碳酸锂片的制备及其体内外评价研究_罗隽.pdf

量提取 次，每次 。表 水提正交方差分析表方差来源离均差平方和自由度 值显著性.误差.工艺验证：按上述确定的提取工艺条件，平行制备 份供试品溶液，检测其出膏率及有效成分含量，进行验证试验。结果显示，复方巴戟天健骨颗粒提取液干膏中丹酚酸、淫羊藿苷、川续断皂苷的含量分别为.、.、.，分别为.、.、.，重现性好。讨论.本实验在一个色谱条件同时测定多个组份，方中主药巴戟天的主要成分巴戟天多糖未能在优选的色谱条件下实现有效的分离。淫羊藿、丹参、川续断作为复方巴戟天健骨颗粒处方中重要的三味中药，起到补益肝肾、活血化瘀、袪风除湿等作用，其主要成分丹酚酸、淫羊藿苷、川续断皂苷药理作用也得到临床证实，具有改善微循环、纠正脂质代谢、促进骨细胞增殖、抗骨细胞凋亡等多种作用。以上三个成份同时在一个色谱条件下快速准确地测定含量，不仅大大减少了实验检测次数，还能更全面地反映工艺的优化情况。.前期做供试品溶液制备方法考察时，分别完成提取溶剂、提取方法、提取时间的单因素考察，发现用 甲醇以超声提取 所得复方巴戟天健骨颗粒的指纹图谱的色谱峰的数量和高度结果较优。前期做色谱条件考察时，完成了四个常用检测波长（、）的考察，通过比较色谱峰数目、峰形和峰强度，以及分离度等指标，发现不同检测波长对复方巴戟天健骨颗粒指纹图谱有显著影响，采用 检测波长所得复方巴戟天健骨颗粒的指纹图谱的色谱峰的数量和高度均优于 、和 波长。参考文献孙克民，王和鸣，王平，等.复方巴戟天合剂对激素性股骨头坏死大鼠模型血液流变学和血脂的影响.中国中医骨伤科杂志，（）：.孙克民，王和鸣，胡娟，等.复方巴戟天合剂对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响.福建中医药，（）：.孙克民，王和鸣，林久茂.复方巴戟天合剂对激素性股骨头坏死大鼠血管内皮生长因子表达的影响.中国实验方剂学杂志，（）：.李文顺 孙克民 王和鸣 等.复方巴戟天合剂治疗股骨头缺血性坏死的临床研究.中国中医骨伤科杂志，（）：.倪立坚，李颖，王和鸣.复方巴戟天健骨颗粒的质量标准升级研究.海峡药学，（）：.碳酸锂片的制备及其体内外评价研究罗 隽，李峥嵘，左瑾蓉，唐 杰，陈 涛，秦杰峰，王玲兰（株洲千金药业股份有限公司，湖南株洲）摘要：目的 制备碳酸锂片并考察体内外释药特性。方法 采用体外溶出评价筛选碳酸锂片中原料粒径、马铃薯淀粉用量、硬脂酸镁用量；采用生物等效性试验比较自制制剂与参比制剂在健康受试者体内的药动学行为。结果 碳酸锂片处方为碳酸锂 、小麦淀粉 、马铃薯淀粉 、硬脂酸镁。自制制剂与参比制剂的溶出曲线 因子均大于；两种制剂在健康受试者体内的药动学参数均无显著性差异，自制碳酸锂片相对生物利用度为（.）。结论 成功制备碳酸锂片，其体外溶出和体内药动学行为与参比制剂相似。关键词：碳酸锂片；生物等效性；体内外评价中图分类号：文献标识码：文章编号：（）作者简介：罗 隽，女（）。学历：硕士学位。职称：中级工程师。研究方向：药物制剂。通讯作者：王玲兰，女（）。学历：硕士学位。职称：中级工程师。，（.，.，）：.，海峡药学 年 第 卷 第 期 ；.，.；，（.）.，.：；碳酸锂（）是治疗躁狂症的常用药，与其他抗躁狂药物相比，其对躁狂和抑郁交替发作的双相情感性精神障碍有很好的治疗和预防复发作用，对反复发作的抑郁症也有预防发作作用，。年澳大利亚 医师首先用碳酸锂治疗精神性兴奋，年 应用锂盐作为双相情感性精神病的预防。而后碳酸锂先后在美国、日本、法国以片剂剂型上市，主要用于治疗躁狂症。近年来，仿制药质量和疗效一致性评价工作不断推进，本研究以国家药品监督管理局公布的参比制剂目录为依据，选定由法国赛诺菲安万特公司（）规格为.，商品名为 的碳酸锂片为参比制剂，并以制剂样品体外溶出为评价指标，对碳酸锂片的原料粒度及关键辅料用量进行筛选，考察自制制剂和参比制剂体外溶出行为及两者在健康受试者体内的药动学特征，比较两者的体内外释药特性。材料.