安徽医药AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal2023Feb,27(2)亚低温对缺血性脑卒中小鼠血脑屏障损伤保护作用钟超超,徐兴国,苗海航,乔峤,秦毅彬作者单位:南通大学附属医院麻醉科,江苏南通226001通信作者:秦毅彬,男,硕士生导师,研究方向为围术期重要脏器的保护,Email:572537172@qq.com基金项目:南通市科技发展计划项目(MS12020026)摘要:目的探讨亚低温对缺血性脑卒中小鼠血脑屏障的保护作用,寻找亚低温发挥保护作用的机制。方法选取由南通大学实验动物中心提供的SPF级别雄性C57/BL6小鼠54只,分为假手术组(n=18)和卒中组(n=36),卒中组分为亚低温组(n=18)和常温组(n=18)。卒中组在行大脑中动脉阻塞手术后对亚低温组小鼠予以亚低温处理,在口腔温度监测下维持小鼠温度为(34±0.5)℃,其他组术后均置于保温毯上正常复温。术后每日对各组神经功能进行评分,同时使用错步时间检测卒中后小鼠行为运动功能。于术后第3天处死小鼠,取梗死脑区行蛋白质印迹法(Westernblotting)检测血脑屏障黏附分子紧密连接蛋白(ZO-1),紧密连接跨膜蛋白(Claudin-5)的蛋白表达以判断血脑屏障损伤的程度。结果假手术组、亚低温组、常温组小鼠存活率分别为100%(18/18),94.44%(17/18),88.89%(16/18)。三组存活率比较,差异无统计学意义(χ2=53.72,P=0.122)。卒中组小鼠术后第1、2、3天神经功能评分[(2.8±0.2)、(2.6±0.3)、(2.4±0.3)分]明显高于假手术组[(0.6±0.04)、(0.5±0.03)、(0.4±0.01)分],差异有统计学意义(t=2.94,P<0.001;t=2.86,P<0.001;t=2.98,P<0.001);卒中组中,常温组小鼠术后第1、2、3天神经功能评分均明显高于亚低温组[(2.0±0.3)、(1.9±0.2)、(1.8±0.2)分],差异有统计学意义。卒中组小鼠术后第1、2、3天前后肢的平均错步比例(26.8%前、32%后;29.0%前、31.1%后;31.8%前、33.1%后)均高于假手术组(均为3%前、3%后),差异有统计学意义(χ2=29.05,P=0.002;χ2=28.76,P=0.003;χ2=26.42,P=0.005),且常温组小鼠术后第1、2、3天前后肢平均错步的比例高于亚低温组(16.6%前、16.9%后;18.6%前、17.9%后;20.8%前、19.9%后),差异有统计学意义(χ2=27.35,P=0.004;χ2=26.59,P=0.004;χ2=24.12,P=0.007)。存活的小鼠,脑卒中可以显著降低小鼠脑卒中脑组织中血脑屏障黏附分子ZO-1,Claudin-5的蛋白表达(t=2.54,P=0.001;t=2.46,P=0.003),亚低温处理组小...