gb16882-1997.pdf

【GB 168821997】动物鼠疫监测标准 动物鼠疫监测标准 前 言 鼠疫是典型的自然疫源性疾病。至 1995 年底，已判定的自然疫源地分布于我国 17 省(区)234 个县(市、旗)。为贯彻执行中华人民共和国传染病防治法，通过对鼠疫动物病的监测，掌握疫情动态，考核控制效果，为疫情预测预报及制定防治对策提供科学依据，特制定本标准。本标准在研制过程中，充分运用了我国在鼠疫监测方面的理论研究成果和现场实践经验，使其在有关章节中得到表达。本标准由中华人民共和国卫生部提出。本标准负责起草单位：全国鼠疫布氏菌病防治基地；参加起草单位：内蒙古自治区流行病防治研究所、青海省地方病防治研究所、云南省流行病防治研究所。本标准起草人：李书宝、刘纪有、李铁华、李超、马永康。本标准由卫生部委托技术归口单位中国预防科学院负责解释。1 范围 本标准规定了我国各类鼠疫疫源地主要宿主、媒介、病原体及血清学各项监测标准，监测的质量控制及其技术方法。本标准适用于喜马拉雅旱獭、灰旱獭、长尾旱獭、蒙古旱獭，达乌尔黄鼠、阿拉善黄鼠、长尾黄鼠，长爪沙鼠，布氏田鼠，大绒鼠及家鼠(黄胸鼠)鼠疫疫源地的监测。监测以县(市、旗)为单位。2 引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB 159781995 人间鼠疫疫区处理标准及原则 GB 159911995 鼠疫诊断标准 3 定义 本标准采用下列定义。3.1 鼠疫自然疫源地：在动物鼠疫流行过程中，鼠疫菌寄生于特定的宿主，主要通过媒介蚤在宿主和其他动物间传播，不依赖于人类，长期在自然界循环延续，并能酿成人间鼠疫流行，这种现象称之鼠疫自然疫源性。有自然疫源性的地方称为鼠疫自然疫源地。3.2 动物鼠疫监测：在鼠疫疫源地内定期定量地监测动物鼠疫流行动态，观察宿主动物及媒介昆虫生态，研究动物鼠疫感染、传播、保存规律及地理分布特征。3.3 主要宿主：能保证鼠疫菌在特定的生态系中长期延续的物种。3.4 疫区：鼠疫在人群或动物间发生或流行的地区。3.5 疫点：发生人或动物鼠疫的局部地区。3.6 疫鼠：自然感染并从其体内分离出鼠疫菌的啮齿动物称为疫鼠。3.7 聚集性：动物鼠疫在时间、空间或同时在时间与空间上成簇出现。3.8 最适生境：最适合宿主动物栖息生存的自然环境。3.9 流动监测点：监测范围不小于 2500ha，主要开展自死鼠检菌及血清流行病学监测，并重点掌握主要宿主及媒介昆虫数量，监测时间一般为 20 天。3.10 固定监测点：监测范围为 10000ha，对地理生境的变化、宿主动物、媒介昆虫的数量及鼠疫菌进行长期的系统的观察，掌握动态，研究鼠疫动物病流行及保存规律。每点监测时间为 35 年。4 动物鼠疫监测标准 4.1 黄鼠(含达乌尔、阿拉善、长尾黄鼠，下同)疫源地监测时间49 月；流动监测点范围 2500ha，固定监测点范围 10000ha；以地貌、植被、黄鼠数量三项指标划分生境，绘制 110000比例尺生境分布图。按各类生境面积 0.5比例分层抽样，4 月与 7 月以，日一公顷弓形夹法各监测一次黄鼠数量；体蚤抽样每旬至少检活黄鼠体 20 只；动物检菌固定点检 300500 只，蚤类检菌 90 组以上；血清学检测血清占预测鼠数不少于 8。4.2 旱獭(含喜马拉雅、灰、长尾、蒙古早獭，下同)疫源地 监测时间 410 月初；流动点 5000ha，固定点 22500ha；以地貌、植被、旱獭数量三项指标划分地理生境，并绘制 110000比例尺生境图。按各类生境面积 0.5比例分层抽样监测旱獭数量。流动监测点用路线法：选有代表性的路线 5 条，每条路线长 5km，视野宽 50m，步行每小时 3km，骑马每小时 5km，以路线长度乘视野宽度求调查面积，最后计算出一公顷旱獭密度，每月或 5、7 月各调查一次。