三阴性乳腺癌组织中ZNF5...预后及腋窝淋巴结转移的关系_蒋楠.pdf

现代医学Modern Medical Journal2023，Apr;51(4):462-468 收稿日期2023-01-01 修回日期2023-04-12 基金项目河北省卫生健康委科研基金项目青年科技课题(20210771)作者简介蒋楠(1985 )，男，河北保定人，主治医师，医学硕士。E-mail:jiangnan7450163 com 通信作者马杰E-mail:tjmajie2022163 com 引文格式蒋楠，王雅琪，陈晶晶，等 三阴性乳腺癌组织中 ZNF545 表达与预后及腋窝淋巴结转移的关系 J 现代医学，2023，51(4):462-468 论著 三阴性乳腺癌组织中 ZNF545 表达与预后及腋窝淋巴结转移的关系蒋楠，王雅琪，陈晶晶，崔志超，王宏，马杰(唐山市人民医院 乳腺外一科，河北 唐山063001)摘要目的:探讨三阴性乳腺癌组织锌指蛋白 545(ZNF545)的表达与预后及腋窝淋巴结转移的关系。方法:采用免疫组织化学染色法检测 107 例三阴性乳腺癌患者癌组织中 ZNF545、Wnt/-catenin 信号通路相关蛋白(-catenin 和 C-myc)表达水平。采用 Logistic 多因素分析影响三阴性乳腺癌患者腋窝淋巴结转移的影响因素。Kaplan-Meier 法用于三阴性乳腺癌患者预后的单因素分析，Cox 比例风险回归模型用于三阴性乳腺癌患者预后的多因素分析。结果:三阴性乳腺癌组织中 ZNF545 低表达者 50 例(46 7%)。ZNF545 低表达患者腋窝淋巴结转移高于 ZNF545 高表达患者(2=4 709，P=0 030)，ZNF545 表达水平与-catenin、C-myc 表达水平均呈负相关(r 值分别为 0 553 和 0 551，均 P 0 001)。ZNF545 低表达患者的 5 年总生存(OS)率(58 0%)低于 ZNF545 高表达患者(84 2%)，差异有统计学意义(2=9 839，P=0 002)。多因素分析显示，ZNF545 低表达(O=2 462，95%CI 1 186 5 750，P=0 017)、组织学分级低(O=2 650，95%CI 1 101 4 924，P=0 027)及有淋巴结转移(O=6 307，95%CI 2 651 16 351，P 0 001)是三阴性乳腺癌患者预后的独立危险因素。ZNF545 低表达是三阴性乳腺癌患者腋窝淋巴结转移的独立危险因素(O=2355，95%CI 1 080 5 134，P=0 031)，且 ZNF545 表达水平与腋窝淋巴结转移数目呈负相关(r=0.324 1，P=0 013)。结论:ZNF545 低表达是三阴性乳腺癌患者预后和腋窝淋巴结转移的独立危险因素，其可能通过影响 Wnt/-catenin 信号通路相关蛋白参与三阴性乳腺癌的进展。关键词锌指蛋白 545;三阴性乳腺癌;淋巴结转移;预后 中图分类号392 3 文献标志码A 文章编号1671-7562(2023)04-0462-07doi:10 3969/j issn 1671-7562 2023 04 006elationship between ZNF545 expression and prognosis and axillarylymph node metastasis in triple negative breast cancerJIANG Nan，WANG Yaqi，CHEN Jingjing，CUI Zhichao，WANG Hong，MA Jie(Department of Breast Surgery，Tangshan Peoples Hospital，Tangshan 063001，China)AbstractObjective:To investigate the relationship between zinc finger protein 545(ZNF545)expression andprognosis and axillary lymph node metastasis in triple negative breast cancer(TNBC)Methods:The expressionlevels of ZNF545 and Wnt/-catenin signaling pathway related proteins(-catenin and C-myc)in 107 cancerissues of TNBC patients were detected by immunohistochemical staining Logistic multivariate analysis was used toanalyze the influencing factors of axillary lymph node metastasis of TNBC Kaplan-Meier method was used to264analyze the single factor survival of patients with TNBC Cox proportional hazard regression model was used toanalyze the independent prognostic factors of TNBC patients esults:There were 50 cases(46 7%)with lowexpression of ZNF545 in TNBC The axillary lymph node metastasis rate of ZNF545 low expression group washigher than that of ZNF545 high expression group(2=4 709，P=0 030)The