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崔玉龙
山东缢蛏人工繁育试验及高盐对幼虫生长的影响崔玉龙1,姜 珊1,吴 彪2,曹 伟2,3*,于贞贞4,陈聪聪4,赵 磊4(1荣成市海洋经济发展中心,山东荣成 264300;2中国水产科学研究院黄海水产研究所,山东青岛 266071;3浙江海洋大学国家海洋设施养殖工程技术研究中心,浙江舟山 316022;4东营市海洋发展研究院,山东东营 257091)摘要研究了山东地区缢蛏人工繁育过程及盐度对幼虫生长的影响。结果发现,山东地区能够顺利培育缢蛏苗种,其受精卵在 23 条件下发育24 h 便可进入D 形幼虫阶段,浮游期约为8 d,每天生长约15 m,变态后生长速度稳步加快;将幼虫在14、21、28 盐度梯度下培育发现,随着盐度的升高,其壳长生长速率显著下降(P005)。该研究结果可为山东地区开展缢蛏人工繁育提供参考。关键词缢蛏;人工繁育;盐度;幼虫;生长中图分类号S9683文献标识码A文章编号05176611(2023)07008503doi:103969/jissn05176611202307021开放科学(资源服务)标识码(OSID):Experiment on Artificial Propagation and Effect of High Salinity on Larvae Growth of Sinonovacula constricta in ShandongCUI Yu-long1,JIANG Shan1,WU Biao2et al(1 ongcheng Marine Economic Development Center,ongcheng,Shandong 264300;2Yellow Sea Fisheries esearch Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Qingdao,Shandong 266071)Key wordsThe artificial breeding process of razor clams in Shandong and the effects of salinity on the growth of larvae were studiedThe re-sults showed that razor clam could be successfully propagated in Shandong,and their fertilized eggs could enter the Dshaped larval stage after24 h of development at 23CThe larval stage was about 8 days,with a growth rate of about 15 m per day,and the growth rate steadily acceler-ated after larval stage;the larvae were bred under three salinity of 14,21 and 28,and it was found that the shell length growth rate decreasedsignificantly with the increase of salinity(P005)The results of the study provide a reference for the artificial propagation of razor clams inShandongKey wordsSinonovacula constricta;Artificial propagation;Salinity;Larvae;Growth基金项目宁波市“科技创新 2025”重大专项(2019B10005);宁波市重大科技攻关暨“揭榜挂帅”项目(2021Z114)。作者简介崔玉龙(1981),男,山东威海人,工程师,从事水产养殖研究。*通信作者,硕士,主要从事贝类遗传育种与繁育工作。收稿日期20220407;修回日期20220512缢蛏(Sinonovacula constricta)为软体动物,属瓣鳃纲帘蛤目竹蛏科,常栖息于河口有淡水注入的软泥底质中,是我国传统的四大海水养殖贝类之一。缢蛏广泛分布于中国、日本和朝鲜等国的沿海地区1,在我国浙江、福建的贝类养殖中占有重要地位。近年来,缢蛏养殖业呈快速稳定发展趋势,养殖区域从浙江、福建向周边的江苏、山东、广东等省份迅速扩展2。山东东营、滨州、青岛缢蛏养殖规模不断扩大,成为北方滩涂养殖的新亮点3。但缢蛏人工繁育主要集中在浙江、福建两地,山东地区的养殖苗种均来自南方,尚无缢蛏苗种规模化人工繁育的相关报道。海阳市渔业技术推广站分析比较了北方自然繁殖的苗种与浙江苗种,发现北方苗种更加适应当地自然环境,养殖经济效益比南方苗种更具优势,可避免长途运输苗种,减少投资,降低养殖成本4。随着缢蛏在山东养殖规模的不断扩大,亟需开展苗种规模化、本土化生产。盐度是影响贝类生长发育及新陈代谢的重要环境因子5。牡蛎和贻贝等大多数瓣鳃纲贝类具有密封且坚厚如石的壳来保护柔软的身体,而拥有两片薄而不封闭的壳的缢蛏选择了深挖洞的生活方式67,这导致缢蛏最先面临水体盐度波动、氨氮上升和溶氧下降等不利环境。因此,缢蛏是研究应激反应和适应的理想生物。林笔水等89 研究了不同盐度下缢蛏幼虫生存、生长及发育状况,发现缢蛏幼虫对盐度的变化很敏感,高盐度海水会使其存活率较低、生长缓慢、无法变态等,且长期生活在较高盐度海域的缢蛏所繁衍的幼虫对高盐的耐受能力强于低盐耐受力。缢蛏适应盐度范围是 42810,最适盐度范围为 152511。蛏体大小不同,对盐度的适应能力略有不同,相对而言,小蛏更耐淡,大蛏更耐咸10。然而在实际生产过程中,缢蛏的人工育苗和养殖经常受到高盐度海水的影响。