鼻咽癌组织中Tim-3和Galectin-9蛋白表达及其对临床疗效和预后的影响.pdf

广西医科大学学报JOURNAL OF GUANGXI MEDICAL UNIVERSITY2023Jul.40（7）鼻咽癌组织中Tim-3和Galectin-9蛋白表达及其对临床疗效和预后的影响*王启俊1，苏赓2，邹昂儒3，杜杨君2，吴可嘉2（广西壮族自治区民族医院1.耳鼻喉科；2.病理科；3.体检科，南宁530001）摘要目的：探讨鼻咽癌组织中Tim-3和Galectin-9蛋白表达及其对临床疗效和预后的影响。方法：收集2016年10月至2019年10月本院收治的60例鼻咽癌患者，所有患者接受调强放射治疗方案。采用免疫组化SP法检测60例鼻咽癌患者癌组织及癌旁组织中Tim-3和 Galectin-9蛋白的表达情况，分析蛋白表达与临床特征、放疗疗效及预后的关系。结果：鼻咽癌组织中Tim-3和 Galectin-9蛋白阳性表达率均明显高于癌旁组织（58.33%vs 31.67%，71.67%vs 33.33%，均P0.05）；肿瘤组织中Tim-3和 Galectin-9的表达与临床分期、是否远处转移相关（P0.05），与患者性别、肿瘤大小、年龄和血清EB病毒无明显关联（P0.05）；Tim-3和 Galectin-9蛋白阳性患者放疗敏感性均显著高于Tim-3和 Galectin-9阴性患者（均P0.05）；Tim-3和 Galectin-9蛋白阳性表达率与鼻咽癌复发率呈正相关关系（r=0.345，r=0.287，均P0.05）。结论：Tim-3蛋白和Galectin-9蛋白在鼻咽癌中的侵袭与转移中发挥着重要作用，Tim-3蛋白和Galectin-9蛋白高表达患者预后较差，Tim-3和 Galectin-9蛋白组阳性患者放射抗性较低，联合检测Tim-3蛋白和Galectin-9蛋白对鼻咽癌的治疗及预后有一定的指导意义。关键词Tim-3；Galectin-9；放射治疗；鼻咽癌；放射抗性中图分类号：R739.63文献标志码：A文章编号：1005-930X（2023）07-1195-05DOI：10.16190/ki.45-1211/r.2023.07.017Protein expressions of Tim-3 and Galectin-9 in nasopharyngeal carcinoma tissues and theirimpact on clinical efficacy and prognosisWang Qijun1,Su Geng2,Zou Angru3,Du Yangjun2,Wu Kejia2.(1.Department of Otorhinolaryngology;2.Depart-ment of Pathology;3.Department of Physical Examination,Minzu Hospital of Guangxi Zhuang Autonomous Re-gion,Nanning 530001,China)AbstractObjective:To explore the protein expressions of Tim-3 and Galectin-9 in nasopharyngeal carcinomatissues and their impact on clinical efficacy and prognosis.Methods:60 patients of nasopharyngeal carcinoma ad-mitted to our hospital from October 2016 to October 2019 were collected,and all patients received intensity mod-ulated radiation therapy.Immunohistochemical SP method was used to detect the protein expressions of Tim-3and Galectin-9 in carcinoma tissues and adjacent tissues of 60 patients with nasopharyngeal carcinoma,and therelationship between protein expressions and clinical features,radiotherapy efficacy and prognosis was analyzed.Results:The positive expression rates of Tim-3 and Galectin-9 proteins in nasopharyngeal carcinoma tissueswere significantly higher than those in adjacent tissues(58.33%vs 31.67%,71.67%vs 33.33%,allP0.05);theexpressions of Tim-3 and Galectin-9 in carcinoma tissues were correlated with clinical stages and distant metasta-sis(P0.05),but not with patient gender,tumor size,age and serum EB virus(P0.05);the radiosensitivity ofTim-3 and Galectin-9 protein positive patients was significantly higher than that of Tim-3 and Galectin-9 nega-tive patients(allP0.05);the positive expression rates of