药品、试剂与仪器 实验型多功能湿法混合制粒机（深圳市信宜特科技有限公司）；多功能流化床（重庆英格造粒包衣技术有限公司）；单臂固定料斗混合机（浙江迦南科技股份有限公司）；旋转式压片机（上海信源制药机械有限公司）；自动溶出仪（上海富科思分析仪器有限公司）；原子吸收分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；电感耦合等离子体质谱仪（赛默飞世尔科技（中国）有限公司）.试药 碳酸锂原料药（湖南千金湘江药业股份有限公司，批号）；锂单元素标准溶液（国家有色金属及电子材料分析测试中心，批号）；碳酸锂片参比制剂（，批号）；碳酸锂片受试制剂（湖南千金湘江药业股份有限公司，批号）；小麦淀粉（安徽山河药用辅料股份有限公司，批号）；马铃薯淀粉（安徽山河药用辅料股份有限公司，批号）；硬脂酸镁（安徽山河药用辅料股份有限公司，批号）；水为纯化水，其他试剂均为分析纯。方法.碳酸锂片的制备本研究参考参比制剂 的辅料信息进行开发。称取马铃薯淀粉 配制成淀粉浆备用，称取碳酸锂原料 、小麦淀粉 ，置于湿法制粒机中混合，加入淀粉浆进行制粒，干燥后.筛网整粒，将干颗粒与硬脂酸镁 混合 ，压片即得。.溶出度方法的建立.检测条件：照原子吸收分光光度法（中国药典版四部通则 第一法）在.波长处进行测定。.溶液配制：对照品溶液：精密量取锂标准溶液适量，用.盐酸溶液定量稀释制成每 中含 、.、.、.、.、.锂的溶液，作为标准溶液。供试品溶液：取本品 片，照溶出度与释放度测定法（中国药典 版通则 第二法），以 .盐酸溶液 为溶出介质，转速为 ，依法操作，经、时，取溶液，滤过，精密量取续滤液 ，置 量瓶中，加.盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。.方法学验证：专属性考察：取空白辅料溶液及.标准溶液，照”.”项下方法进行检测，考察空白辅料是否干扰检测。线性关系考察：在相对供试品 （锂元素浓度.）浓度范围内，照”.”项下方法进行检测，以吸光度响应值对浓度（）作标准曲线图，进行线性回归。滤膜吸附考察：将溶出液分成 份，一份离心（离心），一份分别采用滤膜过滤 、，照”.”项下方法进行检测，供试品溶液过滤 、初滤液后与离心上清液相比，考察滤膜对碳酸锂是否有吸附作用。重复性考察：溶出 时于同一溶出杯中平行取 份供试品溶液，由不同人使用不同仪器测定供试品的溶出度，计算 值。回收率考察：配制含碳酸锂.（）、.（）和.（）个浓度的供试品溶液各 份，计算回收率和 值。溶液稳定性考察：取.标准溶液及溶出供试品溶液、溶出供试品母液分别于室温放置 、后，照“.”项下方法进行检测，与 样品比较锂元素浓度变化率。.溶出曲线相似性评价：溶出曲线相似性的比较采用非模型依赖法中的相似因子（）法。计算公式如下。（）（）.为 时间参比样品平均溶出量；为 时间受试样品平均溶出量；为取样时间点的个数。根据溶出曲线的相似性计算方法，碳酸锂片自制制剂和参比制剂通常取 个以上取样点的溶出度结果进行计算，时，表明两条溶出曲线相似 越大，溶出曲线相似性越大。.处方工艺单因素考察 碳酸锂片制备工艺为湿法制粒，处方成分简单，本研究采用单因素考察方法，对原料药粒度、粘合剂马铃薯淀粉用量、润滑剂硬脂酸镁用量三个关键因素进行筛选，以 .盐酸溶液中溶出度为评价指标，确定最终处方。.原料粒度：本品原料微溶于水，处方比例达，故原料粒径可能对样品溶出有影响。按照“.”项下方法，以平均粒径为 和 的原料分别制备片剂，照“.”项下方法进行溶出度考察，采用.溶出曲线相似度评价方法进行 值计算和评价。.马铃薯淀粉用量：马铃薯淀粉为粘合剂，制粒过程中以淀粉浆的形式加入，其用量会影响颗粒的紧实程度，从而影响药物溶出。按照“.”项下方法，以马铃薯淀粉为.、.、.的处方比例分别制备片剂，照“.”项下方法进行溶出度考察，采用.溶出曲线相似度评价方法进行 值计算和评价。.硬脂酸镁用量：硬脂酸镁为润滑剂，为疏水性物料，其用量可能对溶出有影响。按照“.”项下方法制备片剂，以硬脂酸镁用量为.、.、.的处方比例分别制备片剂，照“.”