为此,笔者开展了山东本地缢蛏的工厂化苗种繁育关键技术摸索,同时研究了不同盐度下幼虫的生长情况,以期为山东地区缢蛏本土化规模繁育提供基础资料和参考。1材料与方法11亲贝采集与催产缢蛏亲贝于 9 月中旬取自烟台莱阳五龙河入海口处。于低温、阴干条件下运回育苗场后,选择壳表无损伤、无附着物且壳长 5 cm 以上的个体为亲贝,持续阴干至 22:00 之后移至产卵池充气刺激,产卵池水温 23、盐度 14,持续充气刺激至翌日 02:00 后便可产卵。12幼虫培育缢蛏受精卵发育 24 h 后,大部分可达到 D形幼虫阶段,挑选健康、活力好且上浮的幼虫转至育苗池分池培育,培育密度为 10 ind/mL,保持水温 23,每日早晚换水,换水量为 50%,换水后投喂等鞭金藻(Isochrysis galbana)和牟氏角毛藻(Chaetoceros muelleri)。13幼虫附着在 1/3 幼虫出现眼点并有伸足现象时移入附苗池,利用去除杂质并消毒后的细沙作为附着基。14稚贝培育稚贝初始培育密度为 2106颗/m2,随着个体的生长而逐渐降低,一般 8 d 降低密度 50%。每日早晚换水,换水量为 80%。每日投饵 24 次。安徽农业科学,JAnhui AgricSci 2023,51(7):858715不同盐度培育幼虫试验试验盐度使用海水和曝气24 h的自来水配制,设置14、21、28 3 个盐度,每组3 个生物学重复,水温保持 20 以上。受精卵发育 24 h 后移入各盐度养殖池中,幼虫培育期间每 2 d 利用显微镜测量缢蛏幼虫壳长。16数据分析试验数据采用 Excel 2019 进行统计和作图分析,采用 SPSS 26 进行差异显著性检验,显著水平为 005(P005)。2结果与分析21幼虫发育前期观察由图 1 可见,受精 9 h 后胚胎发育至原肠期,长约 70 m,植物极细胞内陷形成一个小孔,称为原口或胚孔,形成原肠胚,24 h 后发育成 D 形幼虫,壳长约100 m,覆盖两片透明的半圆形贝壳,顶端初步形成面盘和纤毛,靠面盘上纤毛的摆动向前游动;D 形幼虫期 23 d,形成黄色的消化盲囊,壳长生长至 140 m;发育 4 d 的幼虫开始形成壳顶,不甚明显,面盘发达,在静水中能自由游动,壳长约 150 m;壳顶幼虫期约有 3 d,贝壳向卵圆形发展,并进一步形成柱状的足原基,消化盲囊变黄褐色,壳长生长至180 m;发育 7 d 的幼虫部分出现眼点,足开始收缩,面盘开始萎缩,壳长约 200 m;发育 8 d 的幼虫面盘退化,纤毛环脱落,面盘幼虫期终止,足伸出壳外,内部器官逐渐完善,壳长约为 220 m(表 1)。图 1山东缢蛏幼虫形态Fig1Larval development in the razor clam of Shandong22幼虫与稚贝的生长表 1 是缢蛏幼虫和前期稚贝的生长情况。D 形幼虫期生长较快,壳长以每天 20 m 的速度增长;壳顶幼虫期生长速度减缓,壳长每天生长约 15 m;眼点幼虫期生长速度变快,每天生长约 20 m;前期稚贝生长速度慢,但生长速度随时间呈稳步增长。23不同盐度缢蛏幼虫前期生长的影响盐度对缢蛏幼虫生长的影响如图 2 所示。试验结果表明,随着盐度的升高,其生长速率显著下降(P005),盐度 14 组生长最快,试验期间共生长约 120 m,增长率约 116%;盐度 21 组生长缓慢,生长约 50 m,增长率约 50%;盐度 28 组生长最慢,只生长约 38 m,增长率仅 40%。在试验的第 3、5、7、9 天,不同盐度组的平均壳长两两之间均有显著差异(P005);在同一盐度组中,不同试验天数的平均壳长两两之间也均有显著差异(P005)。试验结果说明,盐度对缢蛏幼虫前期生长存在显著影响。表 1缢蛏幼虫与稚贝的生长Table 1Larval and spat growth in Sinonovacula constricta日龄Agein days发育阶段Develop-ment stage壳长Shell lengthm1D 形幼虫101135942119376093140076384壳顶幼虫146075325168335846178107947眼点幼虫2007085082196088215稚贝32600154620422831504256318336823087017132773讨论缢蛏作为我国重要的经济贝类,养殖规模不断扩大,近68安徽农业科学2023 年注:图中不同大写字母代表同一时间不同盐度组间的差异显著(P005),不同小写字母代表同一盐度组不同时间下的差异显著(P005)。Note:Different capital letters represent the expression differences be-tween different salinity groups at the same time(P005),anddifferent small letters represent the expression differences of thesame salinity group at different time(P005)图 2不同盐度下缢蛏幼虫生长情况Fig2Shell length of Sinonovacula constricta larvae cultured atdifferent salinity些年规模化的人工养殖已北延至山东东营等地,发展前景十分广阔。有关缢蛏人工繁育的试验已有很多报道,福建、浙江在 20 世纪 50 年代就开始人工育苗试验,但由于当时大量催产的技术未能解决,仅限于实验室小水体育苗12。至 20世纪 70 年代末,陈文龙等13 首次采用循环水池进行缢蛏人工育苗试验,不仅连续 4 年均获成功,而且其单位水体出苗量都提高数倍;有学者采用流水刺激或冷冻刺激进行大量催产,取得了良好的效果,为人工育苗积累了宝贵的经验12。该研究利用山东本地缢蛏作为亲贝在东营进行了苗种生产试验并获得成功。在 20