expression level of ZNF545 wasnegatively correlated with the expression levels of-catenin and C-myc(r=0 553 and 0 551，respectively，P 0 001)The 5-year overall survival(OS)rate of ZNF545 low expression group(58 0%)was lower than that ofZNF545 high expression group(84 2%)，and the difference was statistically significant(2=9 839，P=0 002)Multivariate analysis showed that lower expression of ZNF545(O=2 462，95%CI 1 186 5 750，P=0 017)，lower histological grade(O=2 650，95%CI 1 101 4 924，P=0 027)and lymph node metastasis(O=6 307，95%CI 2 651 16 351，P 0 001)were independent prognostic risk factors for patients with TNBC Lowexpression of ZNF545 was an independent risk factor for axillary lymph node metastasis in patients with TNBC(O=2 355，95%CI 1 080 5 134，P=0 031)The expression level of ZNF545 was negatively correlated with thenumber of axillary lymph node metastases(r=0 324 1，P=0 013)Conclusion:Low expression of ZNF545，which may be involved in the process of TNBC by affecting Wnt/-catenin signaling pathway related proteins，is anindependent risk factor of prognosis and axillary lymph node metastasis in patients with TNBC Key wordszinc finger protein 545;triple negative breast cancer;lymph node metastasis;prognosis与其他类型的乳腺癌相比，三阴性乳腺癌更容易复发和转移1。寻找评价三阴性乳腺癌转移的新型分子生物学标志物是临床和基础研究的重点内容。启动子区 CpG 岛(CGI)的高甲基化是肿瘤抑制基因沉默的一种机制，可能发生在肿瘤早期，并已被用作三阴性乳腺癌诊断的新的肿瘤标志物2。锌指蛋白(ZNF)的异常表达有助于各种癌症的发生。不同类型的 ZNF显示出巨大的生物功能多样性。约三分之一的 ZFP包含 kruppel 相关盒(KAB)基序，超过一半的 KABZFP 聚集在区域 19q13。KAB ZFPs 在调节细胞增殖、凋亡、分化和肿瘤发生中发挥重要作用。锌指蛋白545(ZNF545)是 Dapper 的同源物，位于染色体区域19q131，最初被鉴定为 Wnt/-catenin 和 JNK 信号通路的去水平(Dvl)相关拮抗剂3。ZNF545 已显示在几种肿瘤中表达减少，ZNF545 表达异常与肿瘤患者预后不良相关4-5。然而，ZNF545 在三阴性乳腺癌发病机制中的表达和生物学功能尚不清楚。本研究采用免疫组织化学染色法检测三阴性乳腺癌组织中 ZNF545表达情况，分析其与临床病理特征和腋窝淋巴结转移的关系，基于 Wnt/-catenin 信号通路背景进一步证明ZNF545 在三阴性乳腺癌中的生物学功能。1资料与方法1 1一般资料收集 2015 年 1 月至 2017 年 12 月在唐山市人民医院进行手术切除的 107 例三阴性乳腺癌患者的临床资料及病理标本。纳入标准:(1)年龄 18 岁;(2)组织病理学检查证实为浸润性导管癌;(3)临床资料完整。排除标准:(1)合并其他部位肿瘤;(2)术前接受过放疗或化疗;(3)临床资料不全。本研究经医院伦理委员会批准(MYY-LLKS-2020-052)。1 2免疫组织化学染色法检测组织切除三阴性乳腺癌患者肿瘤组织后，将其包埋在石蜡中，切片 5 m，并置于聚 L-赖氨酸玻片上。将组织切片在65 下孵育4 h，用二甲苯脱蜡，不同密度的乙醇再水合，并在 3%H2O2中孵育 10 min，以消除内源性过氧化物酶活性。用 10 mmolL1柠檬酸钠缓冲液(pH=6 0)重 新 检 测 抗 原，并 与 兔 抗 ZNF545(Abcam 公司，1 200，ab228946)、兔抗-catenin(美国圣克鲁斯公司，1 2 000)和兔抗 C-myc(中国中山金桥公司，1 100)在 4 下孵育过夜。然后，将切片用磷酸波形蛋白缓冲盐水(PBS)洗涤 3 次，在 37 下与二级抗体孵育 30 min。用 PBS 洗涤 3 次后，将切片与 3，30-二氨基联苯胺(DAB)孵育 1 min，然后用苏木精孵育3 min。最后，将切片脱水并密封。每张切片随机取 10 个视野，每个视野计数 100 个细胞，根据细胞的染色强度及阳性细胞比例判断目的蛋白表达情况。染色强度评分:0 分(阴性)，1 分(浅黄色)，2 分(棕黄色)，3 分(棕褐色)。阳性细胞比例评分:1 分(0%9%)，2 分(10%49%)，3 分(50%79%)，4 分(80%100%)。将两项