ＧｕｉｈａｉａＪｕｌ.２０２３ꎬ４３(７):１２７６－１２８６ｈｔｔｐ://ｗｗｗ.ｇｕｉｈａｉａ－ｊｏｕｒｎａｌ.ｃｏｍＤＯＩ:１０.１１９３１/ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０２２０７０５８周黎ꎬ李伽文ꎬ徐郅卓ꎬ等ꎬ２０２３.除虫菊ＴｃＡＬＤＨ和ＴｃＧＬＩＰ基因启动子克隆及功能分析[Ｊ].广西植物ꎬ４３(７):１２７６－１２８６.ＺＨＯＵＬꎬＬＩＪＷꎬＸＵＺＺꎬｅｔａｌ.ꎬ２０２３.ＣｌｏｎｉｎｇａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎａｌｙｓｉｓｏｆｐｒｏｍｏｔｅｒｏｆＴｃＡＬＤＨａｎｄＴｃＧＬＩＰｇｅｎｅｓｉｎＴａｎａｃｅｔｕｍｃｉｎｅｒａｒｉｉｆｏｌｉｕｍ[Ｊ].Ｇｕｉｈａｉａꎬ４３(７):１２７６－１２８６.除虫菊ＴｃＡＬＤＨ和ＴｃＧＬＩＰ基因启动子克隆及功能分析周黎１ꎬ李伽文１ꎬ徐郅卓１ꎬ曾拓２ꎬ王彩云１∗(１.华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室ꎬ武汉４３００７０ꎻ２.贵州师范大学生命科学学院ꎬ贵阳５５０００１)摘要:天然除虫菊酯是从除虫菊(Ｔａｎａｃｅｔｕｍｃｉｎｅｒａｒｉｉｆｏｌｉｕｍ)中提取的绿色植物源生物杀虫剂ꎮ醛脱氢酶(ＴｃＡＬＤＨ)和ＧＤＳＬ脂肪酶(ＴｃＧＬＩＰ)是除虫菊酯生物合成途径中的关键限速酶ꎮ为探究ＴｃＡＬＤＨ和ＴｃＧＬＩＰ基因的功能ꎬ该研究从除虫菊无性系‘Ｗ９９’中克隆得到ＴｃＡＬＤＨ和ＴｃＧＬＩＰ基因的启动子ꎬ并通过生物信息学分析、组织化学染色(ＧＵＳ染色)、荧光素酶报告实验和外源植物激素处理实验对其启动子的调控元件、启动子活性、激素诱导特异性和组织特异性进行分析ꎮ结果表明:(１)克隆得到的ＴｃＡＬＤＨ和ＴｃＧＬＩＰ启动子序列分别为２８４８、１３４３ｂｐꎬ均含有多个与逆境应答和激素信号相关的顺式作用元件ꎮ(２)分别构建了启动子和荧光素酶融合的植物表达载体ꎬ在烟草叶片中观察荧光成像发现ꎬＴｃＡＬＤＨ启动子具有茉莉酸甲酯(ＭｅＪＡ)和脱落酸(ＡＢＡ)激素诱导特异性ꎮ(３)用ＭｅＪＡ和ＡＢＡ处理除虫菊‘Ｗ９９’组培苗发现ꎬＴｃＡＬＤＨ的表达量在１２ｈ内受ＡＢＡ诱导时上调ꎬ受ＭｅＪＡ诱导时先升高后降低ꎬＴｃＧＬＩＰ的表达量受ＡＢＡ和ＭｅＪＡ诱导下调ꎮ(４)分别构建了ＴｃＡＬＤＨ和ＴｃＧＬＩＰ启动子与ＧＵＳ基因融合的植物表达载体ꎬ转化烟草并对其转基因叶片进行ＧＵＳ活性染色发现ꎬＴｃＡＬＤＨ启动子在烟草叶片腺体、腺毛头部及叶肉细胞中表达ꎬ而ＴｃＧＬＩＰ启动子仅在烟草叶肉细胞中表达ꎮ综上认为ꎬＴｃＡ...
