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动物营养学报，（）：单月桂酸甘油酯对麻黄仔鸡生长性能、免疫性能和肠道发育的影响孟 帅 王 宏 吴春桃 李大刚 谢小玲（暨南大学生命科学技术学院，广州；广东省农业科学院动物科学研究所，广州；广州市凯闻食品发展有限公司，广州）摘 要：本试验旨在研究饲粮添加 单月桂酸甘油酯（）对麻黄仔鸡生长性能、免疫性能和肠道发育的影响。选取健康状态良好的 日龄麻黄母仔鸡 只，按照体重相近原则分为 组，每组 个重复，每个重复 只。对照组饲喂基础饲粮，试验组分别在基础饲粮中添加、。试验期 。结果表明：）与对照组相比，饲粮添加 、可显著提高麻黄仔鸡的平均日增重（），显著降低料重比（）。）与对照组相比，饲粮添加 、可显著降低麻黄仔鸡血清谷丙转氨酶活性（），提高血清免疫球蛋白（）和免疫球蛋白（）含量（）。）与对照组相比，饲粮添加、可显著提高麻黄仔鸡空肠紧密连接蛋白闭锁小带蛋白（）、闭锁蛋白（）表达量（）；饲粮添加 可极显著上调麻黄仔鸡空肠紧密连接蛋白、表达量（），并显著提高绒毛高度和绒隐比（）。综上所述，饲粮添加 可显著提高麻黄仔鸡的生长性能、促进肠道屏障发育、提高机体免疫力。结合各项指标，推荐在 日龄的麻黄仔鸡饲粮中添加 的。关键词：单月桂酸甘油酯；麻黄仔鸡；生长性能；免疫性能；肠道结构中图分类号：文献标识码：文章编号：（）收稿日期：作者简介：孟 帅（），男，山东潍坊人，硕士研究生，生物化学与分子生物学专业。：通信作者：李大刚，副研究员，硕士生导师，：单月桂酸甘油酯（），又名十二酸单甘油酯（），是一种中链脂肪酸酯。研究发现，中链脂肪酸（）和甘油单酯可以快速供能，且几乎不参与脂肪酸的从头合成，故在体内很少沉积形成脂肪，从而能更有效地改善动物的肉品质，提高经济性能。具有免疫调节特性，有助于减轻肠道炎症、调节肠道免疫和抗氧化平衡、改善肠道形态和屏障功能等，。此外，和甘油单酯具有破坏磷脂膜的独特机制，对多种病原体（包括革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌、包膜病毒、藻类、真菌和原生动物）表现出有效的抑制活性。一般来说，癸酸（）和月桂酸（）在脂肪酸中表现出最高的效力，且具有等效链长的相应甘油单酯通常更有效。近年来研究表明，在提高肉鸡生长性能、饲料转化率、鸡肉营养品质及抗病能力等方面具有积极作用，。等发现，在饲粮中添加 可以显著降低肉鸡感染球虫和细菌的几率，并显著降低胸肌系水力，改善肉鸡的肉品质。刘梦芸研究表明，在饲粮中添加 的 可以显著提高肉鸡的饲料转化率，显著提高鸡胸肉中必需脂肪酸、多不饱和脂肪酸的比例等，对提高肉鸡生长性能、消化能力和鸡肉营养品质具有积极的作用。除此之外，针对 对麻黄肉鸡影响的系统研究较少，而且 对雏鸡肠道发育的研究也较为缺 期孟 帅等：单月桂酸甘油酯对麻黄仔鸡生长性能、免疫性能和肠道发育的影响乏。因此，本试验通过研究饲粮中添加 对 日龄麻黄仔鸡生长性能、血清生化指标、免疫性能及肠道结构等的影响，为 在优质黄羽肉鸡养殖中的应用提供数据支持。材料与方法 试验材料 本试验所用的 由广州市某食品发展有限公司提供，其有效成分含量。试验设计和饲粮组成 试验动物选用来自中山科朗农业科技股份有限公司科朗麻黄鸡。将健康状态良好的日龄麻黄母仔鸡 只，按照体重相近原则随机分为 组，每组 个重复，每个重复 只。对照组（组）饲喂基础饲粮，低剂量组（组）、中剂量组（组）、高剂量组（组）在基础饲粮中分别添加、。试验期共 。在整个试验过程中，保证自由饮水和采食。严格按照建议执行常规卫生和疫苗接种。试验采用玉米豆粕型基础饲粮，参照鸡饲养标准（）和中国饲料成分及营养价值表（年第 版）进行配制，其组成及营养水平见表。表 基础饲粮组成及营养水平（风干基础）（）原料 含量 营养水平 ）含量 玉米 代谢能 （）豆粕 粗蛋白质 鱼粉 钙 豆油 有效磷 磷酸氢钙 蛋氨酸 石粉 赖氨酸 苏打 蛋氨酸半胱氨酸 食盐 总磷 预混料）合计 ）预混料为每千克饲粮提供 ：，泛酸 ，烟酸 ，叶酸 ，生物素 ，胆碱 ，（），（），（），（），（），（）。）