旱獭体蚤抽样每旬至少梳检旱獭 30 只；早獭检菌以病、死獭为主，旱獭密度在 0.1 只/ha，抽检旱獭数量的 10，密度在 0.2 只/ha以上抽检早獭数量的 5；蚤类检菌不少于 250 组，血清学检测以自然村牧点为基础，牧区抽犬血清的 5，农区抽犬血清的 20。蒙古旱獭疫源地主要以旱獭数量及血清学监测为重点。4.3 长爪沙鼠疫源地 监测时间：45 月，1011 月。流动监测点 2500ha，固定监测点 10000ha，以地貌、植被、土壤、长爪沙鼠数量 4 项指标划分生境，绘制 1：10000 比例尺地形图。流动点按 0.5比例，固定点按 0.20.5比例分层抽样，以一公顷为单元昼夜弓形夹法调查长爪沙鼠数量。体蚤抽样每点每旬至少检活体 20 只，全年 100 只以上；宿主检菌重点寻找自死鼠。捕获鼠检菌全年每点不少于 500 只，所获蚤类全部检菌；每点检测鼠类血清 200500 份。4.4 布氏田鼠疫源地 监测时间：45 月，89 月。监测范围不少于 10000ha，检索控制范围 100000ha。生境划分参照长爪沙土鼠。按各类生境面积 0.2比例分层抽样，以一日一公顷布夹法监测布氏田鼠数量。体蚤抽样每点梳检布氏田鼠 100 只；宿主检菌应以寻找自死鼠为主，每点全年检验鼠类 300 只以上，所获蚤全部检菌；每点检测布氏田鼠血清 100份以上。4.5 大绒鼠疫源地 监测时间：112 月，以 38 月、12 月为重点。固定、流动监测点范围 2000ha，以县为单位每年搞固定点一个，流动点 24 个。宿主数量监测固定点每月抽样一次，流动点每季抽样一次，每次用笼夜法布放鼠笼 100 个，连下三夜，计算扑获率。体蚤抽样每种生境抽取大绒鼠、齐氏姬鼠 20 只以上；宿主检菌每个固定点全年不少于 500只，全年蚤类检菌 100 组以上；注意搜集疫源地猎、牧狗血清和野生动物(狐、獾、鼬类等)血清，检测各种鼠类和指示动物血清 150 份以上。4.6 家鼠(黄胸鼠)疫源地 监测时间：112 月。广东 35 月，福建 410 月，滇西 59月为重点。固定点监测范围 2000ha，流动点监测范围 5001000ha，在此范围内固定点选 100200 户村屯(寨)，流动点选 50100 户村屯(寨)进行监测。每县搞一个固定点、24 个流动点；家栖鼠类调查每月选代表性房间 100 间，每间布放鼠夹(笼)一个，连下三天；野外夜行鼠以 5m夹线法布夹 100 个，连下二夜，分别计算室内及室外捕获率。体蚤抽样每月扑活家鼠(黄胸鼠)20 只；固定点动物检菌 300500 只，蚤检菌不少于 100 组；血清学每月检测血清 50100 份，全年 5001000 份。附录A (标准的附录)主要宿主动物密度调查方法 A1 黄鼠密度调查方法 A1.1 调查时间：每年 4 月和 7 月分别进行两次调查。A1.2 抽样方法：按监测区各生境面积 0.5比例分层抽取样方，样方间距大于 200m。A1.3 样方测量：每一样方以一公顷为单位(100m100m)，四角做出标志。A1.4 查洞：在样方内 5m间距查洞，发现洞后作好标记。A1.5 布夹：在黄鼠日出洞前，用坑式布夹法，在布夹时间内每2h巡视一次。A1.6 计算：按式(A1)计算。A2 旱獭密度调查方法 A2.1 调查时间：每年 5 月和 7 月各调查一次。A2.2 抽样方法：按监测区各生境面积 0.5比例分层抽取样地与路线。A2.3 调查方法：A2.3.1 目测法 在监测区内选择有代表性的生境样地 510 个，每个样地 510ha。首先在样地周围作好标志，确定样地范围，选择距样地 100200m处，借地理屏障或掩体做掩护，在旱獭日活动频繁时间，用望远镜观察样地内的旱獭数，连续观察 2 天，每天 2 次。以一次的最高值计算密度。A2.3.2 路线法 在监测区内，选择有代表性的监测路线 510 条，每条线 10ha。路线视野宽度 50100m，路线距离按步行 3km/h，骑马 5km/h。A3 长爪沙鼠和布氏田鼠密度调查 A3.1 调查时间：长爪沙鼠和布氏田鼠在春秋两季各监测一次。