中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验GB4789.14一94蜡样芽胞杆菌检验代替GB4789.14--84MicrobiologicalexaminationoffoodhygieneExaminationofBacilluscereus1主题内容与适用范围本标准规定了蜡样芽胞杆菌的检验方法。本标准适用于食品和食物中毒样品中蜡样芽胞杆菌的检验。2引用标准GB4789.2食品卫生微生物学检验菌落总数测定GB4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3设备和材料3.1温箱:36士10C,3.2普通冰箱。3.3显微镜。3.4恒温水浴46士10C。3.5天平。3.6电炉。3.7吸管:1mL,10mLa3.8载玻片。3.9均质器或乳钵。3.10L型涂布棒。3.11灭菌刀，剪，镊子。3.12三角瓶:容量500mL,4.1培养墓和试荆肉浸液肉汤培养基:GB4789.28中4.1.:.;酪蛋白琼脂培养基;GB4789.28中4.65.动力一硝酸盐培养基:GB4789.28中4.72,缓冲葡萄糖蛋白陈水:GB4789.28中3.4.血琼脂培养基:GB4789.28中4.6.3%过氧化氢溶液。甲蔡胺一乙酸溶液。月﹃叹dl卜U7夕.…月乌Jq月叼.q中华人民共和国卫生郎1994一03一18批准1994一09一01实施GB4789.14一944.8对氨基笨磺酸一乙酸溶液。4.9革兰氏染色液:GB4789.28中2.204.10甘露醇卵黄多粘菌素(MYP)琼脂培养基:GB4789.28中4.64.4.11o.530碱性复红染色液:GB4789.28中2.8,4.12木糖一明胶培养基;GB4789.28中4.66.5检验程序蜡样芽胞杆菌检验程序如下:6操作步骏6.1菌数测定以无菌操作将检样25g(mL)(按GB4789.2测定)，用灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液做成10-1-10-5的稀释液。取各稀释液0.1mL，接种在两个选择性培养基—甘露醇卵黄多粘菌素(MYP)琼脂培养基上，用I形棒涂布于整个表面，置36士10C温箱培养1220h后选取适当菌落数的平板进行计数，蜡样芽胞杆菌在此培养基上的菌落为粉红色(表示不发酵甘露醇)，周围有粉红色的晕(表示产生卵磷脂酶)。计算后，从中挑取5个此种菌落做证实试验。根据证实为蜡样芽胞杆菌的菌落数计算出该平板上的菌落数，然后乘其稀释倍数，即得每克(或毫升)样品中所含蜡样芽胞杆菌数，例如MYP平板的可疑菌落为25个，取5个鉴定，证实为4个，乘上稀释倍数(如10")，再乘上1g(或mL)检样数(取的是。.1mL样)则为:25X4/5X104X10三2X1066.2分离培养取检样或稀释液划线分离培养于选择性培养基(MYP)上，置37℃培养1220h，挑取可疑的蜡样芽胞杆菌菌落(见6.1)接种于肉汤和营养琼脂做成纯培养，然后做证实试验。6.3证实试验GB4789.14一P6.3.1形态观察本菌为革兰氏阳性大杆菌，宽度在11em或1(am以上，芽胞呈卵圆形，不突出菌体，多...
