SCF_c-kit信号通路对乳腺癌侵袭转移调控的作用及机制研究.pdf

基金项目：湖北省卫生健康委科研项目（项目编号：）信号通路对乳腺癌侵袭转移调控的作用及机制研究张耀武，李翔（通信作者），朱杏，谭宇彦 湖北省枝江市人民医院 甲状腺乳腺外科（湖北 枝江 ）；宜昌市中心人民医院 甲状腺乳腺外科（湖北 宜昌 ）摘要目的：探讨 信号通路对乳腺癌侵袭转移调控的作用及机制研究。方法：采用人乳腺癌细胞株 构建体外模型。将细胞分为空白对照组、过表达组和 抑制组。采用 法检测细胞 、的增殖率，采用 实验检测细胞 、的侵袭情况。结果：过表达组在 、的细胞增殖率均显著大于 抑制组和空白对照组（），且 抑制组细胞增殖率显著低于空白对照组（）；过表达组在 、的细胞侵袭数均显著大于 抑制组和空白对照组（），且 抑制组细胞侵袭数显著低于空白对照组（）。结论：信号通路的激活可增强乳腺癌细胞的增殖和侵袭能力，靶向抑制 信号通路的表达可有效逆转对乳腺癌细胞增殖和侵袭的促进作用。关键词：信号通路；乳腺癌；侵袭转移；增殖中图分类号：文献标识码：文章编号：（）：，（）：，：，（），（），（），（）：，：；乳腺癌是最常见的女性恶性肿瘤之一 。数据统计显示 ，全球乳腺癌的年发病率大约为每 万女性 例。国内数据显示，乳腺癌发病率呈逐年升高趋势，约 万人次。手术、化疗、放疗和内分泌治疗等是现阶段临床黑龙江医药 治疗乳腺癌的主要方法，可有效阻断患者病情恶化延长患者生命 。然而，乳腺癌的高发性和起病初期的隐匿性致使部分患者确诊时已步入中晚期致使部分患者在治疗后易发生预后的复发和转移从而危及患者生命。乳腺癌细胞的增殖、侵袭是导致患者病情进展的核心生物学机制，故明确乳腺癌细胞的增殖及侵袭机制并开展靶向干预对进一步延长乳腺癌患者预后生命期意义重大 。（）和 （）信号通路参与调节多种细胞的生长、分化和存活等生物学过程，近来被证实在恶性肿瘤的发生、发展过程中扮演着重要角色 。然而现阶段，信号通路是否能影响乳腺癌细胞的增殖和侵袭转移仍未被系统报道。基于此背景，本次研究拟通过开展进一步实验以期明确 信号通路对乳腺癌细胞增殖、侵袭的影响，旨在为后续临床的早期防治提供新思路。材料与方法 材料 细胞人乳腺癌细胞株 ，购置于上海弘顺生物科技有限公司。试剂试剂 培养基，购置于上海科拉曼试剂有限公司；培养基，购置于上海博升生物科技有限公司；高糖培养基，购置于厦门逸漠生物科技有限公司；噻唑蓝（），购置于上海炎熙生物科技有限公司；板，购置于上海卧宏生物科技有限公司。仪器仪器 酶标仪，购置于上海普瑾医疗科技有限公司；倒置显微镜，购置于上海土森视觉科技有限公司。方法 细胞培养人乳腺癌细胞株 在培养基中进行标准培养，培养基中加入 的链霉素，的青霉素和 的 ，标准培养条件为 的湿度，。细胞转染和分组本次研究共分为三组，即空白对照组、过表达组和 抑制组，每个各设置 个平行对照。的过表达和抑制采用转染过表达慢病毒载体和抑制剂载体的方法实现。转染完成后并采用 检查转染情况，当 确定为过表达和抑制后即代表建模成功。以 法测定细胞活性细胞进行标准培养传代完成后采用移液枪将细胞移动至 孔板中进行后续处理，每孔加入 溶液 ，并在标准条件下进行孵育 ，后采用移液枪吸弃上清，并滴入 的二甲基亚砜并放置在震动台上震动 ，后续观察细胞在 、观察细胞的 值并计算细胞的增殖率。细胞增殖率 （值实验组 值对照组）。以 实验检测细胞侵袭转移情况取对数生长期细胞待细胞生长融合度达到 进行后续操作，首先采用 将 孔板中的 或其他基质涂层清洗掉，然后在 下干燥，吸取 细胞悬液加入 上层，并在 的下室加入含 的 培养液 ，将孔板放入细胞培养箱中进行培养 小时，取出孔板，用 或无血清培养基洗涤下室中的细胞，用 的多聚甲醛固定细胞，然后用染色剂（如 染色）染色，并记录 、细胞侵袭数量。统计学方法本研究所得数据结果采用 进行处理和分析，计量资料以（均数 标准差）表示，多组间比较采用单因素方差分析（）进行检验，两组间比较采用 检验，检验水准 。