SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1358.1-2004马传染性贫血补体结合试验方法Protocolofcomplementfixationtestforequineinfectiousanaemia2004-06-01发布2004-12-01实施中华人民共和匡国家质量监督检验检疫总MSN/T1358.1-2004oli吕本标准的附录A为规范性附录，附录B为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国山东出人境检验检疫局。本标准主要起草人:王浩、柳炳兰、巫剑平、曲贵威。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。SN/T1358.1-2004马传染性贫血补体结合试验方法范围本标准规定了马传染性贫血补体结合试验方法。本标准适用于马传染性贫血抗体水平的检测。2仪器设备2.1培养箱。2.2冰箱。2.3恒温水浴箱。2.4离心机，离心管。2.5天平(感量0.1g),2.6平皿:规格90mmx15mm,2.7三角烧瓶(50mL-250mL),2.8试管、试管架:规格12X37mm,10X100mm,2.9吸管:规格1mL,5mL,10mL,2.10200pL可调微量移液器和吸头。3材料3.1试剂:氯化钠、氯化钙、氯化镁、葡萄搪、拘椽酸钠、巴比妥钠、巴比妥、明胶均为分析纯3.2溶液的配制:见附录A3.3抗原:检测用标准抗原应用同一批号的两种抗原，即V抗原(接毒抗原),C抗原(对照抗原)。3.4标准阳性血清及阴性血清:由出售抗原的药厂同时提供。3.5被检血清:参见附录B,3.6补体:参见附录B,3.7溶血素由生物药品厂购人，保存于冰箱中备用(由于溶血素加有等量甘油防腐，故使用时应将甘油扣除，即2mL中溶血素的实量为1mL),3‘8红细&A参n附录B预备试验4.1补体效价测定将新鲜补体或冻干补体，按表比例稀释成一系列不同浓度待用。表1补体稀释法单位为毫升17G}}1234567891011补体GVB液'BY:丫'3Y:丫'3Y7>-,'Y37Y3:丫7>-,:SN/T1358.1一2004按表2进行测定选出该批抗原补体效价和使用的管号，继续使用该批抗原补体时可不再测定.表2补体测定表单位为毫升誉契鬓1234口678910111:1稀释的马血清C抗原各种稀释度补体005005010，050，050.1005005Otl0，050.050.10.050050.10，050.050.10.050050.10，050.05010.050.050.10050.050.10.0500501置普通冰箱(4℃)过夜(16h~18h)4%致敬红细胞0.10l0.10.1010.10.10.10‘1010.1置37℃~38℃水浴箱30min，待红细胞沉淀后判定结果全溶全溶全溶全溶全溶全溶全溶部溶部溶部溶部溶从表2中可以看出，第一管至第七管皆呈显完全溶血，则该批补体效价为第七管的稀释度。在补体用于受检血清时应选择第五管至第十一管，即用C抗原列有三个管完全溶血的七个稀释浓...
