中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验鲜乳中抗生素残留量检验GB4789.27一94MicrobiologicalexaminationoffoodhygieneExaminationofresidueofantibioticsinfreshmilk代替GB4789.27一841主肠内容与适用范围本标准规定了鲜乳中抗生素残留量的检验方法。本标准适用于能杀灭嗜热乳酸链球菌的各种常用抗生素的检验。2设备和材料:.;水浴。温箱。2.3锅。2.4loo0C温度计。2.5蜡笔。2.6试管架。2.7灭菌吸管:10mL,2.8灭菌吸管:1mL,2.9灭菌试管:15mmX150mm,3菌种、培并墓和试荆I1菌种:嗜热乳酸链球菌。3.2脱脂乳:经113'C灭菌20min,3.34%2,3,5-氯化三苯四氮哇(TTC)水溶液:称取1gTTC,溶于5mL灭菌蒸馏水中,装褐色瓶内于7℃冰箱保存,临用时用灭菌燕馏水稀释至5倍。如遇溶液变为玉色或淡褐色,则不能再用。4检验程序鲜乳中抗生素残留检验程序如下中华人民共和国卫生郎1994一03一,8批准1994一09一01实施GB4789.27-945操作步骤5.1菌液制备:将菌种移种脱脂乳,经36士1℃培养15h后,以灭菌脱脂乳1:1稀释待用.5.2取检样9mL,置15mmX150mm试管内,80℃水浴加热5min冷却37℃以下,加菌液1mL,36士1℃水浴培养2h,加TTCO.3mL,36士1℃水浴培养30min,观察如为阳性,再于水浴中培养30min作第二次观察,每份检样作二份,另外再作阴性和阳性对照各一份,阳性对照管用无抗生素的乳8mL加抗生素及菌液和TTC。阴性对照管用无抗生素乳9mL加菌液和TTC,5.3判断方法:准确培养30min观察结果,如为阳性,再继续培养30min作第二次观察。观察时要迅速,避免光照过久发生干扰。乳中有抗生素存在,则检样中虽加入菌液培养物,但因细菌的繁殖受到抑制,因此指示剂TTC不还原,不显色。与此相反,如果没有抗生素存在,则加入菌液即行增殖,TTC被还原而显红色,也就是说检样呈乳的原色时为阳性,呈红色为阴性。表1显色状态判断标准显色状态判断未显色者徽红色者桃红色一红色阳性可疑阴性ce4789.27-94表2检测各种抗生素的灵敏度抗生素名称最低检出量青母家链母素庆大.素卡那母家0.004单位0.5单位0.4单位5单位附加说明:本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由上海市食品卫生监督检验所负责起草。本标准主要起草人徐用宽。本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。