SIK1和miR-1273g-3p在结直肠癌细胞SW480中的表达及临床意义.pdf

基金项目 河南省医学科技攻关计划联合共建项目(编号:)作者单位.郑州大学附属洛阳中心医院 胃肠外科河南 洛阳.新乡医学院 研究生院河南 新乡 作者简介 刘大威()男主治医师硕士通信作者 李朝辉 :.:./.论著 和 在结直肠癌细胞 中的表达及临床意义刘大威夏添明武会斌王云帅孙生安李朝辉摘要目的:探讨 与 在结直肠癌细胞 中表达的相关性分析其与临床预后的关系 方法:分别通过 和 方法检测 和 在人结肠上皮细胞 和结直肠癌细胞 中的表达情况将 抑制剂转染(抑制剂组)并设立空载对照(抑制剂对照组)采用免疫印迹实验验证 与 的相关性 采用免疫组化法检测 在结直肠癌组织及癌旁组织中的表达水平分析 与结直肠癌()患者临床病理特征间的关系采用 曲线分析生存预后采用 比例风险回归模型进行单因素及多因素分析 结果:与 细胞相比 细胞中 呈高表达()呈低表达(.)与抑制剂对照组相比抑制剂组中 的表达降低()抑制 的表达后 的表达升高差异有统计学意义(.)免疫组化结果显示 在结直肠癌组织中的表达水平低于癌旁组织差异有统计学意义(.)的表达与肿瘤大小、淋巴结转移、分期密切相关()阳性和阴性表达患者 年生存率分别为.和.差异有统计学意义(.)表达情况(.)、肿瘤大小(.)、淋巴结转移()、分期()与 患者的 存在相关性 的低表达(.)和 的高分期()是影响 的独立危险因素结论:可能通过调控 的表达来促进结直肠癌的发生发展可为 的诊治提供参考关键词 结直肠肿瘤 中图分类号 文献标识码 文章编号()()【】:.:.()().:()()(.)()(.).(.).(.).(.).(.).(.).(.)(.)(.)(.).(.)()甲醛固定和石蜡包埋后 厚切片进行免疫组化 滴加 一抗或一抗工作液(淮海医药 年 月 第 卷 第 期 )冰箱 孵育过夜 冲洗 滴加适当比例稀释的生物素标记二抗(稀释)试剂覆盖切片 下封闭 冲洗 滴加适当比例稀释的辣根酶标记链霉卵白素 孵育 新鲜 适度染色苏木精复染 梯度乙醇脱水中性树胶封片 以已有的阳性表达片作为对照组以 代替一抗作阴性对照组.免疫组化结果判读每张切片在光镜 倍镜下随机观察 个具有代表性的视野拍摄照片采用半定量计分法评价免疫组化染色结果 染色程度:无染色为 分浅黄色为 分棕黄色为 分棕褐色为 分 阳性范围:为 分 为 分 为 分 为 分为 分 将上述 项评分相加作为最终评分结果:分为阴性 分为阳性.随访 通过电话和复诊病历进行随访随访时间为 个月中位随访时间为 个月随访时间截至 年 月 日 总生存期()定义为从手术次日开始至任何原因死亡或随访结束的时间间隔 连续 次无法联系定义为失访失访率为.统计学方法应用 .统计学软件分析数据计数资料以 表示采用 检验计量资料以 表示采用 检验相关性分析基于 相关系数 生存预后分析采用 曲线组间比较采用 检验多因素分析采用 比例风险回归模型以 为差异有统计学意义 分别代表 .结果.在 和 细胞中的表达 结果分析显示 在 细胞中的表达水平高于 细胞(.)(图)转染 抑制剂后在抑制剂对照组的相对表达量均值为.而在抑制剂组的均值为.在 细胞中的表达水平低于对照组(图)差异具有统计学意义(.).在 和 细胞中表达 由免疫印迹条带图可知 在 细胞中的表达水平低于 细胞(图)在 细胞中的相对表达量均值为.而在 细胞中的均值为.(图)差异有统计学意义(.)在 和 细胞中的表达 转染后 在 细胞中的表达 图 检测 在不同细胞中的表达水平 在 和 细胞中的表达 和 细胞中 的相对表达量比较图 检测 在不同细胞中的表达水平.