桃花不同溶剂提取物抗氧化活性分析及桃花软糖的研制_李娟.pdf

收稿日期：基金项目：年河南省重大科技专项项目（）；信阳市创新应用专项（）作者简介：李娟（），女，信阳农林学院制药工程学院，讲师，硕士，研究方向为中药资源开发与利用。桃花不同溶剂提取物抗氧化活性分析及桃花软糖的研制李 娟，耿晓桐，陈 琼，彭博菡，李倩倩，王 宁（信阳农林学院制药工程学院，河南信阳；东北林业大学化学化工与资源利用学院，黑龙江哈尔滨；上海药明康德新药开发有限公司，上海）摘 要：以 和 清除率为指标，探讨桃花不同溶剂提取物的抗氧化活性；以感官评分为指标，在单因素试验的基础上，采用正交试验优化桃花软糖的制备工艺。结果表明：以生药质量浓度计，桃花水提液、醇提液和挥发油清除 的 分别为 、，清除 的 分别为 、，均呈现出一定的抗氧化活性。桃花软糖的最佳工艺为桃花以水提液的形式添加，以软糖总质量为基准，复合凝胶剂（明胶 果胶质量比 ）、白糖、干桃花浸提液和酸味剂（柠檬酸 苹果酸质量比 ）添加量分别为%、%、%和%。用此配方研制出的桃花软糖色泽呈浅红色，透明度好，柔软而有弹性，酸甜适中，咀嚼性好。关键词：桃花；软糖；制备工艺 ，（，；，；，）：,(:),(:)%,%,%,粮食与油脂 年第 卷第 期:;中图分类号：文献标志码：文章编号：（）桃花为蔷薇科植物桃的花蕾，是我国传统的美容养颜佳品。现代研究表明，桃花中多糖、酚类、黄酮类、精油等多类成分均具有清除自由基的作用，而皮肤的老化与自由基的氧化作用有较大关联；同时桃花甲醇提取物、桃花精油可有效抑制酪氨酸酶活性，从而阻止和减少黑色素的合成，而酪氨酸酶活性抑制是评价美白效果的常用指标之一。凝胶软糖是依靠凝胶剂形成的半坚固凝胶体，明胶软糖具有透明性好、咀嚼性好、入口即化等优点，但同时具有热稳定性差、室温易融化的缺点，根据凝胶剂的性能不同，采用 种或以上的凝胶剂制备的软糖，可以起到互补作用。本文对桃花水提液、乙醇提取液和桃花挥发油的抗氧化活性进行对比，确定合理的桃花提取方式，并从复合凝胶剂的选择与用量、酸味剂、甜味剂的用量等对桃花软糖的制作工艺进行优化，为桃花功能软糖的开发与利用提供理论基础和技术依据。材料与方法 材料与试剂桃花，安徽亳州药材市场（）；二苯基苦肼基（），纯度%，合肥博美生物科技有限公司；无水乙醇、抗坏血酸（维生素）、硫酸亚铁、过氧化氢、水杨酸，分析纯；明胶、果胶、变性淀粉、卡拉胶、琼脂、白砂糖、柠檬酸、苹果酸，食品级。仪器与设备 紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司；旋转蒸发器，上海亚荣生化仪器厂；循环水式多用真空泵，河南予华仪器有限公司；型电热套，杭州振和科学仪器有限公司；超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司；数显恒温水浴锅（），上海力辰邦西仪器科技有限公司；单环电陶炉，北京万众达贸易有限公司；美的多功能光波炉，广东美的生活电器制造有限公司；粉碎机，中山市方天电器制造有限公司。试验方法 桃花提取液制备桃花的预处理：挑选出色泽鲜艳、无腐烂的花朵，择掉花柄和花萼，只取用花瓣。桃花粉末的制备：将经过预处理的桃花粉碎，过 筛。桃花水提液的制备：取 桃花粉末，加 纯化水，回流提取 ，减压抽滤，再将滤渣加入 纯化水回流提取 ，抽滤，合并滤液，以 减压浓缩，定容至 ，即得桃花水提液，相当于生药质量浓度 。桃花醇提液的制备：将水提后的桃花滤渣加体积分数%乙醇溶液超声提取 次，每次 ，第一次加乙醇，第二次加乙醇，抽滤，合并滤液，以 减压浓缩，定容至 ，即得到桃花醇提液，相当于生药质量浓度 。桃花挥发油的制备：称取桃花，粉碎，置于 圆底烧瓶中，加入 的纯化水，浸泡 ，按 版中国药典（四部）挥发油测定法（通则 甲法）提取挥发油，保持微沸至挥发油提取器中提取出的挥发油不再增加为止，共提取 ，静置片刻后用乙醚溶解，收集乙醚层，挥干乙醚，加入少量无水硫酸钠，静置，最终得到挥发油 ，挥发油得率为%。