代谢能为计算值，其余均为实测值。，样品采集 在 日龄时（空腹 ）进行采样，每个重复选体重相近的 只肉鸡进行屠宰取样。采样前先称取鸡活重并记录；用采血针于鸡的翼静脉抽取血液，倾斜，静置 ，离心分离血清，保存；将放血后的肉鸡屠宰和剖解，分出胸腺、脾脏，用滤纸擦去血渍，去除脂肪后称重并记录；取鸡的十二指肠、空肠、回肠各一段于 多聚甲醛溶液中固定；取鸡的空肠、回肠各一段，保存，用于后续肠紧密连接蛋白的检测。测定指标及方法 生长性能测定 试验开始与结束时分别以重复为单位称量麻黄仔鸡的体重（初重和末重），计算各组每个重复仔鸡的平均日增重（）。每天记录各组每个重复的采食量，从而计算出 日龄阶段的平均日采食量（）和料重比（）。血清生化指标测定 将收集的血清样本用全自动生化分析仪（，日立公司，日本）进行分析测定，测定指标 有：总 蛋 白（）、白 蛋 白（）、球 蛋 白（）、葡萄糖（）、胆固醇（）、甘油三酯（）、低密度脂蛋白胆固醇（）、高密度脂蛋白胆固醇（）、尿酸（）、肌酐（）含量及谷丙转氨酶（）、谷草转氨酶（）、碱性磷酸酶（）、乳酸脱氢酶（）活性。试剂盒动 物 营 养 学 报 卷购自南京建成生物工程研究所，所有测定程序都严格按照制造商的说明进行。免疫性能测定 利用记录的胸腺、脾脏重量和取样鸡的重量，根据公式免疫器官指数（）免疫器官重（）活鸡体重（）计算免疫器官指数。使用酶标仪（，伯腾仪器有限公司，美国）检测收集的血清样本中的白细胞介素（）、白细胞介素（）、干扰素（）、肿瘤坏死因子（）、免疫球蛋白（）、免疫球蛋白（）含量。检测试剂盒购买自江苏酶免实业有限公司，所有测定程序都严格按照制造商的说明进行。肠道结构分析 小肠形态学分析 十二指肠、空肠、回肠在 多聚甲醛溶液中固定 后脱水并包埋在石蜡中。然后使用切片机切割 厚度的组织切片，固定在载玻片上，并用苏木精和伊红染色。使用奥林巴斯显微镜（，奥林巴斯公司，日本）采集图像，使用 分析软件分析图像。从每个切片中随机选择 根完整的绒毛，测量绒毛高度（）和隐窝深度（），计算绒毛高度与隐窝深度比（绒隐比，）。取 只麻黄仔鸡的平均值进行统计学分析。检测肠道紧密连接蛋白表达 取一部分采集的空肠、回肠样本加入含有蛋白酶抑制剂的 裂解液（，弗德生物科技有 限 公 司，中 国）研 磨 裂 解 ，、离心 取上清，试剂盒测量上清液中总蛋白浓度。每组样品各取 蛋白质进行 聚丙烯酰胺凝胶电泳，然后湿转到聚偏二氟乙烯膜上。将膜放至含吐温 的磷酸盐缓冲液（）配制的 脱脂奶粉中封闭 ，然后一抗（、，亲科生物研究中心有限公司，中国）在 下孵育过夜。一抗孵育完后，用磷酸盐缓冲液洗涤 次，然后用二抗（，美仑生物科技有限公司，中国）室温孵育 。最后，用磷酸盐缓冲液洗涤 次，并使用 蛋白质印迹试剂盒（，美仑生物科技有限公司，中国）显影并拍照。使用 分析软件测量灰度值，数据以各信号密度与内参蛋白磷酸甘油醛脱氢酶（）的密度之比表示，结果由 次重复试验获得。数据统计分析 采用 对数据进行初步处理，采用 软件进行单因子方差分析（），采用 法进行多重比较检验。试验结果以平均值和均值标准误（）表示，以 为差异显著性判断标准。结 果 对麻黄仔鸡生长性能的影响 由表 可知，在 日龄，与 组相比，组末重显著增加了（），平均日增重显著增加了（）；组末重显著增加了（），平均日增重显著增加了 （）。组和 组的末重和平均日增重差异不显著（）。与 组相比，各试验组平均日采食量略有上升，但差异不显著（），但在饲粮中添加 、显著降低 日龄麻黄仔鸡的料重比（）。表 对麻黄仔鸡生长性能的影响 项目组别 值初重 末重 平均日增重 （）平均日采食量 （）料重比 同行数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著（），不同小写字母表示差异显著（）。下表同。