结直肠癌细胞中 与 表达相关性免疫印迹条带显示 细胞中抑制 的表达后 表达升高呈负相关性(图)在抑制剂对照组的相对表达量均值为.而在抑制剂组的表达均值为.(图)差异有统计学意义(.)抑制 表达后 表达情况 组细胞中 的相对表达量比较图 检测 转 染 抑 制 剂 的 细胞中 的表达水平.在结直肠癌组织和癌旁组织中的表达 在结直肠癌组织中的阳性表达率为.(/)低于癌旁组织的.(/)差异有统计学意义(.)见图.表达与结直肠癌患者临床病理特征间的关系 的表达与肿瘤大小、有无淋巴结转移、分期密切相关差异有统计学意义(.)见表 淮海医药 年 月 第 卷 第 期 结直肠癌组织 结直肠癌旁组织图 免疫组化检测 在结直肠癌组织及癌旁组织中的表达()表 表达与 患者临床病理特征间关系特征例数 阳性表达()阴性表达()值 值性别/例.男 女年龄/岁.肿瘤部位.结肠 直肠肿瘤大小/.浸润深度/例.淋巴结转移/例.无 有 分期/例.分化程度/例.高分化 中分化 低分化.表达与患者生存期之间关系 生存曲线显示 阳性表达组 年生存率为.高于阴性表达组的.(图)差异有统计学意义(.)图 表达与患者生存期之间关系.预后影响因素分析采用 单因素回归分析各变量对 患者 的影响结果显示 表达情况、肿瘤大小、淋巴结转移、分期与 患者的 存在相关性而性别、年龄大小、肿瘤生长部位、浸润深度、组织分化程度与患者的 无关 将单因素分析中有意义的指标纳入 回归模型进行多因素分析显示 的低表达和 高分期是影响 的独立危险因素 见表 表 表 影响 患者 的单因素分析变量例数生存组()死亡组()值 值 表达/例.阳性 阴性性别/例.男 女年龄/岁.肿瘤部位/例.结肠 直肠肿瘤大小/.浸润深度/例.淋巴结转移/例.无 有 分期/例.分化程度/例.高分化 中分化 低分化表 影响 患者 的 回归分析因素 值标准误值 值 值(值)低表达.(.)肿瘤直径 .(.)淋巴结有转移.(.)高分期.(.)淮海医药 年 月 第 卷 第 期 讨论 是全球第三大常见癌症死亡原因每年有超过 万病例死亡在新诊断的结直肠癌中的患者合并有转移另外 表现为局部疾病的患者后来会发展为转移性疾病 因此在分子基因水平上开展 的研究有助于提高 患者的诊治水平 是一种由 个核苷酸所组成的小分子非编码 不含开放阅读框也不经由翻译途径生成蛋白质但是有调控蛋白编码基因活性的功能 编码在位于 号染色体上的 基因内含子中共有 个结合位点 研究表明 在乳腺癌组织和细胞中呈高表达能够作为早期乳腺导管癌诊断的新的生物标志物 在乳腺癌骨转移的过程中小核仁 宿主基因()通过外泌体 正向调控骨形态发生蛋白 ()的 表达 在胰腺癌中 和 明显过表达与 水平变化趋势一致与单独检测 相比 联合 的血浆水平在区分胰腺癌患者与健康受试者方面表现出更强的能力敏感性和阴性预测值都有所提高另有研究显示 能够通过调控受体蛋白酪氨酸激酶()/磷脂酰肌醇 激酶调节亚基()/雷帕霉素靶蛋白()/核糖体蛋白 激酶()信号通路促进结直肠癌的进展 本研究通过 检测发现 在结直肠癌细胞中高表达转染抑制剂后其表达低于对照组与既往研究结果一致 进一步通过免疫印迹实验发现在抑制了 表达的结直肠癌细胞中 的表达升高提示 与 在结直肠癌细胞中呈负相关二者可能共同参与了结直肠癌的发生、发展为后期详细的机制研究奠定了基础 是 家族成员之一在消化道癌症的产生和进程中发挥了关键性作用 等研究表明沉默 导致促纤维增生性小圆细胞瘤()细胞 复制的停止和体内肿瘤生长的抑制 等在骨肉瘤细胞中的研究显示 能抑制骨肉瘤细胞的增殖和迁移 在宫颈鳞状细胞癌()中长链非编码 核受体亚家族 组成员 反义 ()通过调控/轴抑制了 细胞的侵袭和迁移 而在胃、甲状腺、乳腺癌等肿瘤中同样起着重要 作用 在本研究中 在结直肠癌细胞中低表达进一步通过免疫组化检测 例结直肠癌组织样本中 的表达情况发现其阳性表达率为.