中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验菌落总数测定MicrobiologicalexaminationoffoodhygieneDetectionofaerobicbacterialcountGB4789.2一94代替GB4789.2-841主肠内容与适用范围本标准规定了食品中菌落总数的测定方法。本标准适用于食品中菌落总数的测定.2术语菌落总数是指食品检样经过处理,在一定条件下培养后(如培基成分、培养温度和时间,pH,需氧性质等),所得1mL(g)检样中所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果,只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态,以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。3引用标准GB4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂4设备和材料4.1温箱:36士10Co4.2冰箱:0-4'C.4.3恒温水浴:46士1C,4.4天平。4.5电炉。4.6吸管。4.7广口瓶或三角瓶:容量为500ruL,4.8玻璃珠:直径约5mm,4.9平皿:直径为90mm,4.10试管。4.1,放大镜。4.12菌落计数器。4.13酒精灯。4.14均质器或乳钵。4.15试管架。中华人民共和国卫生郎1994一03一18批准1994一09一01实施GB4789.2一9416灭菌刀或剪子。1了灭菌镊子。月﹃月﹃5培养基和试荆5.1营养琼脂培养基:按GB4789.28中4.7规定。5.2磷酸盐缓冲稀释液:按GB4789.28中3.22规定。5.3生理盐水。5.475%乙醉6检验程序菌落总数的检验程序如下。了操作步驻了.1检样稀释及培养7.1.1以无菌操作,将检样25g(或mL)剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1e10的均匀稀释液。固体检样在加入稀释液后,最好置均质器中以8000^-10000r/min的速度处理1min,做成1:10的均匀稀释液。7.1.2用1mL灭菌吸管吸取1,10稀释液ImL,沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液),振摇试管,混合均匀,做成1:10。的稀释液。7.1.3另取1mL灭菌吸管,按上条操作顺序,做10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次,即换用1支1ml.灭菌吸管。7.1.4根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计,选择2^-3个适宜稀释度,分别在做10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。7.1.5稀释液移入平皿后,应及时将凉至46℃营养琼脂培养基(可放置子46士1℃水浴保温)注人平皿GB4789.2一94约15mL,并转动平皿使混合均匀。同时将营养琼脂...