，（），（）期孟 帅等：单月桂酸甘油酯对麻黄仔鸡生长性能、免疫性能和肠道发育的影响 对麻黄仔鸡血清生化指标的影响由 表 可 知，与 组 相 比，添 加 可显著提高麻黄仔鸡血清中乳酸脱氢酶活性（），降低了谷丙转氨酶活性（）；组和 组血清中谷丙转氨酶活性也均显著降低（），乳酸脱氢酶活性有所提高但差异不显著（）；其余血清生化指标各组之间无显著差异（）。表 对麻黄仔鸡血清生化指标的影响 项目组别 值总蛋白 （）白蛋白 （）球蛋白 （）葡萄糖 （）胆固醇 （）甘油三酯 （）低密度脂蛋白胆固醇（）高密度脂蛋白胆固醇（）尿酸 （）肌酐 （）谷丙转氨酶 （）谷草转氨酶 （）碱性磷酸酶 （）乳酸脱氢酶 （）对麻黄仔鸡免疫性能的影响 由表 可知，随着 添加量的增加，胸腺指数和脾脏指数逐渐增大，但与 组无显著差异（）。与 组相比，、组血清中 和 的含量均显著提高（），组血清 含量显著降低（）；其余血清细胞因子含量各组间无显著差异（）。表 对麻黄仔鸡免疫性能的影响 项目组别 值胸腺指数 （）脾脏指数 （）肿瘤坏死因子（）干扰素 （）白细胞介素 （）白细胞介素 （）免疫球蛋白 （）免疫球蛋白 （）动 物 营 养 学 报 卷 对麻黄鸡肠道结构的影响 小肠形态肠道 染色切片结果显示（图），随着添加量的增加，肠绒毛的数量和紧密程度有所增加。统计结果表明（图），与 组相比，组空肠的绒毛高度和绒隐比显著提高（）；组空肠的绒毛高度显著提高（），并且空肠绒隐比极显著提高（）；也上调了十二指肠和回肠的绒毛高度和绒隐比，但差异不显著（）。图 日龄麻黄仔鸡十二指肠、空肠和回肠苏木精伊红染色切片 ，：，：。下图同。：，：图 对麻黄仔鸡肠道形态结构的影响 对麻黄仔鸡肠道紧密连接蛋白表达的影响 由图、图 可知，与 组相比，组和 组空肠紧密连接蛋白 和 的表达量显著提高（）；组空肠紧密连接蛋白 和 表达量极显著提 高（）。与 组 相 比，组空肠紧密连接蛋白 表达量存在极显著差异（），组空肠紧密连接蛋白 表达量存在显著差异（）。与 组相比，也上调了回肠紧密连接蛋白 的表达量，但差异不显著（）。期孟 帅等：单月桂酸甘油酯对麻黄仔鸡生长性能、免疫性能和肠道发育的影响 ：闭锁小带蛋白 ；：闭锁蛋白；：紧密连接蛋白；：磷酸甘油醛脱氢酶 。下图同 。图 日龄麻黄仔鸡空肠和回肠紧密连接蛋白 分析 图 日龄麻黄仔鸡空肠和回肠紧密连接蛋白表达水平 讨 论 添加 对麻黄仔鸡生长性能的影响 目前关于 对肉仔鸡生长性能的影响仍存在 争 议。等研 究 显 示，添 加、或 对肉鸡的生长性能无改善作用，但 可增强肉鸡的免疫状态和肠道组织形 态。刘 梦 芸 等研 究 表 明，饲 粮 中 添 加 对肉鸡第 阶段（日龄）的生长性能、消化能力和鸡肉营养成分具有积极作用，如显著提高饲料转化率；显著提高肠段长度（十二指肠、空肠、回肠）、绒毛高度（空肠）和绒隐比（十二指肠和空肠）；显著提高鸡肉中、必需脂肪酸、多不饱和脂肪酸的比例，以及粗蛋白质、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、酪氨酸、鲜味氨基酸和总氨基酸的含量等。但对肉鸡第 阶段（日龄）的各项生长性能无显著影响。汤佳宁研究显示，在 和 日龄时，组（组）、组（组）肉鸡 平 均 日 增 重 均 显 著 高 于 组，并 且 组、组间体重与平均日增重无显著差异。本试验结果表明，饲粮添加 和 可显著提高麻黄仔鸡（日龄）的生长性能和饲料转化率。新孵化雏鸡的消化道尚未成熟，须经历一系列的变化才能高效地消化外源饲料和吸收营养，包括消化酶分泌水平、肠道吸收表面积和营养转运蛋白等，尤其是消化酶分泌不足可能是其生长的限 制 因 素。作 为 一 种 中 链 脂 肪 酸 酯，的酶解过程十分迅速，甚至无需酶解也可被小肠黏膜上皮细胞吸收，从而为肠细胞和中间肝脏代谢提供即时能量。因此，的添加可促进新孵化雏鸡消化道的发育，进而提高肉仔鸡的生长性能。这也解释了在麻黄鸡生长早期，随着 添加量的增加，麻黄仔鸡的生长性能和饲料转化率的提高就越明显。此外，是中动 物 营 养 学 报 卷链脂肪酸及其甘油酯中对致病菌、病毒及寄生虫的活性抑制作用最强的化合物，已被提议作为畜禽营养中促生长的抗生素替代品。添加 对麻黄仔鸡血清生化指标的影响 血清生化指标可反映机体内多