今日畜牧兽医1xperimentalstudyononlineE实验研究一株动物源乳酸菌的胞外产物免疫原性研究刘少杰1，杨红亚1，张异岗1，段美玲4，于莉莉1，张金朝1，康梓哲2，康社强2，陆安1，3（1.石家庄九五堂生物科技有限公司052160；2.河北诺达生物科技（赞皇）有限公司051230；3.石家庄燕科生物科技有限公司050200；4.青岛市市级公园管理服务中心266033）摘要：以乳酸菌的胞外产物（ECP）为此次试验研究对象，经过对L-2ECP的提取，制备ECP疫苗，给小鼠免疫后，通过脾淋巴细胞增殖试验、间接ELISA测血清IgG水平以及致病菌攻菌保护试验，来对L-2ECP的免疫原性进行探究。结果表明：ECP疫苗不仅可以刺激小鼠机体产生细胞免疫，还可以诱导产生较高水平的体液免疫，降低致病性大肠杆菌对小鼠的致死率。结论：L-2ECP具有较好的免疫原性，可刺激小鼠机体同时产生细胞免疫和体液免疫，对小鼠有一定的相对保护效果。关键词：乳酸菌；胞外产物；免疫原性乳酸菌作为一类能产乳酸，革兰氏阳性，兼性厌氧的益生菌，其种类繁多，被广泛应用于人的食品行业、动物饲料添加剂、日化用品以及保健品当中。乳酸菌作为消化道常在菌群之一，它与人和动物的健康息息相关[1]，据有关报道乳酸菌可以促进动物机体的消化吸收能力，在肠道中具有抢占作用位点从而来抑制有害菌的生长使肠道菌群达到稳定的生理活性。除此之外还有学者研究表明，乳酸菌不仅可以稳定机体的肠道微生态环境，还可以帮助机体增强免疫防御能力，激活巨噬细胞、促进淋巴细胞增殖从而提高机体的特异性和非特异性免疫，从而达到抗炎、防癌变的效果[2]。胞外产物（Extracellularproducts,ECP）是指细菌在培养过程中分泌出来的代谢产物和活性物质的总称[3]，其主要成分包括脂类、有机酸、糖类、生物碱、细菌素等，目前已有较多关于致病菌ECP的研究，包括大肠杆菌、巴氏杆菌、单胞菌等，研究表明ECP具有不同程度的致病性以及良好的免疫原性，可以为动物机体提供可靠的免疫保护屏障[4]，本试验以乳酸菌ECP为试验材料，对其免疫保护效果进行评价以及作用机理进行初步探索。1材料与方法1.1试验材料乳酸菌分离株L-2分离于鸡肠道中，致病性大肠杆菌分离株EC-CL分离于病死狐肝脏内，L-2、EC-CL都经基因序列比对鉴定为乳酸菌、大肠杆菌。试验动物昆明鼠，购于北京维通利华试验动物技术有限公司，试验前经过预饲养未发现异常情况。主要试剂仪器：MRS肉汤青岛海博营养肉汤青岛海博BCA试剂盒Thermo弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂SIGMAM...
