疫性能及水质的影响,分别设置拟穴青蟹单养、拟穴青蟹-日本对虾(Penaeus japonicus)、拟穴青蟹-日本真鲈(Lateolabrax japonicus)和拟穴青蟹-方形马珂蛤(Mactra veneriformis)4 种养殖方式,开展 90d 的养殖试验.结果显示:各组盐度在同一采样时间点均无显著差异;拟穴青蟹-日本对虾组和拟穴青蟹-日本真鲈组的池塘水体 pH 在第 60、90d 显著高于其他组(P0.05),氨氮在同一采样时间点均显著高于其他组(P0.05);拟穴青蟹单养组溶解氧在所有时间点均显著高于其他组(P0.05);拟穴青蟹-日本真鲈组亚硝酸盐氮、硫化物在所有时间点均显著高于其他组(P0.05);拟穴青蟹-方形马珂蛤组和拟穴青蟹单养组体质量、甲宽在第 90d 显著高于其他组(P0.05),甲长、体高在第 60、90d 显著高于其他组(P0.05),增重率、特定生长率在第 60、90d 显著高于其他组(P0.05),肌肉水分、灰分、粗蛋白在各采样时间点均显著高于其他组(P0.05),且存活率、平均产量均显著高于其他组(P0.05);拟穴青蟹-方形马珂蛤组肝胰腺粗蛋白在各采样时间点显著高于其他组(P0.05),肝胰腺粗脂肪在第 60、90d 显著高于其他组(P0.05),血淋巴酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)在各采样时间点均显著高于其他组(P0.05);拟穴青蟹-日本真鲈组血淋巴谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)在第 30d 显著高于其他组(P0.05).表明从拟穴青蟹生长、营养品质、免疫性能综合考虑,拟穴青蟹与方形马珂蛤混养效果最佳.关键词:拟穴青蟹;混养;水质;生长;体成分;免疫功能 中图分类号:S968.25 文献标志码:A 文章编号:1001-5132（2023）05-0097-10 拟穴青蟹(Scylla paramamosain)隶属于甲壳纲(Crustacea)、十足目(Decapoda)、梭子蟹科(Portunidae)、青蟹属(Scylla),主要分布于印度洋、日本、南非、东南亚各国和我国东南沿海等地区1-4.近30年来,拟穴青蟹养殖在我国南方沿海地区发展迅猛5,但是产量仍无法满足日益增长的市场需求,价格居高不下6.鉴于南方沿海地区拟穴青蟹养殖容量接近饱和,急需开拓新的养殖区域.江苏、山东等长江以北沿海地区水源充沛、气候适宜、饵料充足,适合拟穴青蟹的养殖7-8.其中山东东营市的黄河三角洲东临渤海,是中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)和三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)的重要养殖区域9-12,也是拟穴青蟹推广养殖的首选地13-14.但是目前尚缺乏适用于北方环境条件下的拟穴青蟹养殖技术与模式.目前,拟穴青蟹的养殖方式包括池塘养殖(混养、单养)、笼养以及室内工厂化养殖等15-16,其中池塘混养是我国拟穴青蟹的主要养殖方式17.有研究表明18-22,养殖方式会影响水产动物的生长、营养品质与免疫功能,进而影响水产动物的健康状况.因此,探讨不同养殖方式对拟穴青蟹生长、体成分与免疫性能的影响具有重要意义.收稿日期:20230127.宁波大学学报（理工版）网址:http:/ 98 宁波大学学报（理工版）2023 本研究以黄河三角洲地区池塘为养殖实验场地,选用池塘混养方式,分别设置了适应北方地区养殖的日本对虾(P.japonicus)、日本真鲈(L.japonicus)和方形马珂蛤(M.veneriformis)与拟穴青蟹混养,比较分析 4 种养殖方式对拟穴青蟹生长、体成分及免疫性能的影响,以期为黄河三角洲地区拟穴青蟹的养殖提供技术支撑.1 材料与方法材料与方法 1.1 试验池塘试验池塘 试验于 2021 年 5 月 1 日至 7 月 29 日在东营市海跃水产科技有限公司室外养殖土池进行.