IL-33缺陷调节小鼠抗弓形虫感染的CD8+T细胞应答.pdf

5 5 0中国人兽共患病学报C h i n e s eJ o u r n a lo fZ o o n o s e s2 0 2 3，3 9(6)D O I：1 0 3 9 6 9 j i s s n 1 0 0 2 2 6 9 42 0 2 3 0 0 0 5 4I L 一3 3 缺陷调节小鼠抗弓形虫感染的C D 8+T 细胞应答何小丽1，陈杏婷2，吴林青1，潘矗3，陈舒玲2，韩艳非1，陈义忠1，章涛1实验研究摘要：目的探讨I L 一3 3 缺陷(I L 一3 3。一)对弓形虫感染小鼠的炎症反应和C D 8+T 细胞功能的影响。方法C 5 7 B L 6野生型(W i l d t y p e，W T)和I L 一3 3 t 小鼠分别设感染组和对照组，建立弓形虫感染模型，记录小鼠死亡时间，绘制生存曲线；分别取感染后4 8h、9 6h 各组小鼠外周血及肝、脾组织，H E 染色观察组织病理变化；微量样本多指标流式蛋白定量技术(c y t o m e t r i cb e a da r r a y，C B A)及E L I S A 检测血浆炎症因子(I L-1 2 P 7 0、T N F-a、I F N 一7、M C P 一1、I L 一6 及I L 一4)水平；q P C R 检测小鼠脾细胞中弓形虫速殖子表面抗原一1(S A G-1)的m R N A 水平；流式细胞术分析脾脏C D 8+T 细胞穿孔素、颗粒酶和I F N 一7 水平。结果与W T 感染组小鼠比较，9 6h 时I L 一3 3 感染组小鼠脾脏S A D lm R N A 表达降低(F 一1 3 9 6，P O 0 5)，肝、脾组织的炎症改变较轻，生存时间延长()c 2 6 8 7，P o 0 1)；与w T 感染组小鼠比较，感染9 6h 时I L 一3 3 感染组血浆I L 一4 浓度升高较高(F=3 2 8 3 2，P 0 0 1)，而T N F _ d、I F N 一7、M C P 一1 均明显较低(F T N F _。一3 2 6 6、F I F M，一5 9 3 2、F M c P _ l=4 3 7 8，均P 0 0 1)；感染9 6h，I L-3 3 斗感染组小鼠脾脏C D 8+T 细胞穿孔素(F=5 7 4 2 0，P o 0 1)、颗粒酶(F 一1 4 6 8，P 0 0 5)和I F N 一7(F 一1 5 2 2，P d 0 0 5)表达均高于w T 感染组。结论在小鼠急性弓形虫感染中，I L 一3 3 抑制脾脏C D 8+T 细胞应答，促进全身炎症反应。关键词：I L 一3 3；弓形虫；感染；T 细胞；炎症反应；小鼠中图分类号：R 3 8 2 5；R 3 9 2 1 1文献标识码：A文章编号：1 0 0 2 2 6 9 4(2 0 2 3)0 6 0 5 5 0 0 6I L-3 3d e f i c i e n c yr e g u l a t e st h eC D 8+Tc e l lr e s p o n s ei nm i c ew i t hT o x o p l a s m ag o n d i ii n f e c t i o nH EX i a o l i l，C H E NX i n g t i n 9 2，W UL i n q i n 9 1，P A NY a 0 3，C H E NS h u l i n 9 2，H A NY a n f e i l，C H E NY i z h o n 9 1，Z H A N GT a 0 1(1 S c h o o lo fB a s i cM e d i c a lS c i e n c e s，F u j i a nM e d i c a lU n i v e r s i t y，F u z h o u3 5 0 1 2 2，C h i n a；2 F 幻i a nM e d i c a lU n i v e r s i t yF i r s tA f f i l i a t e dH o s p i t a l，F u z h o u3 5 0 0 0 5，C h i n a；3 C e n t e r f o rM e d i c a lD e v i c ea n dC o s m e t i cE v a l u a t i o na n dI n s p e c t i o n，S h a n g h a i2 0 0 0 2 0，C h i n a)A b s t r a c t：W ei n v e s t i g a t e dt h ee f f e c to fI L-3 3d e f i c i e n c y(I L 一3 37)o ni n f l a m m a t o r ya n dC D 8+c y t o t o x i cTc e l lr e s p o n s e sa g a i n s tT o x o p l a s m ag o n d i ii n f e c t i o ni nm i c e W i l d t y p e(W T)C 5 7 B L 6a n dI L 一3 3。m i c ew e r ed i v i d e di n t ot w og r o u p s：T g o n d i i i n f e c t e da n dc o n t r 0 1 T h es u r v i v a lr a t e sw e r ed e t e r m i n e di nt h et w og r o u p s T h ep a t h o l o g i cc h a n g e si nt h el i v e ra n ds p l e e nw e r ec h e c k e db yH Es t a i n i n g P l a s m ac y t o k i n e s(I L 一1 2 P 7 0，T N F-q，I F N 一7，M C P 一1，I L 一6，a n dI L 一4)w e r em e a s u r e db yC B Aa n dE L I S A T h el e v e lo fT o x o p l a s m ag o n d i is u r f a c ea n t i g e n 一1(S A G-1)m R N Ai nt h es p l e e nw a sd e t e c t e db yf l u o r e s c e n c eq u a n t i t a t i v eP C R T h ei n t r a c e l l u l a rc y t o k i n e，I F N 一7，p e r f o r i n，a n dg r a n z y m eBi nC D 8+Tc e i l sw e r ea n a l y z e db yf l o wc y t o m e t r y T h ed a t as h o w e dt h a tt h e9 6 一hs u r v i v a lr a t ew e r ei n c r e a s e d，l e s si n f l a m m a t i o no c c u r r e di nt h el i v e ra n ds p l e e n，a n di n c r e a s e dp l a s m ap r o i n f l a m m a t o r yc y t o k i n e sw e r ea t t e n u a t e di nI L 一3 3+m i c ec o m p a r e dw i t hW T i n f e c t e dm i c e I na d d i t i o n，u p r e g u l a t i o no fp e r f o r i n，g r a n z y m eB，a n dI F N yf r o mC D 8+Tc e l l si nt h es p l e e nw e r eo b s e r v e dw i t hI L 一3 3d e f i c i e n c y9 6hp o s t 一福建省科技厅引导项目(N o 2 0 1 9 Y 0 0 1 1)通讯作者：章涛，E m a i l：z j d r z h t m a i l f j m u e d u c n；O R C I D：0 0 0 0 0 0 0 3 3 1 2 7 1 4 7 1作者单位：1 福建医科大学基础医学院，福州3 5 0 1 2 2；2 福建医科大学附属第一医院，福1 13 5 0 0 0 53 上海市医疗器械化妆品审评核查中心，上海i n f e c t i o n s T h e s er e s u l t ss u g g e s tt h a tI L-3 3p r o m o t e st h ei n f l a m m a t o r yr e s p o n s ea n di n h i b i t st h ec y t o t o x i cf u n c t i o no fC D 8+Tc e i l si nm i c ew i t ha c u t eT g o n d i ii n f e c t i o n K e y w o r d s：I L-33；T o x o p l a s m ag o n d i i；i n f e c t i o n；Tc e l l；i n f l a m m a t i o n；m o u s e2 0 0 0 2 0S u p p o r t e db yt h eG u i d i n gP r o j e c to fF u j i a nS c i e n c ea n dT e c h n o l万方数据6 期何小丽，等：I L 一3 3 缺陷调节小鼠抗弓形虫感染的C D 8+T 细胞应答5 5 1o g yD e p a r t m e n t(N o 2 0 1 9 Y 0 0 1 1)C o r r e s p o n d i n ga u t h o r：Z h a n gT a o，E m a i l：z j d r z h t m a i l q m u e d u c n刚地弓形虫(T o x o p l a s m ag o n d i i)是一种专性的细胞内寄生原虫，可以感染几乎所有的温血动物，呈全球性分布，其所致疾病为弓形虫病 1 屯。目前，弓形虫仍然是A I D S 和长期使用免疫抑制剂病人合并感染的重要机会致病原虫 3。4 。弓形虫S A G 一1 在弓形虫速殖子中含量最多，具有高度的抗原性，可刺激宿主产生免疫应答，在宿主抗弓形虫免疫中起着重要作用 s 。细胞免疫是抗胞内寄生虫感染的主要效应机制，在抗弓形虫感染中发挥主要作用。研究发现，小鼠弓形虫感染的早期特征是速殖子的高水平复制，并血行播散至其他组织和器官。早期感染所触发的强大T 细胞应答在抑制寄生虫生长、增殖中发挥重要作用 6。8 。白介素一3 3(i n t e r l e u k i n 一3 3，I L-3 3)是2 0 0 5 年发现的一个I L 一1 家族成员，作为S T 2(h o r n o l o go fs u l f o t r a n s f e r a s e)的配体，具有前炎症细胞因子和核因子的双重作用 9。13|。I L-3 3 是T h 2 细胞的趋化因子，可促使T h 2 细胞在淋巴结和组织中募集 14 I，通过促进T h 2 免疫反应、趋化嗜酸粒细胞、改变巨噬细胞的极化趋势，在感染性疾病、过敏性疾病、癌症等多种炎症性疾病中发挥作用。同时，I L-3 3 对细胞免疫应答具有负调