量提取3次,每次60min。表4水提正交方差分析表方差来源离均差平方和自由度F值显著性A1.13020.058P>0.05B56.61822.905P<0.05C0.73020.037P>0.05误差0.0062.4.2工艺验证:按上述确定的提取工艺条件,平行制备3份供试品溶液,检测其出膏率及有效成分含量,进行验证试验。结果显示,复方巴戟天健骨颗粒提取液干膏中丹酚酸B、淫羊藿苷、川续断皂苷Ⅵ的含量分别为0.22mg·g-1、0.21mg·g-1、0.36mg·g-1,RSD分别为1.06%、1.12%、1.11%,重现性好。3讨论3.1本实验在一个色谱条件同时测定多个组份〔5〕,方中主药巴戟天的主要成分巴戟天多糖未能在优选的色谱条件下实现有效的分离。淫羊藿、丹参、川续断作为复方巴戟天健骨颗粒处方中重要的三味中药,起到补益肝肾、活血化瘀、袪风除湿等作用,其主要成分丹酚酸B、淫羊藿苷、川续断皂苷Ⅵ药理作用也得到临床证实,具有改善微循环、纠正脂质代谢、促进骨细胞增殖、抗骨细胞凋亡等多种作用。以上三个成份同时在一个色谱条件下快速准确地测定含量,不仅大大减少了实验检测次数,还能更全面地反映工艺的优化情况。3.2前期做供试品溶液制备方法考察时,分别完成提取溶剂、提取方法、提取时间的单因素考察,发现用50%甲醇以超声提取1h所得复方巴戟天健骨颗粒的指纹图谱的色谱峰的数量和高度结果较优。前期做色谱条件考察时,完成了四个常用检测波长(210nm、246nm、160nm、283nm)的考察,通过比较色谱峰数目、峰形和峰强度,以及分离度等指标,发现不同检测波长对复方巴戟天健骨颗粒指纹图谱有显著影响,采用210nm检测波长所得复方巴戟天健骨颗粒的指纹图谱的色谱峰的数量和高度均优于246nm、260nm和283nm波长。参考文献〔1〕孙克民,王和鸣,王平,等.复方巴戟天合剂对激素性股骨头坏死大鼠模型血液流变学和血脂的影响〔J〕.中国中医骨伤科杂志,2011,19(5):1⁃3.〔2〕孙克民,王和鸣,胡娟,等.复方巴戟天合剂对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响〔J〕.福建中医药,2010,41(6):43⁃45.〔3〕孙克民,王和鸣,林久茂.复方巴戟天合剂对激素性股骨头坏死大鼠血管内皮生长因子表达的影响〔J〕.中国实验方剂学杂志,2011,17(7):117⁃120.〔4〕李文顺孙克民王和鸣-等.复方巴戟天合剂治疗股骨头缺血...