试验海水池塘共 12 口,呈长方形,每口池塘面积为3335 m2,水深 1.6 m.池塘呈南北走向,一字型排列,南边为进水口,北边为排水口,进排水口围网使用 120 目过滤筛网.1.2 苗种来源苗种来源 拟穴青蟹幼蟹一期(C1 期)苗和日本对虾苗购自东营市三角洲养殖繁育有限公司,日本真鲈苗购自山东稷鑫水产养殖有限公司,方形马珂蛤苗购自山东华春渔业有限公司.1.3 试验设置与样品采集试验设置与样品采集 试验共设置 4 种养殖方式:拟穴青蟹单养(A组)、拟穴青蟹-日本对虾混养(B 组)、拟穴青蟹-日本真鲈混养(C 组)、拟穴青蟹-方形马珂蛤混养(D组).每组设 3 个重复(一口池塘为一个重复).放苗前使用漂白粉对池塘消毒,并设置塑料薄膜围挡,以防拟穴青蟹逃逸.选取肢体完整、活力好、健康的 C1 期拟穴青蟹幼蟹(0.180.01)g、日本对虾苗(0.900.15)cm、日本真鲈苗(6.300.57)cm 和方形马珂蛤苗(1.800.05)cm.设置拟穴青蟹单养的放养密度 1.5indm2,蟹虾、蟹鱼与蟹贝混养的放养密度 3indm2.放苗时间 2021 年5月 1 日,放苗时各池塘水体盐度 27、水温 18、pH 7.6.拟穴青蟹饵料为宁波天邦饲料科技有限公司生产的人工配合饲料,各组拟穴青蟹的日投喂量按拟穴青蟹体质量的 1015投喂,并随拟穴青蟹生长状态及时调整,每天 8:00 和 17:00 各投喂 1 次;日本对虾的配合饵料为江门市新健饲料有限公司生产,日投喂量为虾体质量的 5,每天 8:00 和 17:00 各投喂1次;日本真鲈配合饵料为福建天马科技集团有限公司生产,日投喂量为鱼体质量的20,每天8:00、12:00、17:00 各投喂 1 次;方形马珂蛤主要摄食水体和底泥中的有机碎屑,养殖期间不投喂.试验期间每隔 30d 采集水样和拟穴青蟹样本,分别在池塘进水口、中部及出水口取样,每个点位取 6 个平行.每隔 30d 在各试验池塘随机捞取 30只拟穴青蟹.将拟穴青蟹放于冰上麻醉,待拟穴青蟹失去知觉后,使用抗凝剂润洗过的 2.0mL 一次性无菌注射器从拟穴青蟹甲壳背部基部刺入心脏,抽取 1.5mL 血淋巴样品.将血淋巴与抗凝剂 1:1 混匀,4下 8000rmin-1离心 10 min,取上清液用于免疫酶活性指标测定.解剖获得肌肉与肝胰腺,经液氮速冻后置于-80 冰箱保存,用于体成分分析.1.4 水质调控水质调控 每隔 710d 更换 1/3 池水,定期使用少量生石灰净化水质,调节 pH.根据天气和养殖动物的摄食和活动情况适时增氧.使用微生态制剂调节水质,如 EM 菌、芽孢杆菌改进剂.1.5 蟹贝混养布局蟹贝混养布局 池塘消毒半月后,暂不进水,将贝苗与底泥混合,再均匀投向池塘底部,贝苗投放后在池底铺设一层 0.8cm0.8cm 隔网.隔网由若干块子网拼接而成,每个子网通过柱桩固定在池塘底部.隔网铺设后再进水,最后投放拟穴青蟹苗.1.6 水质指标测定水质指标测定 采用多功能水质检测仪(山东霍尔德电子科技有限公司)测定养殖水体的盐度、pH 和溶解氧(DO),水体的氨氮(NH4+-N)检测参照 地表水环境质量标准(GB38382002)测定,亚硝酸盐氮(NO2-N)测定采用分光光度法23-24,硫化物检测采用亚甲基蓝分光光度法25.1.7 生长生长、体成分与免疫指标测定体成分与免疫指标测定 用电子天平(广东香山衡器集团股份有限公司)称拟穴青蟹的体质量(精确到 0.01g),用游标卡尺(宁波得力工具有限公司)测量拟穴青蟹的甲宽、甲长、体高等指标.