A3.2 抽样面积：在监测区内按生境面积 0.5比例分层抽样，样方以 1ha(100m100m)为单元。A3.3 样方测量与查洞：同黄鼠(A1.3，A1.4)。A3.4 布夹查洞时发现的鼠洞，全部堵塞，翌日早 78 时，对盗开的洞口，每个洞口布夹一盘，布夹时间为 24h。白天每 2h巡视一次，黄昏与拂晓各巡视一次，巡视时取下扑到的鼠并将鼠夹在原洞口重新布夹，连续扑打。A3.5 鼠密度：按式(A4)计算。A4 野外夜行鼠密度调查 A4.1 调查的夹(笼)次数：以月为单位，选择有代表性的 13种生境，每种生境布夹(笼)100 盘(个)/次，其中大绒鼠疫源地每次连续布放 3 天，家鼠疫源地连续布放 2 天。A4.2 扑鼠工具：夹(笼)型号要统一。A4.3 诱饵：板夹统一用白面(植物食用油)油饼，鼠笼用油条或红薯，每块 35mg。A4.4 布放方法：采用 5m夹(笼)线法布放，夹(笼)行间距要超过200m，夹嘴和笼口方向要一致。A4.5 布放时间：日落后布夹，日出前收回，在布夹和笼的时间内遇到风雨大，不能计算扑获率。A4.6 扑获率：按式(A5)计算。A5 家栖鼠类密度调查 A5.1 调查数量：在监测区内，每月选择一个有代表性的村(寨)，在村(寨)选择 100 间房子(包括仓房)，每间房子布放夹(笼)一盘(个)。A5.2 扑鼠工具：同野外夜行鼠。A5.3 诱饵：同野外夜行鼠。A5.4 布放时间及方法：连续布放 4872h/次，每天早晚各巡视一次，取下扑获鼠，更换诱饵。A5.5 扑获率：按式(A6)计算。附录B (标准的附录)鼠体蚤指数调查方法 B1 调查数量 各类鼠疫自然疫源地在监测期间内，每旬随机抽取 20 只活体主要宿主动物进行检蚤。B2 调查方法 扑获的活体主要宿主动物，单只装袋，在检蚤室用乙醚麻醉后，用篦子或毛刷梳蚤，获得蚤进行鉴定分类，以同一宿主，同一方向，同一种类分组送检。B3 计算 附录C (标准的附录)间接血凝试验方法 C1 操作方法 将小试管排列在试管架上，标明管号，向第一管加入 0.9mL稀释剂，以后每管各加 0.5mL。取被检血清 0.1mL，加入第一管中，混匀后行倍比稀释，最后一管取 0.5mL弃去。再用 1mL刻度吸管，向各管滴加 2.5F1抗原致敏血球一滴(0.05mL)，振荡混匀血球，置 37温箱或室温 23h观察结果，疑似材料做 6 管，每批试验应投稀释剂0.5mL2.5F1抗原致敏血球一滴作对照。C2 结果判定 红血球在管底呈不均匀分布，边缘呈翻伞状或不整齐的粗糙型，为阳性结果。阳性结果又按红血球在管底部分及边缘粗糙程度划分为：C2.1：凝集紧密，凝集物布满管底，有明显的折边，当抗体过量时，则凝集成疏散的花团状。C2.2：凝集比较紧密，凝集物布满管底，呈圆盘状无折边出现。C2.3：血球不完全凝集，管底呈整齐的圆圈，圈内外均有明显的血球凝集。C2.4：不凝集的血球较多，沉于管底，呈现整齐的圆圈，圈外有很少的凝集血球。C2.5：血球不凝集，沉于管底，呈整齐的圆圈。试管法以“”为间接血凝试验阳性界限。红血球在管底呈致密的纽扣状，边缘光滑整齐，或呈现一个狭小的圆圈，为阴性结果。附录D (标准的附录)鼠疫间接血凝试验质控标准 D1 检验材料标准 所用玻璃器材清洗干燥灭菌，量器标定合格，诊断用F1抗原，F1致敏血球、稀释剂(pH6.97.1)，离子浓度 0.15mol/L NaCl和鼠疫诊断血清等统一方法制备，质量检定合格，于 4保存。D2 血清样本的采集和保存标准 采血及分离血清注意无菌，防止溶血及污染，血清不少于 0.5mL，初筛试验被试血清可不灭活和吸收，血清应尽快用于试验，不能立即检验时需加叠氮化钠或硫柳汞(最终浓度前者 0.1，后者 0.01)或冷冻保存，但不能超过半个月。D3 质控血清(内控样)的制备标准 以微量注射器取10L鼠疫诊断血清加入9.9mL同源的正常血清，充分混匀，然后以微量注射器准确取其