中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２０９７—２００８入出境人员猴痘检验规程犆狅犱犲狊犳狅狉犲狓犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犿狅狀犽犲狔狆狅狓犪狋犲狀狋狉狔犲狓犻狋狆狅狉狋２００８０７１７发布２００９０２０１实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布前言本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中华人民共和国惠州出入境检验检疫局、中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所。本标准主要起草人：幸芦琴、李小波、钟玉清、阮力、师永霞、郭波旋、黄吉城、洪烨、相大鹏、郑夔。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。Ⅰ犛犖／犜２０９７—２００８入出境人员猴痘检验规程１范围本标准规定了入出境口岸入出境人员猴痘病毒的实验室检验方法与结果报告，包括样本采集、处理，检验程序、方法，结果判定及报告。本标准适用于入出境口岸猴痘病毒的实验室检验。２术语和定义下列术语和定义适用于本标准。２．１猴痘犿狅狀犽犲狔狆狅狓由猴痘病毒（ｍｏｎｋｅｙｐｏｘｖｉｒｕｓ）引起的人兽共患传染病，临床主要表现有高热、头痛、背痛、全身不适、咳嗽、淋巴结肿大，伴全身出现类似天花的皮疹，偶尔出现腹痛。２．２实时荧光犘犆犚狉犲犪犾狋犻犿犲犳犾狌狅狉犲狊犮犲狀犮犲犘犆犚实时荧光ＰＣＲ方法是在常规ＰＣＲ的基础上，加入一条特异性的荧光探针。该探针为一段寡核苷酸，两端分别标记一个报告基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；ＰＣＲ扩增时，利用犜犪狇酶的５’３’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭基团分离，从而荧光监测系统可以接收到荧光信号，即每扩增一条ＤＮＡ链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的积累与ＰＣＲ产物形成完全同步。２．３犆狋值犮狔犮犾犲狋犺狉犲狊犺狅犾犱每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。３仪器和设备需要如下仪器设备。———Ｒｏｃｈｅ荧光定量ＰＣＲ仪；———生物安全柜；———高压灭菌器；———普通冰箱；———普通台式离心机（带密封的离心安全杯）；———冷冻离心机（带密封的离心安全杯）；———研钵；———涡旋器。４试剂４．１核酸提取试剂：使用ＴａｋａＲａ基因组ＤＮＡ提取试剂盒１），详见说明书。４．２ＨｏｔＳｔａｒｔＭｉｘｍａｓｔｅｒ反应试剂盒购自Ｒｏｃｈｅ公司１）。１）由指定单位提供...
