分子植物育种，2023年，第21卷，第3期，第747-753页MolecularPlantBreeding,2023,Vol.21,No.3,747-753研究报告ResearchReport长春花茉莉酸受体CrCOI1的生物信息学分析与原核表达苗琪崔馨文周雅然于放王燕燕*大连工业大学生物工程学院,大连,116034*通信作者,wang_yy@dlpu.edu.cn摘要通过生物信息学方法对长春花茉莉酸受体CrCOI1氨基酸序列、结构域以及二级、三级结构进行分析，利用分子生物学方法构建重组质粒并进行原核表达。结果显示：CrCOI1编码516个氨基酸，为胞质定位，分子量为58.26kD，等电点pI为5.45，与番薯COI1蛋白的亲缘关系比较近，CrCOI1含有F-box结构域、多个LRR富集亮氨酸重复结构域以及转运抑制响应1结构域；该蛋白二级结构由50.97%α-螺旋、31.59%无规则卷曲、12.79%延伸链以及少部分β-转角(4.65%)组成；经SWISS-MODEL预测其三级结构显示，CrCOI1蛋白由α-螺旋和无规则卷曲组成，其中F-box的3个α-螺旋从蛋白的N端伸出便于结合配体。进一步地成功构建了重组表达质粒pET28a-CrCOI1，并经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21中实现异源表达，且发现经16℃、0.4mmol/LIPTG诱导至12h后蛋白表达量最高，具有时间依赖性。上述结果表明，我们成功构建了长春花茉莉酸受体CrCOI1的重组表达质粒，实现大肠杆菌中的表达，并对其进行了序列以及结构分析。这为研究CrCOI1的功能以及通过其介导茉莉酸信号调控植物生长发育以及代谢产物合成提供一定依据。关键词长春花(Catharanthusroseus);茉莉酸受体COI1;序列分析;结构预测;原核表达BioinformaticsAnalysisandProkaryoticExpressionofJasmonicAcidReceptorCrCOI1fromCatharanthusroseusMiaoQiCuiXinwenZhouYaranYuFangWangYanyan*SchoolofBiologicalEngineering,DalianPolytechnicUniversity,Dalian,116034*Correspondingauthor,wang_yy@dlpu.edu.cnDOI:10.13271/j.mpb.021.000747AbstractTheaminoacidsequence,domainandsecondaryandtertiarystructureofjasmonicacidreceptorCrCOI1wereanalyzedusingthebioinformaticsmethod.Therecombinantplasmidwasconstructedusingthemolecularbiologymethod,andtheprokaryoticexpressionwasperformed.TheresultsdemonstratedthattheCrCOI1encodes516aminoacids,molecularweightis58.26kD,andtheisoelectricpointpIis5.45.PhylogenetictreeanalysisrevealedthatitwascloselyrelatedtoCOI1fromIpomoeabatatas.TheconserveddomainanalysisindicatedthatCrCOI1contained...