清除率测定分别将上述 种提取物稀释至一定质量浓度，桃花水提液的生药质量浓度依次为 、，桃花醇提液的生药质量浓度依次为 、，桃花挥发油的质量浓度依次为 、（根据挥发油得率，折合生药质量浓度依次 为 、），维生素 的质量浓度依次为 、。吸取样品溶液 于试管内，加入 溶液，混匀后避光反应，在波长 处测吸光度；用无水乙醇代替 溶液，同法测得吸光度；用纯化水代替样品溶液，测定吸光度计为。按式（）计算样品溶液的 清除率，每个样品平行测定 次，年第 卷第 期 粮食与油脂取平均值，以维生素 为阳性对照。清除率 （）%（）清除率测定参考黄培池的方法，以维生素 为阳性对照。桃花水提液的生药质量浓度依次为 、，桃花醇提液的生药质量浓度依次为 、，桃花挥发油的质量浓度依次为 、（根据挥发油得率，折合生药质量浓度依次为 、），维生素 的质量浓度依次为 、。于 的波长下测量吸光度，依据式（）计算样品溶液的 清除率，每个样品平行测定 次，取平均值。清除率 （）%（）式中：为样品溶液吸光度；为纯水代替桃花溶液且不添加过氧化氢的吸光度；为纯水吸光度。软糖制备方法 工艺流程桃花粉 桃花提取液 泡胶溶胶调味保温脱气浇模脱模 操作要点泡胶：桃花以粉末添加时，按照一定质量比称取明胶、果胶于烧杯中，加入 倍质量饮用水，浸泡 后倒掉多余的饮用水；桃花以水提液添加时，为了控制总质量，减少蒸发时间，直接用桃花水提液泡胶。溶胶：将凝胶剂转移至水浴锅加热溶胶，控制水浴温度为。待胶完全溶解后，将桃花粉或剩余桃花提取液边搅拌边加入烧杯。调味：称取适量白糖、酸味剂（柠檬酸和苹果酸），混合均匀，边搅拌边倒入盛有凝胶剂的烧杯中，搅拌均匀。保温脱气：将搅拌均匀的混合胶液继续置于水浴锅中保温，脱除气泡。浇模、脱模：待气泡脱除，并水浴至混合胶液为 时，将混合胶液趁热倒入模具中，然后装入封闭器具内，置于冰箱中冷却成型，脱模。桃花添加形式的选择在其他条件不变的情况下，分别以桃花粉末和桃花水提液为原料制备软糖，确定桃花的添加形式。桃花软糖感官评价品质选取 名健康受试者组建评价小组，受试者必须符合以下条件：味觉和嗅觉灵敏，试验前 未饮酒和吸烟，试吃软糖前 未吃刺激性的食物。评价标准及权重见表。以各项指标的总和乘以 作为感官评价得分。表 感官评价表指标评分标准得分色泽色泽均匀，有光泽颜色过深或过浅，略有光泽色泽不均匀，有杂色，无光泽弹性 弹润滑，弹性很好弹性适中，有待改进特别硬，无弹性嚼劲嚼劲大，有咀嚼性咀嚼性适中无嚼劲硬度软硬适中，口感甚佳略微偏软或偏硬，有待改善很软或很硬，口感差粘牙性不粘牙，口感润滑略微粘牙，有待改善很粘牙，口感差口味酸甜可口，细腻润滑酸味或甜味略有欠缺或过酸、过甜风味不正，有异味感组织状态组织细腻均匀，无明显颗粒物组织均匀，不够细腻组织不均匀，有明显颗粒物 复合凝胶剂的选择经过多次预试验，最终选择在其他配方成分不变的情况下，分别用“明胶 果胶”与“卡拉胶 琼脂 变性淀粉”种不同的复合凝胶剂进行对比试验，确定最终的复合凝胶剂。复合凝胶剂质量比的优化在其他条件不变的情况下，分别以明胶 果胶质量比 、和 为 个不同水平制备软糖，确定复合凝胶剂的质量比。单因素试验以软糖总质量为基准，在复合凝胶剂（明胶 果胶质量比 ）添加量为%、酸味剂（柠檬酸 苹果酸质量比 ）添加量为%、白糖添粮食与油脂 年第 卷第 期加量为%、桃花添加量为%、余量用水补足%的基础上进行单因素试验，每组试验采用上一组试验的最佳条件，分别考察桃花添加量、凝胶剂添加量、酸味剂添加量、白糖添加量对桃花软糖感官的影响。正交试验在单因素试验基础上，选取复合凝胶剂添加量、酸味剂添加量、桃花添加量和白糖添加量为考察因素，设计正交试验，因素水平见表。表 因素水平表%水平因素 复合凝胶剂添加量 酸味剂添加量 桃花添加量 白糖添加量 结果与分析 桃花不同溶剂提取物对 和 清除活性测定结果由表 可知：桃花挥发油、桃花水提液以及桃花醇提液均有对 和 有一定的清除效果，且清除能力均随生药质量浓度增加而升高。