低于癌旁组织的.说明 可能在结直肠癌中表现出抑癌的作用 通过分析临床病理特征发现 表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移、分期密切相关 此外对结直肠癌患者 年生存期的影响分析显示阳性表达 组患者的 年生存期明显高于阴性组表明 的高表达抑制了肿瘤细胞的增殖、分化从而抑制淋巴结转移等表现出较好的预后 在单因素分析中 表达情况、肿瘤大小、淋巴结转移、分期与 患者的 有关把单因素分析中有重要统计学价值的变量纳入 多因素回归模型进行风险因素分析结果显示 的低表达和 的高分期是影响 的独立危险因素 进一步验证了 在结直肠癌诊治中的地位突出了其重要性综上所述本研究发现 与 在结直肠癌细胞中表达呈负相关性 在结直肠癌患者中的表达较低并且与患者的生存期、肿块大小、淋巴结有无转移、分期具有相关性是影响结直肠癌患者 的危险因素 这一结论提示 可能通过调控 的表达来促进结直肠癌的发生发展二者有望成为新的癌症治疗靶点 但其具体调节机制仍需进一步探索参 考 文 献 .(/):.():.():.:.(下转第 页)淮海医药 年 月 第 卷 第 期 胞肌红蛋白 末端脑钠尿肽和核因子 表达水平及其临床意义.山西医药杂志():.王超苏强张淑文等.多器官功能障碍综合征诊断标准的多中心临床研究.中华外科杂志():.李林赵亚伟田惠民等.评分在外科 中的应用.中国危重病急救医学():.施颖琦杨艳梅沈美琴等.炎症性肠病患者活动期与缓解期 表达与血清 及 水平的相关性分析.中国中西医结合消化杂志():.吴奇肖圣珏刘巧志等.急性 段抬高型心肌梗死患者血清 水平与心肌损伤程度的相关性.中国急救医学():.张璐徐勤刘文娜等.在慢性肾脏病血管钙化中作用的研究进展.中华实用诊断与治疗杂志():.宋隽黄伟黄铭等.脓毒症合并多器官功能障碍患者血清中 的表达及其临床意义.中华医院感染学杂志():.周永峰雷荣杜鹏荣等.微小 通过靶向缺氧诱导因子 调控心肌纤维化.心脏杂志():.徐建男王淑明张建新等.维持性血液透析患者循环微小、程序性细胞死亡因子 表达与钙磷代谢紊乱的关系.中国血液净化():.李运正丁科孙登科等.血清胆碱酯酶前白蛋白对急性失代偿性心力衰竭预后评估的价值.中国急救医学():.白艳丽李艳袁玲玲等.连续性床旁血液滤过对急性有机磷农药中毒患者血清脂蛋白()胆碱酯酶活力及心功能指标的影响.河北医学():.李克新刘艳芹刘玉龙等.有机磷化合物的胆碱酯酶动力学研究进展.中国药理学与毒理学杂志():./.()():.李晓利王耀辉范利等.老年患者心力衰竭生物标志物 末端 型钠尿肽前体水平检测及影响因素分析.中华老年心脑血管病杂志():.桑甜甜程楠吕纳强等.末端 型钠尿肽前体对高龄急性冠状动脉综合征患者预后评估的价值.中华老年心脑血管病杂志():.周晓君黄春燕杜合娟.肝炎肝硬化患者胆碱酯酶、骨桥蛋白和共刺激分子表达与病情进展的关系.中西医结合肝病杂志():.(收稿日期:)本文编辑:温鹏飞(上接第 页).():.李朝辉刘大威夏添明等.微小 对人结直肠癌 和 细胞增殖和迁移的影响.四川生理科学杂志():.:.():.:.():./.:.:./.():.().():.():.():./.():.():.():.():.():.(收稿日期:)本文编辑:王艳淮海医药 年 月 第 卷 第 期