计算拟穴青蟹的增重率、特定生长率和肥满度26-28,计算公式为:fiGRiW=()/100,WWWR%iSGRf=(lnln)/100,WWTR%3fCF=/100,WLR 第 5 期 周冬平,等:不同池塘混养品种对拟穴青蟹生长、体成分和免疫性能的影响 99 式中:RWGR为拟穴青蟹增重率,;Wf为拟穴青蟹最终体质量,g;Wi为拟穴青蟹初始体质量,g;RSGR为拟穴青蟹特定生长率,d1;T 为养殖时间,d;RCF 为拟穴青蟹肥满度,gcm3;L 为拟穴青蟹甲宽,cm.拟穴青蟹肌肉和肝胰腺的水分含量测定参照GB5009.3201629,灰分含量测定参照 GB5009.4 201630,粗蛋白含量测定参照 GB5009.5201631,粗脂肪含量测定参照 GB5009.6201632.血淋巴碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、谷草转氨酶(GOT)以及谷丙转氨酶(GPT)分别采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒测定(按说明书进行操作).1.8 数据分析数据分析 采用 SPSS 19.0 软件进行数据分析,用平均值 标准误表示.用单因素方差分析(one-way ANOVA)以及 Duncans 多重比较进行数据差异的显著性分析,P0.05 为显著差异.采用 GraphPad Prism 9.3.0软件制图.2 结果结果 2.1 混养品种对养殖水体水质的影响混养品种对养殖水体水质的影响 试验结果表明,不同池塘养殖方式不会显著影响水体盐度,但对其他水质指标影响显著(图 1).拟穴青蟹与日本对虾和日本真鲈混养 60d 后会导致水体 pH 显著升高(P0.05),但与方形马珂蛤混养不会显著改变水体的 pH.除了与日本对虾混养第 90d 水体的 DO 水平恢复到拟穴青蟹单养水平,其他 3 种混养方式都显著降低水体的 DO 水平(P 0.05).同样,除了方形马珂蛤与拟穴青蟹混养第60d 与拟穴青蟹单养的水质氨氮水平无显著差异外,注:不同的小写字母表示同一时间点不同试验组之间差异显著(P0.05),下同.图 1 不同混养品种对池塘水质指标的影响 100 宁波大学学报（理工版）2023 其他 3 种混养方式都显著提高了水体的氨氮和亚硝酸盐氮水平(P0.05).此外,日本对虾或日本真鲈混养会显著提高水体的硫化物水平(P0.05),但与方形马珂蛤混养水体的硫化物水平未见显著提高.2.2 混养品种对拟穴青蟹混养品种对拟穴青蟹生长生长指标的影响指标的影响 混养品种对拟穴青蟹生长指标的影响结果见图 2 和表 1.从图 2 可知,各组拟穴青蟹体质量、甲宽、甲长与体高在第 30d 无显著差异,D 组拟穴青蟹体质量、体高在第 90d 显著高于其他组(P 0.05).D 组与 A 组拟穴青蟹的甲宽、甲长在第 60、90d 显著高于其他组(P0.05).从表 1 可知,D 组拟穴青蟹的增重率、特定生长率在第 30d 显著高于其他组(P0.05),同时肥满度在第 60、90d 显著高于其他组(P0.05).D 组与 A 组的增重率、特定生长率在第 60、90d 显著高于其他组(P0.05).2.3 混养品种对拟穴青蟹混养品种对拟穴青蟹体成分体成分的影响的影响 图3和图4为不同混养品种对拟穴青蟹肌肉体成分和肝胰腺体成分的影响.从图 3 可知,D 组拟穴青蟹肌肉水分在同一采样时间点显著高于其他组(P0.05),该组拟穴青蟹水分含量最高,A组拟穴青蟹次之,B 组和 C 组拟穴青蟹水分含量较低.同时,D 组拟穴青蟹与 A 组拟穴青蟹肌肉灰分、粗蛋 图 2 不同混养品种对拟穴青蟹形体学指标的影响 表 1 不同混养品种对拟穴青蟹增重率、特定生长率与肥满度的影响 指标 时间/d A组 B 组 C 组 D 组 增重率/%30 62.671.53a 60.671.53a