表 桃花不同溶剂提取物对和 清除活性测定结果清除率曲线方程及 （）清除率曲线方程及 （）桃花水提液 桃花醇提液 桃花挥发油 维生素 桃花添加形式的选择结果水提液制备出来的软糖色泽明亮且晶莹剔透，咀嚼吞咽无颗粒感；而由桃花粉制备出来的软糖颗粒物明显，透明度较差且口感发涩，吞咽有异物感。因此，使用桃花水提液作为软糖制备工艺的原料更加适宜。复合凝胶剂的选择结果在选用“明胶 果胶”作为凝胶剂时，软糖凝胶快速，不易粘牙，糖果色泽通透，外观精美，口感润滑且遇纸不透；而选用“卡拉胶 琼脂 变性淀粉”配合使用作为凝胶剂时，糖果透明度较差，糖体较硬，遇纸易透水，不易咬断。因此，选用明胶和果胶作为复合胶用于软糖的制作。复合凝胶剂质量比的优化结果由表 可知：明胶 果胶质量比为 时，糖体的组织状态嫩脆柔软又富有弹性。因此，确定复合凝胶剂的最佳质量比为 。表 复合凝胶剂质量比试验结果明胶 果胶质量比 软糖组织状态较坚韧缺乏柔软性嫩脆柔软富有弹性组织构造较酥脆缺乏弹性 单因素试验结果与分析由表 可知：当桃花添加量为%左右时，色泽和口感均较为合适；凝胶剂添加量为%时，软糖硬度和弹性适中，低于%时，软糖质地较软，嚼劲差，高于%时，软糖质地过于坚硬，难以咀嚼；酸味剂添加量为%时，软糖酸甜度适中，添加量为%时口感过酸，而低于%酸味不足，风味不佳；白糖添加量为%时甜度适中，低于%时，不能很好掩盖桃花的苦味，而高于%时，则口感过于甜腻。因此，确定桃花的适宜添加量为%、凝胶剂添加量为%、酸味剂添加量为%、白糖添加量为%。表 单因素试验结果桃花添加量%感官评分复合凝胶剂添加量%感官评分酸味剂添加量%感官评分白糖添加量%感官评分 正交试验结果与分析正交试验结果见表。由表 可知：个因素对桃花祛斑美白软糖的影响依次为（复合凝胶剂添加量）（桃花添加量）（酸味剂添加量）（白糖添加量）。制备桃花软糖的最优方案为，在此条件下做 组平行验证实验，制得的软糖富有光泽，酸甜可口，柔软而有弹性，且感官评分为 ，优于正交试验中的最高得分。年第 卷第 期 粮食与油脂表 直观分析表序号感官评分 结论研究表明，桃花水提液、桃花醇提液和桃花挥发油对 和 都有一定的清除效果，作用均弱于阳性对照维生素；以生药质量浓度计，种提取物对 种自由基的清除强度顺序基本一致，均为桃花水提液 桃花醇提液 桃花挥发油，这可能是因为桃花经水提取后，其多糖、多酚等抗氧化成分一并溶出，而经水提后，剩余组分减少，桃花醇提液抗氧化作用进一步减弱；种提取物对 的清除能力均强于对 的清除能力。桃花软糖的最佳工艺为桃花以水提取液的形式添加，复合凝胶剂（明胶 果胶 ）添加量%、白糖%、桃花%、酸味剂（柠檬酸 苹果酸质量比 ）%。在此条件下制得的桃花凝胶软糖色泽呈红棕色，糖体通透又富有光泽，柔软且弹性适中，酸甜可口，口感细腻。参考文献 俞耀文,戴国庆,华浩立,等 乙醇 硫酸铵双水相体系提取桃花总黄酮及其抗氧化性能 食品工业科技,():曾臻,刘后根,洪艳平,等 大孔树脂纯化桃花总黄酮工艺及抗氧化性研究 江西农业大学学报,():刘杰超,张春岭,吕真真,等 桃花中总酚和总黄酮的提取及抗氧化活性研究 食品安全质量检测学报,():袁建梅,耿明江,闫瑞芳,等 超声提取桃花多酚的工艺优化及抗氧化活性研究 食品科技,():郭彩珍,邵芬娟,闫桂琴 桃花多糖的提取及其抗氧化活性研究 中草药,():孙嘉晨,黄宇,王娜,等 桃花精油生物活性分析及护肤效果初探 首都师范大学学报(自然科学版),():刘杰超,张巧莲,焦中高,等 桃花提取物对酪氨酸酶的抑制作用及其动力学分析 果树学报,():任倩倩,吴华,金建明,等 化妆品植物原料()抑制酪氨酸酶活性的植物美白原料的研究与开发 日用化学工业,():吴修东 高热稳定性明胶软糖的开发和工艺优化 广州:华南理工大学,李杰 灵武长枣软糖的开发与工艺优化 天津:天津科技大学,吕淑一,钟芳,李玥,等 凝胶软糖配方的优化研究 食品工业科技,():赵发基 凝胶剂性能与凝胶软糖()食品工业,():黄培池 响应面法优化白芷挥发油提取工艺及其抗氧化活性研究 中国食品添加剂,():魏晓峰,刘敏 丁香花凝胶暖胃保健软