Tim-3 and Galectin-9 proteins were positively correlat-ed with the recurrence rate of nasopharyngeal carcinoma(r=0.345,r=0.287,allP0.05).Conclusion:Tim-3 pro-tein and Galectin-9 protein play an important role ininvasion and metastasis of nasopharyngeal carcino-ma,patients with high expressions of Tim-3 proteinand Galectin-9 protein have poor prognosis,patients*基金项目：广西壮族自治区卫生健康委员会科研课题资助项目（No.Z20211162）通信作者，E-mail：SUGENGL收稿日期：2023-02-01 1195广西医科大学学报2023 Jul.40（7）with positive Tim-3 and Galectin-9 protein have low radiation resistance and the combined detection of Tim-3protein and Galectin-9 protein has certain guiding significance for the treatment and prognosis of nasopharyngealcarcinoma.KeywordsTim-3;Galectin-9;radiation therapy;nasopharyngeal carcinoma;radiation resistance鼻咽癌具有明显的地域、种族和遗传差异1。目前，鼻咽癌尚无准确有效的早期诊断、有效评估或预后预测的方法。因此，大量鼻咽癌患者在初次就诊时已经有局部晚期症状。放疗是鼻咽癌的主要治疗方法，然而放射抗性限制了鼻咽癌患者的治疗效果和预后。放射抗性是鼻咽癌放射生物学研究的重点，其分子机制的研究备受关注2。放射抗性跟肿瘤免疫逃逸相关，而在介导肿瘤免疫应答过程中，Tim-3 蛋白和 Galectin-9 蛋白发挥重要作用3-4。本研究通过对60例鼻咽癌患者肿瘤组织的Tim-3和 Galectin-9蛋白进行检测，分析Tim-3、Ga-lectin-9蛋白表达与临床疗效及预后的关系，以期为制定个体化放疗方案，提高放疗效果提供依据。1资料与方法1.1一般资料收集2016年10月至2019年10月在广西壮族自治区民族医院经病理诊断并接受调强放射治疗的60例鼻咽癌患者的临床资料，其中男32例，女28例；年龄2270岁，中位年龄45岁；病理标本为鼻咽镜活检组织，经病理专家会诊后确诊为鼻咽癌，并且均为初次就诊患者。依据血清学结果，EB病毒阳性的42例，阴性18例；肿瘤组织1 cm的31例，1 cm的29例；临床分期+期33例，+期27例；有远处转移的患者28例，无远处转移的患者32例。经放射治疗后，随诊发现，其中3年内复发24例，无复发36例。本研究中的所有患者均签署知情同意书，并获得了医院伦理委员会的批准。1.2标本采集和放疗通过鼻咽镜活检获取病理标本和癌旁组织，所有标本同时备制HE染色切片和进行免疫组化，根据检测结果分组，分为Tim-3、Galectin-9蛋白表达阳性组和阴性组。所有患者均接受调强放射治疗，采用直线加速器6MV-X线照射，处方剂量：PGTVnX（原发肿瘤）69.3074.09Gy，PGTVnd（淋巴结转移瘤）6674.09 Gy，PCTV1（高危区域）（6065.1Gy），PCTV2（预防区域）（51.6257.60 Gy），分割次数3033次。1.3免疫组化Tim-3和 Galectin-9单克隆抗体和S-PKits均购自北京中山生物技术公司产品，所有组织均采用免疫组织化学S-P法处理，Tim-3和 Galec-tin-9阳性对照以已知阳性片及内对照为主，以PBS液代替一抗和内对照作为阴性对照。结果判断：Tim-3阳性细胞表现为细胞膜和（或）细胞质内出现棕黄色颗粒，Galectin-9阳性细胞表现为细胞质内出现棕黄色颗粒。根据细胞染色强度评分：无色0分，浅黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分。根据阳性细胞率计分：0分为阴性，阳性细胞10%为1分，阳性细胞11%50%为2分，阳性细胞50%为3分。两者的乘积2分以上判定为阳性。1.4疗效评价与随访所有患者放疗结束后每3个月进行随访，复查CT，按RECIST 1.1标准分为完全缓解（CR）、部分缓解（PR）、稳定（SD）和进展（PD）。有效率为RR（CR+PR），随访截止时间2022年10月，并以3年内复发率作为反映预后的指标。1.5统计学方法采用SPSS 20.0统计软件分析数据。计数资料以百分率（%）表示，组间比较采用2检验，采用Spearman 等级相关分析法分析Tim-3和Galectin-9蛋白阳性表达与肿瘤预后关系的相关性，以P0.05为差异有统计学意义。2结果2.1Tim-3和 Galectin-9蛋白在鼻咽癌组织及癌旁组织的表达鼻咽癌组织组中Tim-3和Galectin-9蛋白阳性表达率均高于癌旁组织组（均P0.05），见表1和图1。1196A：Tim-3在癌旁组织阴性表达；B：Tim-3在鼻咽癌组织阳性表达；C：Galectin-9在癌旁组织阴性表达；D：Galectin-9在鼻咽癌组织阳性表达。图1Tim-3和 Galectin-9蛋白在鼻咽癌组织及癌旁组织的表达（SP法，200）2.2鼻咽癌组织中Tim-3和 Galectin-9蛋白的表达与临床特征的关系鼻咽癌组织中Tim-3和 Galectin-9蛋白的阳性表达率与患者性别、肿瘤大小、年龄和血清EB病毒无明显关联（P0.05）；与临床分期、是否远处转移相关；及期肿瘤组