项下方法进行溶出度考察，采用.溶出曲线相似度评价方法进行 值计算和评价。.处方工艺验证.优化处方的确定：按优化后的处方工艺进行中试批（批量 片）试制：称取马铃薯淀粉.（处方比例.）配制成淀粉浆备用，称取碳酸锂原料.（平均粒径在 ）、小麦淀粉.，置于湿法制粒机中混合，加入淀粉浆进行制粒，干燥后采用.筛网整粒，将干颗粒与硬脂酸镁.（处方比例.）混合 ，压片即得。.体外溶出行为的比较：取自制碳酸锂片，分别测定其在 .盐酸溶液、含.的 .醋酸盐溶液、含.的 .磷酸盐溶液中的溶出度，绘制溶出曲线，采用.溶出曲线相似度评价方法进行 值计算和评价。.体内药动学研究.给药方法与血样采集：采用单剂量口服四周期全重复交叉试验方案，名受试者按体重配对随机分为两组，周期间清洗期为 周。受试者于试验前一天晚上 点后禁食，试验当日抽取空白血样后，立即空腹口服碳酸锂片试验制剂或参比制剂 片（规格），温开水送服，服药 后方能饮水，后进食。于服药后.、.、.、取静脉血，立即移入肝素抗凝管种，分双份立即存于 贮存备测。.样品的测定，：采用电感耦合等离子体质谱仪对待检测样品进行检测。仪器测量参数与测定条件：高频功率.，等离子体气.，采样深度.，辅助气.，雾室温度 ，雾化气.，气流速.，补充气 稀释气 ，循环水温度 ，调谐模式 。样品的前处理：取血清样品于 转速涡旋，精密吸取 ，然后加 进行稀释，再 转速涡旋 ，静止 后，得到待检测样品。.统计学处理：根据所测锂离子血浓度时间数据，对碳酸锂片单片给药参比制剂和受试制剂的药代动力学参数进行配对 检验分析，并绘制平均血药浓度时间曲线。结果.溶出度方法学验证.专属性考察：空白辅料在.处的吸光度为，空白辅料不干扰检测。.线性关系考察：以吸光度响应值对浓度（）作标准曲线图，进行线性回归，.，大于.，符合要求。.滤膜吸附考察：供试品溶液过滤 、初滤液后与离心上清液相比，溶出度与离心样品溶出度变化值小于.，表明滤膜对碳酸锂几乎无吸附作用。.重复性考察：由不同人使用不同仪器测定 份供试品的溶出度，结果显示 份供试品溶液的 为.，重复性符合要求。.回收率考察：回收率在.之间，平均值为.，为.，准确度符合要求。.溶液稳定性考察：对照品溶液与其 溶液相比，锂元素浓度最大变化率为.，表明对照品溶液室温放置 内稳定；供试品溶液与其 溶液相比，锂元素浓度最大变化率为.，表明供试品溶液室温放置 内稳定。.处方工艺单因素考察.原料粒度：分别采用平均粒径为 和 的原料制备片剂。由图 所示溶出曲线可知，随原料粒径的增加溶出速度变慢，计算两者与参比制剂溶出曲线的 值分别为 和，原料平均粒径为 的样品与参比制剂溶出更相似。图 不同原料药粒径碳酸锂片与参比制剂的体外溶出曲线图海峡药学 年 第 卷 第 期.马铃薯淀粉用量：分别采用马铃薯淀粉为.、.、.的处方比例制备片剂，制粒过程中发现，马铃薯淀粉用量为.时，所制得软材较蓬松，且无明显颗粒，颗粒可压性一般，片剂溶出较快，与参比制剂溶出曲线 值为，不相似；马铃薯淀粉用量为.时，所制得软材较紧实，且有大量颗粒，颗粒可压性差，片剂溶出较慢，与参比制剂溶出曲线 值为；马铃薯淀粉用量为.时，所制得软材蓬松适当，有明显颗粒存在，压片可压性良好，与参比制剂溶出曲线 值为（见图）。图 不同马铃薯淀粉用量的碳酸锂片与参比制剂的体外溶出曲线图.硬脂酸镁用量：分别采用硬脂酸镁用量为.、.、.制备片剂，计算 者与参比制剂溶出曲线的 值分别为，硬脂酸镁用量为.的片剂溶出曲线与参比制剂最为相似。图 不同硬脂酸镁用量的碳酸锂片与参比制剂的体外溶出曲线图.处方工艺验证按优化后的处方工艺试制得三批中试产品（批号、），制备过程顺利。取样分别测定其在 .盐酸溶液、含.的 .醋酸盐溶液、含.的 .磷酸盐溶液中的累积溶出度，绘制溶出曲线（见图），并与碳酸锂片参比制剂的溶出曲线进行比较，溶出曲线的 值见表。图 自制制剂与参比制剂在 种介质中的体外溶出曲线.盐酸溶液；.含.的 .醋酸盐溶液；.含.的 .磷酸盐溶液表 自制制剂与参比制剂在 种溶出介质中的 值批号值.体内药动学研究根据