结果 各组细胞增殖结果比较 过表达组在 、的细胞增殖率均显著大于 抑制组和空白对照组（），且 抑制组细胞增殖率显著低于空白对照组（），详情见表 。表 各组细胞增殖结果比较（）分组 空白对照组 抑制组 过表达组 注：与空白对照组相比，；与 抑制组对比，各组细胞侵袭结果比较 过表达组在 、的细胞侵袭数均显著大于 抑制组和空白对照组（），且 抑制组细胞侵袭数显著低于空白对照组（），详情见表 。表 各组细胞侵袭结果比较（）分组 空白对照组 抑制组 过表达组 注：与空白对照组相比，；与 抑制组对比，讨论近来随着乳腺癌的研究进入分子层面，促进乳腺癌疾病发生、发展的相关机制逐渐被揭露。近来大量证据证实 ，乳腺癌细胞的增殖、侵袭转移是导致患者病情进展和恶化最终影响患者生存期的核心因素。有研究证实 ，乳腺癌细胞的增殖、侵袭转移受复杂的信号网络调控，寻找其上游调控靶点并开展靶向干预被证实是有效延长乳腺癌患者预后黑龙江医药 髂肋肌平面阻滞与胸椎旁阻滞用于胸腔镜术后镇痛的效果比较张隆盛（通信作者），李春然，杨铎，林耿彬，张欢楷，林旭林揭阳市人民医院（广东 揭阳 ）摘要目的：本研究旨在探讨髂肋肌平面阻滞与胸椎旁阻滞用于胸腔镜术后镇痛的效果比较。方法：选择 年 月至 年 月在我院收治的需要择期胸腔镜手术患者 例，采用随机数字表法将研究对象分为胸椎旁阻滞组（组）和（内文见下页）生存期的可靠的方案。此外近来随着血清因子检测在临床的推广应用，寻找特异性和敏感性更高的靶点从而临床早期对乳腺癌进行诊断和预后发展做出可靠的预测评估已成为临床探讨的热点课题。是一种由成纤维细胞、内皮细胞、骨髓基质细胞等多种细胞产生的细胞因子，可结合其受体 ，激活下游的信号通路，如 、等，进而调节多种细胞功能 。是一种膜受体酪氨酸激酶（），在多种细胞类型中表达，如造血干细胞、神经胶质细胞、肌肉细胞等 。与 结合后，的酪氨酸激酶活性被激活，进而磷酸化多个下游信号分子，如 、等，激活多个信号通路，从而调节多种生物学过程，如细胞增殖、存活、分化、迁移等 。本次研究结果显示，过表达组在 、的细胞增殖率均显著大于 抑制组和空白对照组，且 抑制组细胞增殖率显著低于空白对照组，提示过表达的 信号通路有助于促进乳腺癌细胞增殖，这支持了既往研究观点。等 研究结果显示，信号通路的活化表达可能与皮肤黑色素瘤细胞的增殖有关。本次研究结果显示，过表达组在 、的细胞侵袭数均显著大于 抑制组和空白对照组，且 抑制组细胞侵袭数显著低于空白对照组，提示过表达的 信号通路有助于促进乳腺癌细胞侵袭转移。这与既往研究基本一致。等 研究结果显示，抑制 信号通路的表达可有效抑制结肠癌细胞的侵袭过程。综上所述，信号通路的激活可增强乳腺癌细胞的增殖和侵袭能力，靶向抑制 信号通路的表达可有效逆转对乳腺癌细胞增殖和侵袭的促进作用。然而本次研究仍存在不足，即未纳入临床乳腺癌患者作为研究对象，从而早期监测 信号通路的表达是否有助于临床早期对乳腺癌患者病情做出预测评估仍需要进一步验证。参考文献 沈敬，朱海涛，梅珈彬，等 地高辛和他莫昔芬协同抑制乳腺癌 细胞的增殖，迁移和侵袭 中国药理学通报，（）：，：，；：张雪，董晓平，管雅?，等 女性乳腺癌流行病学趋势及危险因素研究进展 肿瘤防治研究，（）：吴茜，耿盛凯，辛肇晨，等 术前乳腺特异性伽马成像的显像靶与非靶摄取比值与乳腺癌预后的关系 中华普通外科杂志，（）：王淋，刘莉花，王海瑞，等 乳腺癌肝转移综合治疗的进展 医学综述，（）：，蔡桂举，阮祥燕 孕激素受体膜组分 在绝经后激素治疗中乳腺癌风险预测的研究进展 实用医学杂志，（）：汤繤，王勇，严枫 转运 来源的分子片段 靶向细胞骨架相关蛋白 对乳腺癌细胞增殖的影响 肿瘤研究与临床，（）：蔡桂举，阮祥燕 孕激素受体膜组分 在绝经后激素治疗中乳腺癌风险预测的研究进展 实用医学杂志，（）：柴玉娜，唐洪梅，黄育生，等 腹泻型肠易激综合征大鼠 信号的变化及其与免疫功能的关系 中国药理学通报，（）：邓静，凌江红，上官鑫超，等 枳实对功能性消化不良大鼠胃 间质细胞及其 信号通路的影响 中华中医药杂志，（）：，；：，（），；（）：收稿日期：黑龙江医药